| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 绪论 | 第9-18页 |
| 1.1 驯鹿 | 第9-11页 |
| 1.1.1 驯鹿种质资源及分布 | 第9-10页 |
| 1.1.2 驯鹿的生物学特性 | 第10页 |
| 1.1.3 驯鹿的经济价值 | 第10-11页 |
| 1.1.4 我国驯鹿的概况 | 第11页 |
| 1.2 鹿茸角 | 第11-14页 |
| 1.2.1 鹿茸化学成分及其生物活性 | 第11-12页 |
| 1.2.2 鹿茸的组织发生及生长发育 | 第12页 |
| 1.2.3 鹿茸器官的形成 | 第12-13页 |
| 1.2.4 鹿茸生长发育组织结构 | 第13页 |
| 1.2.5 鹿茸再生与调控 | 第13-14页 |
| 1.3 mRNA差异显示PCR(DDRT-PCR)技术 | 第14-16页 |
| 1.3.1 mRNA差异显示技术的原理及基本步骤 | 第14页 |
| 1.3.2 mRNA差异显示技术的优缺点 | 第14-15页 |
| 1.3.3 DDRT-PCR技术的改进及研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR) | 第16-17页 |
| 1.4.1 real-time PCR技术的原理 | 第16-17页 |
| 1.4.2 实时荧光定量PCR技术的优缺点 | 第17页 |
| 1.4.3 实时荧光定量PCR的应用 | 第17页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-27页 |
| 2.1 样品采集 | 第18-19页 |
| 2.2 试剂和引物 | 第19-20页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第19页 |
| 2.2.2 所需主要溶液的配方 | 第19页 |
| 2.2.3 LB培养基的配制 | 第19-20页 |
| 2.2.4 DDRT-PCR的引物 | 第20页 |
| 2.3 软件及网络资源 | 第20-21页 |
| 2.4 试验主要仪器设备 | 第21页 |
| 2.5 试验方法 | 第21-27页 |
| 2.5.1 试验前准备 | 第21-22页 |
| 2.5.2 鹿茸间充质组织总RNA的提取纯化及检测 | 第22页 |
| 2.5.3 mRNA差异显示PCR | 第22-23页 |
| 2.5.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第23-24页 |
| 2.5.5 差异片段切取和二次扩增 | 第24页 |
| 2.5.6 回收二次扩增产物 | 第24页 |
| 2.5.7 回收产物的克隆 | 第24-25页 |
| 2.5.8 实时荧光定量PCR定量分析 | 第25-27页 |
| 3 试验结果 | 第27-35页 |
| 3.1 总RNA提取检测 | 第27页 |
| 3.2 mRNA差异显示 | 第27-29页 |
| 3.3 差异片段回收二次扩增 | 第29页 |
| 3.4 琼脂糖凝胶回收检测 | 第29页 |
| 3.5 阳性克隆鉴定 | 第29-30页 |
| 3.6 差异片段测序与序列比对 | 第30-33页 |
| 3.7 实时荧光定量PCR | 第33-35页 |
| 3.7.1 COL6A3基因和β-actin基因实时荧光定量PCR预实验 | 第33页 |
| 3.7.2 实时荧光定量PCR溶解曲线 | 第33-34页 |
| 3.7.3 实时荧光定量PCR相对定量分析 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-39页 |
| 4.1 总RNA的提取与保存 | 第35页 |
| 4.2 mRNA差异显示PCR的改进与差异片段的筛选 | 第35-36页 |
| 4.3 高通量测序 | 第36页 |
| 4.4 部分差异序列的功能分析 | 第36-39页 |
| 4.4.1 Ae1序列的功能预测 | 第36-37页 |
| 4.4.2 Af1序列功能预测 | 第37页 |
| 4.4.3 Af3序列功能预测 | 第37页 |
| 4.4.4 Ce1序列功能预测 | 第37-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
