前言 | 第4-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文缩略词 | 第12-13页 |
第1章 文献综述 | 第13-20页 |
1 神经系统损伤模型构建 | 第13-14页 |
1.1 动物损伤模型 | 第13页 |
1.2 细胞损伤模型 | 第13-14页 |
2 与神经系统内在再生能力相关的信号通路 | 第14-18页 |
2.1 JAK/STAT3/SOCS3信号通路 | 第14页 |
2.2 Rho/ROCK信号通路 | 第14页 |
2.3 PI3K/PTEN/Akt/mTOR信号通路 | 第14-18页 |
3 神经元轴突形成及损伤后再生 | 第18-20页 |
3.1 神经元轴突形成 | 第18页 |
3.2 生长锥形成是轴突向外延伸的必要条件 | 第18-20页 |
第2章 材料与方法 | 第20-33页 |
2.1 实验仪器 | 第20-21页 |
2.2 实验细胞来源 | 第21页 |
2.3 实验试剂 | 第21-22页 |
2.4 实验试剂的配制 | 第22-23页 |
2.5 实验方法 | 第23-33页 |
2.5.1 原代神经元的培养 | 第23-24页 |
2.5.2 建立神经元氧化损伤细胞模型 | 第24-25页 |
2.5.3 质粒扩增 | 第25-26页 |
2.5.4 shRNA干扰技术 | 第26-27页 |
2.5.5 RT-PCR技术检测PTENi,CD44i,PTENi+CD44i干扰后相关基因水平 | 第27-29页 |
2.5.6 Western blot技术检测PTENi,CD44i,PTENi+CD44i干扰后相关基因mTOR、CD44和Src、pSrc蛋白表达水平 | 第29-30页 |
2.5.7 免疫荧光染色 | 第30页 |
2.5.8 Phalloidin荧光标记F-actin | 第30-31页 |
2.5.9 免疫组化染色 | 第31页 |
2.5.10 生长锥的检测 | 第31-32页 |
2.5.11 图像处理及统计学分析 | 第32-33页 |
第3章 实验结果与分析 | 第33-51页 |
3.1 原代新生大乳鼠皮层神经元的培养与鉴定 | 第33页 |
3.2 mTOR通过CD44调节Src活性 | 第33-41页 |
3.2.1 PTEN-Rat-shRNA干扰序列的鉴定 | 第33-34页 |
3.2.2 观察PTEN沉默后CD44、Src的表达 | 第34-35页 |
3.2.3 CD44-Rat-shRNA干扰序列的鉴定 | 第35页 |
3.2.4 观察CD44沉默后,PTEN、CD44和Src的表达 | 第35-36页 |
3.2.5 PTEN-U6-CD44shRNA(PTENi+CD44i)序列 | 第36-37页 |
3.2.6 检测PTENi+CD44i干扰后,PTEN,CD44,Src表达 | 第37-38页 |
3.2.7 PTENi、CD44i、PTENi+CD44i干扰后检测PTEN、mTOR、CD44、Src蛋白表达 | 第38-40页 |
3.2.8 抑制Src活性观察PTEN沉默后p Src蛋白表达 | 第40-41页 |
3.3 mTOR通过CD44/Src对损伤神经元生长锥和突起生长的作用 | 第41-51页 |
3.3.1 建立神经元氧化损伤模型 | 第41-43页 |
3.3.2 免疫荧光检测损伤神经元中pSrc的表达 | 第43-46页 |
3.3.3 mTOR通过CD44活化Src调节损伤神经元生长锥形成 | 第46-49页 |
3.3.4 mTOR通过CD44活化Src调节损伤神经元突起形态 | 第49-51页 |
第4章 讨论 | 第51-54页 |
第5章 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
研究生期间取得的科研成果 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |