| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第12-21页 |
| 0.1 胆固醇与心血管疾病 | 第12-15页 |
| 0.1.1 胆固醇合成与代谢 | 第12-13页 |
| 0.1.2 24-脱氢胆固醇合成酶 | 第13-14页 |
| 0.1.3 心血管疾病 | 第14-15页 |
| 0.2 传统降胆固醇药物与新型降胆固醇药物 | 第15-18页 |
| 0.2.1 经典的降胆固醇药物-他汀类药物 | 第15-16页 |
| 0.2.2 传统非他汀类降胆固醇药物 | 第16页 |
| 0.2.3 新型降胆固醇药物 | 第16-18页 |
| 0.3 RNA干扰技术 | 第18-19页 |
| 0.4 腺病毒载体 | 第19页 |
| 0.5 研究目的与意义 | 第19-21页 |
| 第1章 Ad-siDHCR24干扰HepG2细胞DHCR24基因表达效率的研究 | 第21-32页 |
| 1.1 前言 | 第21-22页 |
| 1.2 实验材料 | 第22-24页 |
| 1.2.1 生化试剂及耗材 | 第22-23页 |
| 1.2.2 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 1.3 实验方法 | 第24-28页 |
| 1.3.1 HepG2(人肝癌细胞)细胞的复苏,传代,冻存 | 第24-25页 |
| 1.3.1.1 HepG2(人肝癌细胞)细胞的复苏 | 第24页 |
| 1.3.1.2 HepG2(人肝癌细胞)细胞的传代 | 第24页 |
| 1.3.1.3 HepG2(人肝癌细胞)细胞的冻存 | 第24-25页 |
| 1.3.2 Ad-siDHCR24腺病毒纯化 | 第25页 |
| 1.3.3 实时荧光定量PCR | 第25-26页 |
| 1.3.3.1 RNA提取 | 第25页 |
| 1.3.3.2 cDNA合成 | 第25-26页 |
| 1.3.3.3 实时荧光定量PCR反应 | 第26页 |
| 1.3.4 WesternBlot | 第26-28页 |
| 1.3.4.1 HepG2细胞总蛋白提取 | 第26-27页 |
| 1.3.4.2 HepG2细胞总蛋白浓度测定 | 第27页 |
| 1.3.4.3 WesternBlot | 第27-28页 |
| 1.3.5 数据处理 | 第28页 |
| 1.4 结果与讨论 | 第28-30页 |
| 1.4.1 Ad-siDHCR24干扰HepG2细胞中DHCR24mRNA的表达的效率检测 | 第28-29页 |
| 1.4.2 Ad-siDHCR24Mix下调HepG2细胞中DHCR24蛋白的表达 | 第29-30页 |
| 1.5 结论 | 第30-32页 |
| 第2章 Ad-siDHCR24在HepG2细胞中降胆固醇效果研究 | 第32-38页 |
| 2.1 前言 | 第32页 |
| 2.1.1 细胞内胆固醇荧光染色法 | 第32页 |
| 2.1.2 高效液相色谱法 | 第32页 |
| 2.2 实验材料 | 第32-33页 |
| 2.2.1 生化试剂及耗材 | 第32-33页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第33页 |
| 2.3 实验方法 | 第33-34页 |
| 2.3.1 细胞胆固醇荧光染色 | 第33页 |
| 2.3.2 细胞内总脂质的提取 | 第33-34页 |
| 2.3.3 高效液相检测细胞内胆固醇水平 | 第34页 |
| 2.3.4 数据处理 | 第34页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第34-37页 |
| 2.4.1 细胞胆固醇荧光染色法检测Ad-siDHCR24降胆固醇效果 | 第34-36页 |
| 2.4.2 HPLC检测Ad-siDHCR24降胆固醇效果 | 第36-37页 |
| 2.5 结论 | 第37-38页 |
| 第3章 高血脂动物水平检测Ad-siDHCR24降低血脂效果研究 | 第38-45页 |
| 3.1 前言 | 第38-39页 |
| 3.1.1 C57BL/6J小鼠 | 第38页 |
| 3.1.2 小鼠血脂测定 | 第38-39页 |
| 3.2 实验材料、试剂与仪器设备 | 第39-40页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第39页 |
| 3.2.2 实验主要材料试剂 | 第39页 |
| 3.2.3 实验主要仪器设备 | 第39-40页 |
| 3.3 实验方法 | 第40-42页 |
| 3.3.1 实验分组 | 第40页 |
| 3.3.2 造模与给药 | 第40页 |
| 3.3.3 样本处理以及处理方法 | 第40页 |
| 3.3.4 肝脏组织切片HE染色 | 第40-41页 |
| 3.3.5 小鼠血清胆固醇测定方法 | 第41页 |
| 3.3.6 小鼠血清甘油三酯测定方法 | 第41页 |
| 3.3.7 小鼠血清HDL-C和LDL-C测定方法 | 第41-42页 |
| 3.3.8 数据处理 | 第42页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第42-44页 |
| 3.4.1 Ad-siDHCR24降低高血脂小鼠的血脂水平 | 第42-43页 |
| 3.4.2 Ad-siDHCR24改善高血脂小鼠肝脏脂肪空泡化 | 第43-44页 |
| 3.5 结论 | 第44-45页 |
| 第4章 结果与展望 | 第45-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况 | 第52-53页 |
