致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第13-33页 |
1.1 DNA损伤修复机制 | 第13-19页 |
1.1.1 DNA断裂修复 | 第13-15页 |
1.1.2 错配修复(MMR) | 第15-17页 |
1.1.3 碱基切除修复(BER) | 第17-19页 |
1.2 农杆菌T-DNA的转移与整合机制 | 第19-23页 |
1.2.1 T-DNA转移与整合的过程 | 第19-20页 |
1.2.2 T-DNA整合的位点分布与结构特征 | 第20-21页 |
1.2.3 T-DNA整合的机理 | 第21-23页 |
1.3 植物基因对农杆菌T-DNA转运和整合的作用 | 第23-31页 |
1.3.1 植物对农杆菌浸染的响应 | 第23-24页 |
1.3.2 植物蛋白对T-DNA转运的影响 | 第24-25页 |
1.3.3 DNA损伤修复基因对T-DNA整合的作用 | 第25-30页 |
1.3.4 染色质相关基因的作用 | 第30-31页 |
1.4 本研究的内容与目的 | 第31-33页 |
第二章 DNA损伤修复相关基因对农杆菌浸染的响应 | 第33-42页 |
2.1 实验材料 | 第33-34页 |
2.2 实验方法 | 第34-37页 |
2.2.1 水稻愈伤诱导 | 第34页 |
2.2.2 农杆菌转化 | 第34-35页 |
2.2.3 RNA的提取 | 第35页 |
2.2.4 逆转录合成cDNA第一链 | 第35页 |
2.2.5 qPCR反应 | 第35-37页 |
2.3 实验结果与分析 | 第37-40页 |
2.3.1 农杆菌处理后ku70和lig4基因的表达情况 | 第37-38页 |
2.3.2 农杆菌处理后rad51和reca基因的表达 | 第38页 |
2.3.3 农杆菌处理后msh2与msh6的表达 | 第38-39页 |
2.3.4 农杆菌处理后fpg与maglp基因的表达 | 第39-40页 |
2.4 讨论 | 第40-42页 |
第三章 错配和碱基切除修复基因突变对转基因瞬间表达的影响 | 第42-49页 |
3.1 实验材料 | 第42-44页 |
3.1.1 植物材料 | 第42页 |
3.1.2 质粒及菌株 | 第42-43页 |
3.1.3 相关试剂及配方 | 第43页 |
3.1.4 培养基 | 第43-44页 |
3.2 实验方法 | 第44-46页 |
3.2.1 愈伤诱导 | 第44页 |
3.2.2 潮霉素敏感性测试 | 第44页 |
3.2.3 质粒导入农杆菌 | 第44-45页 |
3.2.4 转化处理 | 第45-46页 |
3.2.5 GUS染色 | 第46页 |
3.3 结果与分析 | 第46-47页 |
3.3.1 突变体对潮霉素敏感性 | 第46页 |
3.3.2 gus瞬间表达 | 第46-47页 |
3.4 讨论 | 第47-49页 |
第四章 错配和碱基切除修复基因突变对T-DNA整合的影响 | 第49-57页 |
4.1 实验材料 | 第49页 |
4.2 实验方法 | 第49-51页 |
4.2.1 愈伤组织的筛选与分化 | 第49-50页 |
4.2.2 再生植株DNA提取 | 第50-51页 |
4.2.3 再生植株的PCR检测 | 第51页 |
4.3 结果与分析 | 第51-55页 |
4.3.1 抗性愈伤的筛选率与分化率 | 第51-53页 |
4.3.2 再生植株中hpt基因的PCR鉴定 | 第53-54页 |
4.3.3 再生植株中gus基因的PCR鉴定 | 第54-55页 |
4.4 讨论 | 第55-57页 |
第五章 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |