| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abatract | 第5-6页 |
| 本文所用英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 序言 | 第11-25页 |
| 1 胰腺癌的危害及其诊断 | 第11-13页 |
| 1.1 胰腺癌的危害 | 第11-12页 |
| 1.2 胰腺癌的现有诊断和治疗方法及不足 | 第12-13页 |
| 1.3 核酸适配体筛选对胰腺癌早期诊治研究的重要性 | 第13页 |
| 2 肿瘤核酸适配体及筛选 | 第13-19页 |
| 2.1 核酸适配体的特点 | 第13-15页 |
| 2.2 肿瘤核酸适配体筛选原理及流程 | 第15-17页 |
| 2.3 肿瘤细胞核酸适配体筛选现状 | 第17-19页 |
| 3 核酸适配体的研究和应用 | 第19-23页 |
| 3.1 核酸适配体用于检测肿瘤细胞 | 第19-20页 |
| 3.2 基于适配子的肿瘤标志物的发现 | 第20-21页 |
| 3.3 核酸适配体的肿瘤体外、体内成像 | 第21-22页 |
| 3.4 核酸适配体在血液中的捕获 | 第22-23页 |
| 4 本论文拟开展的工作 | 第23-25页 |
| 第一章 适体筛选中细胞状态控制与PCR优化 | 第25-40页 |
| 1 引言 | 第25-26页 |
| 2 实验 | 第26-31页 |
| 2.1 试剂材料与仪器 | 第26-27页 |
| 2.2 细胞选择与培养 | 第27-28页 |
| 2.3 文库与引物的选择与合成 | 第28-30页 |
| 2.4 文库PCR扩增的优化 | 第30-31页 |
| 3 结果讨论 | 第31-38页 |
| 3.1 细胞选择与状态控制 | 第31-32页 |
| 3.2 文库引物的分析 | 第32-33页 |
| 3.3 文库PCR扩增的优化 | 第33-38页 |
| 4 小结 | 第38-40页 |
| 第二章 进化文库的制备方法研究 | 第40-52页 |
| 1 引言 | 第40页 |
| 2 实验 | 第40-43页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第40-41页 |
| 2.2 溶液的配制 | 第41页 |
| 2.3 PCR双链产物的单链分离 | 第41页 |
| 2.4 乙醇沉淀法回收ss DNA | 第41-42页 |
| 2.5 除盐干燥法纯化回收ss DNA | 第42页 |
| 2.6 建立目的ss DNA的荧光定量分析方法 | 第42-43页 |
| 3 结果与讨论 | 第43-51页 |
| 3.1 利用链霉亲和素琼脂糖柱单链分离的原理 | 第43-44页 |
| 3.2 单链分离过程的荧光监控与评价 | 第44-46页 |
| 3.3 乙醇沉淀法与除盐干燥法回收ss DNA的分析评价 | 第46-49页 |
| 3.4 ss DNA的定量方法分析 | 第49-51页 |
| 4 小结 | 第51-52页 |
| 第三章 PANC-1 核酸适配体的筛选与研究 | 第52-66页 |
| 1 引言 | 第52-53页 |
| 2 实验 | 第53-57页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第53页 |
| 2.2 溶液的配制 | 第53-54页 |
| 2.3 正向筛选 | 第54页 |
| 2.4 反向筛选 | 第54-55页 |
| 2.5 流式细胞术表征进化文库 | 第55页 |
| 2.6 胶回收产物的克隆转化 | 第55-57页 |
| 3 结果讨论 | 第57-65页 |
| 3.1 筛选压力的调整及评价 | 第57-59页 |
| 3.2 流式细胞术表征 | 第59-63页 |
| 3.3 克隆测序结果 | 第63-65页 |
| 4 小结 | 第65-66页 |
| 结论与展望 | 第66-68页 |
| 1 结论 | 第66-67页 |
| 2 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文 | 第75-76页 |
| 附录 | 第76-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |