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寨卡病毒复制子反式包装系统的构建和药物筛选应用

摘要第4-6页
abstract第6-7页
引言第14-28页
    0.1 ZIKV的发现及流行病学第14-17页
    0.2 ZIKV的生物学特性第17-20页
        0.2.1 ZIKV的分子分类和种系发生第17-18页
        0.2.2 ZIKV的基因组结构及编码蛋白的功能第18-20页
    0.3 ZIKV的传播模式第20-21页
        0.3.1 垂直传播第20页
        0.3.2 性传播第20-21页
        0.3.3 输血相关的传播第21页
    0.4 ZIKV发病机理及引起的早期免疫第21-22页
    0.5 临床表现第22-24页
        0.5.1 成人神经系统并发症第23页
        0.5.2 新生儿神经系统并发症第23-24页
        0.5.3 眼科并发症第24页
    0.6 ZIKV的诊断及防治第24-26页
        0.6.1 血清学分析第24-25页
        0.6.2 分子诊断(RT-PCR)第25页
        0.6.3 ZIKV的防治第25-26页
    0.7 复制子及其病毒样颗粒第26页
    0.8 ZIKV复制子的目的、内容及其意义第26-28页
第1章 稳定表达海肾荧光素酶(Rluc)的ZIKV复制子的构建第28-41页
    1.1 前言第28页
    1.2 实验材料和试剂第28-31页
        1.2.1 菌株、质粒和细胞第28-29页
        1.2.2 细菌培养基第29页
        1.2.3 主要试剂第29页
        1.2.4 主要仪器第29-30页
        1.2.5 引物合成第30-31页
        1.2.6 数据显著性分析第31页
    1.3 实验方法第31-37页
        1.3.1 实验材料的准备第31-32页
        1.3.2 复制子的构建第32-34页
        1.3.3 复制子及其突变体转染Vero细胞第34页
        1.3.4 海肾荧光素酶活性实验第34-35页
        1.3.5 RNA提取及RT-PCR第35-37页
    1.4 实验结果第37-40页
        1.4.1 Rluc-ZIKV-Rep的构建第37-38页
        1.4.2 复制子在细胞中稳定表达的鉴定第38-40页
    1.5 讨论第40-41页
第2章 复制子用于抗病毒药物筛选实验第41-46页
    2.1 实验材料和试剂第41-42页
        2.1.1 细胞第41页
        2.1.2 主要试剂及药物第41页
        2.1.3 主要仪器第41-42页
    2.2 实验方法第42-43页
        2.2.1 复制子转染Vero细胞第42页
        2.2.2 海肾荧光素酶活性测定第42页
        2.2.3 细胞活性实验第42页
        2.2.4 数据显著性分析第42-43页
    2.3 实验结果第43-45页
        2.3.1 马尼地平和西尼地平用于药物筛选实验第43-44页
        2.3.2 AR-12用于药物筛选实验第44-45页
    2.4 讨论第45-46页
第3章 ZIKV复制子反式包装系统的构建第46-59页
    3.1 前言第46页
    3.2 实验材料和试剂第46-48页
        3.2.1 菌株和细胞第46-47页
        3.2.2 主要试剂第47页
        3.2.3 细菌培养基第47页
        3.2.4 主要仪器第47页
        3.2.5 引物合成第47页
        3.2.6 数据显著性分析第47-48页
    3.3 实验方法第48-55页
        3.3.1 实验材料的准备第48页
        3.3.2 CprME-pcDNA3.1(+)真核表达载体的构建第48-51页
        3.3.3 Western Blot鉴定CprME-pcDNA3.1(+)在细胞内的表达第51-54页
        3.3.4 共转染和顺次转染实验第54页
        3.3.5 VLPs感染实验第54-55页
    3.4 结果第55-58页
        3.4.1 Western blot法鉴定CprME-pcDNA3.1在细胞内的表达第55页
        3.4.2 VLP感染实验第55-58页
    3.5 讨论第58-59页
第4章 结论第59-60页
致谢第60-61页
参考文献第61-70页
附录 A 英文缩略词第70-72页
附录 B 常用试剂配方第72-74页
攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况第74-75页

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