| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 第一章 文献综述及本研究目的 | 第13-22页 |
| 1.1 烟粉虱的分布与危害 | 第13-15页 |
| 1.1.1 烟粉虱概述 | 第13-15页 |
| 1.2 唾液在植物—昆虫互作中的作用 | 第15-18页 |
| 1.2.1 刺吸式口器昆虫唾液的组成与作用 | 第15-17页 |
| 1.2.2 烟粉虱唾液腺的结构与功能预测 | 第17-18页 |
| 1.3 刺吸式昆虫唾液的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.1 转录组分析昆虫唾液组分 | 第18-19页 |
| 1.3.2 质谱鉴定昆虫唾液蛋白 | 第19-20页 |
| 1.4 本研究的目的与主要内容 | 第20-22页 |
| 1.4.1 研究目的 | 第20-21页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 烟粉虱唾液腺的转录组分析 | 第22-49页 |
| 2.1 基本材料 | 第22-28页 |
| 2.1.1 供试昆虫与其实验种群维持 | 第22页 |
| 2.1.2 主要仪器与设备 | 第22-24页 |
| 2.1.2.1 烟粉虱饲养与转移工具 | 第23页 |
| 2.1.2.2 烟粉虱解剖与唾液腺收集工具 | 第23页 |
| 2.1.2.3 分子生物学研究中的相关仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.1.3 分子生物学研究中的相关试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.4 用以分析的相关软件与网站 | 第25页 |
| 2.1.5 烟粉虱隐种鉴定 | 第25-28页 |
| 2.1.5.1 烟粉虱基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.1.5.2 鉴定烟粉虱隐种 | 第26页 |
| 2.1.5.3 烟粉虱COI序列扩增 | 第26-27页 |
| 2.1.5.4 COI扩增产物酶切 | 第27页 |
| 2.1.5.5 电泳检测区分各隐种 | 第27-28页 |
| 2.2 烟粉虱唾液主腺、附腺及无唾液腺虫体转录组的测序与分析方法 | 第28-33页 |
| 2.2.1 烟粉虱唾液腺主腺与附腺的解剖 | 第28页 |
| 2.2.2 RNA提取 | 第28-30页 |
| 2.2.2.1 烟粉虱唾液腺微量RNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.2.2 无唾液腺的烟粉虱虫体RNA提取 | 第29-30页 |
| 2.2.3 单细胞转录组扩增与产物DNA检测 | 第30页 |
| 2.2.4 RNA质量检测 | 第30页 |
| 2.2.5 单细胞转录组文库构建 | 第30-31页 |
| 2.2.6 普通转录组文库构建 | 第31页 |
| 2.2.7 文库质检、成簇与测序 | 第31页 |
| 2.2.8 数据信息分析 | 第31-33页 |
| 2.2.8.1 数据质量控制 | 第32页 |
| 2.2.8.2 数据组装与评估 | 第32页 |
| 2.2.8.3 ORF预测与基因功能注释 | 第32-33页 |
| 2.2.8.4 GO和KEGG富集分析 | 第33页 |
| 2.2.8.5 转录组序列表达量的计算 | 第33页 |
| 2.2.8.6 烟粉虱潜在分泌蛋白预测 | 第33页 |
| 2.3 转录组测序结果与分析 | 第33-46页 |
| 2.3.1 烟粉虱唾液腺主腺、附腺转录组分析情况 | 第34-35页 |
| 2.3.2 烟粉虱唾液腺转录组的GO分类,KEGG富集以及COG分析 | 第35-39页 |
| 2.3.3 唾液腺主腺与附腺中的潜在分泌蛋白 | 第39-40页 |
| 2.3.4 主腺和附腺中潜在分泌蛋白的GO富集分析 | 第40-44页 |
| 2.3.5 唾液腺主腺与附腺的特异表达基因分析 | 第44-46页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第46-49页 |
| 第三章 烟粉虱唾液蛋白的质谱鉴定 | 第49-61页 |
| 3.1 基本材料 | 第49-51页 |
| 3.1.1 供试昆虫与其实验种群维持 | 第49页 |
| 3.1.2 主要仪器与设备 | 第49-50页 |
| 3.1.2.1 烟粉虱饲养与转移工具 | 第49页 |
| 3.1.2.2 相关仪器设备 | 第49-50页 |
| 3.1.3 分子生物学研究的相关试剂 | 第50-51页 |
| 3.1.4 分析相关软件 | 第51页 |
| 3.2 烟粉虱唾液样品收集和鉴定方法 | 第51-55页 |
| 3.2.1 人工饲料与蛋白处理试剂的配置 | 第51-52页 |
| 3.2.1.1 10%的蔗糖水的配置 | 第51页 |
| 3.2.1.2 2.5%的蔗糖水的配置 | 第51页 |
| 3.2.1.3 含有0.1%间苯二酚的双蒸水 | 第51页 |
| 3.2.1.4 2% SDS的Tris溶液(PH 8.0)的配制 | 第51-52页 |
| 3.2.2 MED烟粉虱唾液收集 | 第52-53页 |
| 3.2.3 唾液蛋白的质谱鉴定 | 第53-55页 |
| 3.2.3.1 唾液样品处理与SDS-PAGE电泳 | 第53页 |
| 3.2.3.2 蛋白样品酶解 | 第53-54页 |
| 3.2.3.3 LC-MS/MS分析 | 第54页 |
| 3.2.3.4 质谱数据分析 | 第54-55页 |
| 3.3 唾液质谱结果与分析 | 第55-61页 |
| 第四章 总结 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
