摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 前言 | 第11-19页 |
1.1 桂花品种的遗传多样性及分析方法 | 第11-13页 |
1.1.1 形态学分类研究 | 第12页 |
1.1.2 细胞学研究 | 第12页 |
1.1.3 生理生化研究 | 第12-13页 |
1.1.4 分子水平研究 | 第13页 |
1.2 常用的分子标记技术 | 第13-15页 |
1.2.1 RFLP的原理及特点 | 第13页 |
1.2.2 RAPD的原理及特点 | 第13-14页 |
1.2.3 AFLP的原理及特点 | 第14页 |
1.2.4 SRAP的原理及特点 | 第14页 |
1.2.5 SSR的原理及特点 | 第14-15页 |
1.2.6 ISSR的原理及特点 | 第15页 |
1.2.7 SCoT的原理及特点 | 第15页 |
1.3 常用分子标记技术在桂花中的应用 | 第15-17页 |
1.3.1 RAPD标记的应用 | 第15-16页 |
1.3.2 AFLP标记的应用 | 第16页 |
1.3.3 SRAP标记的应用 | 第16页 |
1.3.4 SSR标记的应用 | 第16页 |
1.3.5 ISSR标记的应用 | 第16-17页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第17-19页 |
2 桂花SSR分子标记的开发 | 第19-29页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.2 试验方法 | 第20-22页 |
2.2.1 桂花基因组DNA的提取 | 第20页 |
2.2.2 文库构建 | 第20-21页 |
2.2.3 测序反应 | 第21页 |
2.2.4 引物设计 | 第21页 |
2.2.5 优化与检测引物 | 第21-22页 |
2.3 结果分析 | 第22-26页 |
2.3.1 桂花基因组DNA的提取 | 第22页 |
2.3.2 454测序结果 | 第22-23页 |
2.3.3 桂花SSR分子标记引物检测分析 | 第23-26页 |
2.4 讨论 | 第26-29页 |
2.4.1 DNA模板质量 | 第26-27页 |
2.4.2 文库的制备 | 第27页 |
2.4.3 桂花高密度分子遗传图谱的构建 | 第27-29页 |
3 桂花SCoT引物的筛选及分析 | 第29-43页 |
3.1 实验材料 | 第29-30页 |
3.2 实验方法 | 第30-32页 |
3.2.1 桂花基因组DNA的提取 | 第30页 |
3.2.2 SCoT-PCR扩增及退火温度的筛选 | 第30-31页 |
3.2.3 DNA模板和引物浓度的筛选 | 第31页 |
3.2.4 筛选引物对12个桂花品种的扩增 | 第31页 |
3.2.5 非变性PAGE电泳 | 第31-32页 |
3.2.6 数据统计与处理 | 第32页 |
3.3 结果与分析 | 第32-38页 |
3.3.1 桂花基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
3.3.2 退火温度的确定 | 第33-34页 |
3.3.3 DNA模板用量和引物浓度的确定 | 第34-36页 |
3.3.4 12个桂花品种的SCoT分析 | 第36-37页 |
3.3.5 桂花品种间的遗传多样性分析 | 第37-38页 |
3.4 讨论 | 第38-43页 |
3.4.1 DNA模板质量 | 第38页 |
3.4.2 引物设计 | 第38页 |
3.4.3 预混体系 2×Es TaqMasterMix的控制 | 第38-39页 |
3.4.4 PCR反应的控制 | 第39页 |
3.4.5 非变性PAGE的控制 | 第39-40页 |
3.4.6 桂花遗传多样性的探讨 | 第40-43页 |
4 结论 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
致谢 | 第51-52页 |