摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
引言 | 第14-28页 |
0.1 ZIKV的发现及流行病学 | 第14-17页 |
0.2 ZIKV的生物学特性 | 第17-20页 |
0.2.1 ZIKV的分子分类和种系发生 | 第17-18页 |
0.2.2 ZIKV的基因组结构及编码蛋白的功能 | 第18-20页 |
0.3 ZIKV的传播模式 | 第20-21页 |
0.3.1 垂直传播 | 第20页 |
0.3.2 性传播 | 第20-21页 |
0.3.3 输血相关的传播 | 第21页 |
0.4 ZIKV发病机理及引起的早期免疫 | 第21-22页 |
0.5 临床表现 | 第22-24页 |
0.5.1 成人神经系统并发症 | 第23页 |
0.5.2 新生儿神经系统并发症 | 第23-24页 |
0.5.3 眼科并发症 | 第24页 |
0.6 ZIKV的诊断及防治 | 第24-26页 |
0.6.1 血清学分析 | 第24-25页 |
0.6.2 分子诊断(RT-PCR) | 第25页 |
0.6.3 ZIKV的防治 | 第25-26页 |
0.7 复制子及其病毒样颗粒 | 第26页 |
0.8 ZIKV复制子的目的、内容及其意义 | 第26-28页 |
第1章 稳定表达海肾荧光素酶(Rluc)的ZIKV复制子的构建 | 第28-41页 |
1.1 前言 | 第28页 |
1.2 实验材料和试剂 | 第28-31页 |
1.2.1 菌株、质粒和细胞 | 第28-29页 |
1.2.2 细菌培养基 | 第29页 |
1.2.3 主要试剂 | 第29页 |
1.2.4 主要仪器 | 第29-30页 |
1.2.5 引物合成 | 第30-31页 |
1.2.6 数据显著性分析 | 第31页 |
1.3 实验方法 | 第31-37页 |
1.3.1 实验材料的准备 | 第31-32页 |
1.3.2 复制子的构建 | 第32-34页 |
1.3.3 复制子及其突变体转染Vero细胞 | 第34页 |
1.3.4 海肾荧光素酶活性实验 | 第34-35页 |
1.3.5 RNA提取及RT-PCR | 第35-37页 |
1.4 实验结果 | 第37-40页 |
1.4.1 Rluc-ZIKV-Rep的构建 | 第37-38页 |
1.4.2 复制子在细胞中稳定表达的鉴定 | 第38-40页 |
1.5 讨论 | 第40-41页 |
第2章 复制子用于抗病毒药物筛选实验 | 第41-46页 |
2.1 实验材料和试剂 | 第41-42页 |
2.1.1 细胞 | 第41页 |
2.1.2 主要试剂及药物 | 第41页 |
2.1.3 主要仪器 | 第41-42页 |
2.2 实验方法 | 第42-43页 |
2.2.1 复制子转染Vero细胞 | 第42页 |
2.2.2 海肾荧光素酶活性测定 | 第42页 |
2.2.3 细胞活性实验 | 第42页 |
2.2.4 数据显著性分析 | 第42-43页 |
2.3 实验结果 | 第43-45页 |
2.3.1 马尼地平和西尼地平用于药物筛选实验 | 第43-44页 |
2.3.2 AR-12用于药物筛选实验 | 第44-45页 |
2.4 讨论 | 第45-46页 |
第3章 ZIKV复制子反式包装系统的构建 | 第46-59页 |
3.1 前言 | 第46页 |
3.2 实验材料和试剂 | 第46-48页 |
3.2.1 菌株和细胞 | 第46-47页 |
3.2.2 主要试剂 | 第47页 |
3.2.3 细菌培养基 | 第47页 |
3.2.4 主要仪器 | 第47页 |
3.2.5 引物合成 | 第47页 |
3.2.6 数据显著性分析 | 第47-48页 |
3.3 实验方法 | 第48-55页 |
3.3.1 实验材料的准备 | 第48页 |
3.3.2 CprME-pcDNA3.1(+)真核表达载体的构建 | 第48-51页 |
3.3.3 Western Blot鉴定CprME-pcDNA3.1(+)在细胞内的表达 | 第51-54页 |
3.3.4 共转染和顺次转染实验 | 第54页 |
3.3.5 VLPs感染实验 | 第54-55页 |
3.4 结果 | 第55-58页 |
3.4.1 Western blot法鉴定CprME-pcDNA3.1在细胞内的表达 | 第55页 |
3.4.2 VLP感染实验 | 第55-58页 |
3.5 讨论 | 第58-59页 |
第4章 结论 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-70页 |
附录 A 英文缩略词 | 第70-72页 |
附录 B 常用试剂配方 | 第72-74页 |
攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况 | 第74-75页 |