| 中文摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第14-23页 |
| 1 隐孢子虫流行病学 | 第14-16页 |
| 2 隐孢子虫感染诊断方法 | 第16-20页 |
| 2.1 病原学诊断方法 | 第16-17页 |
| 2.2 分子生物学诊断方法 | 第17-19页 |
| 2.3 免疫学诊断方法 | 第19-20页 |
| 3 隐孢子虫的防治措施 | 第20-21页 |
| 4 微小隐孢子虫病毒 | 第21-23页 |
| 第二篇 研究内容 | 第23-62页 |
| 第1章 兔抗微小隐孢子虫病毒衣壳蛋白多克隆抗体的制备与纯化 | 第23-34页 |
| 1.1 试验材料 | 第23-25页 |
| 1.1.1 主要材料 | 第23-24页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第24页 |
| 1.1.3 主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| 1.2 试验方法 | 第25-28页 |
| 1.2.1 微小隐孢子虫病毒衣壳蛋白基因的扩增 | 第25-26页 |
| 1.2.2 表达载体的构建 | 第26页 |
| 1.2.3 蛋白的表达与鉴定 | 第26-27页 |
| 1.2.4 蛋白的纯化与浓缩 | 第27页 |
| 1.2.5 兔抗微小隐孢子虫病毒衣壳蛋白多克隆抗体的制备 | 第27-28页 |
| 1.2.6 多克隆抗体的纯化 | 第28页 |
| 1.3 结果 | 第28-32页 |
| 1.3.1 微小隐孢子虫病毒衣壳蛋白基因的扩增 | 第28-29页 |
| 1.3.2 克隆载体的鉴定 | 第29页 |
| 1.3.3 表达载体的鉴定 | 第29-30页 |
| 1.3.4 蛋白的表达 | 第30-31页 |
| 1.3.5 重组蛋白WesternBlotting鉴定 | 第31页 |
| 1.3.6 重组蛋白的纯化 | 第31页 |
| 1.3.7 多克隆抗体效价的测定 | 第31-32页 |
| 1.3.8 多克隆抗体的纯化 | 第32页 |
| 1.4 讨论 | 第32-33页 |
| 1.5 小结 | 第33-34页 |
| 第2章 牛微小隐孢子虫双抗夹心ELISA方法的建立 | 第34-43页 |
| 2.1 试验材料 | 第34-35页 |
| 2.1.1 主要材料 | 第34页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第34-35页 |
| 2.2 试验方法 | 第35-37页 |
| 2.2.1 粪便样品处理方法 | 第35页 |
| 2.2.2 双抗夹心ELISA检测方法条件的确定 | 第35-36页 |
| 2.2.3 判断标准确定 | 第36页 |
| 2.2.4 敏感性试验 | 第36-37页 |
| 2.2.5 特异性试验 | 第37页 |
| 2.2.6 重复性试验 | 第37页 |
| 2.2.7 样品检测 | 第37页 |
| 2.3 结果 | 第37-41页 |
| 2.3.1 包被单抗量及样品稀释度的确定 | 第37-38页 |
| 2.3.2 最佳封闭剂的确定 | 第38页 |
| 2.3.3 HRP标记多抗工作浓度确定 | 第38页 |
| 2.3.4 底物反应时间的确定 | 第38-39页 |
| 2.3.5 临界值的判断 | 第39页 |
| 2.3.6 敏感性试验 | 第39页 |
| 2.3.7 特异性试验 | 第39-40页 |
| 2.3.8 重复性试验 | 第40页 |
| 2.3.9 样品检测 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-42页 |
| 2.5 小结 | 第42-43页 |
| 第3章 牛微小隐孢子虫感染Dot-ELISA检测方法的建立 | 第43-49页 |
| 3.1 试验材料 | 第43-44页 |
| 3.1.1 主要材料 | 第43页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第43-44页 |
| 3.2 试验方法 | 第44-45页 |
| 3.2.1 Dot-ELISA操作步骤 | 第44页 |
| 3.2.2 Dot-ELISA检测方法条件的确定 | 第44-45页 |
| 3.2.3 敏感性试验 | 第45页 |
| 3.2.4 特异性试验 | 第45页 |
| 3.2.5 重复性试验 | 第45页 |
| 3.2.6 样品检测 | 第45页 |
| 3.3 结果 | 第45-47页 |
| 3.3.1 样品最佳稀释度的确定 | 第45页 |
| 3.3.2 HRP标记的多抗工作浓度的确定 | 第45-46页 |
| 3.3.3 包被单抗最佳工作浓度的确定 | 第46页 |
| 3.3.4 敏感性试验 | 第46页 |
| 3.3.5 特异性试验 | 第46页 |
| 3.3.6 重复性试验 | 第46-47页 |
| 3.3.7 样品检测 | 第47页 |
| 3.4 讨论 | 第47-48页 |
| 3.5 小结 | 第48-49页 |
| 第4章 牛微小隐孢子虫免疫胶体金试纸条的研制 | 第49-62页 |
| 4.1 试验材料 | 第49-51页 |
| 4.1.1 主要材料 | 第49页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第49-50页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第50-51页 |
| 4.2 试验方法 | 第51-54页 |
| 4.2.1 胶体金溶液的烧制 | 第51页 |
| 4.2.2 胶体金颗粒的鉴定 | 第51页 |
| 4.2.3 最佳PH值的确定 | 第51-52页 |
| 4.2.4 抗体最佳标记量的确定 | 第52页 |
| 4.2.5 金标抗体的制备与鉴定 | 第52页 |
| 4.2.6 试纸条的组装 | 第52页 |
| 4.2.7 试纸条判定标准 | 第52-53页 |
| 4.2.8 试纸条反应条件的确定 | 第53页 |
| 4.2.9 试纸条性能试验 | 第53-54页 |
| 4.2.10 临床样品检测 | 第54页 |
| 4.3 结果 | 第54-60页 |
| 4.3.1 胶体金溶液的烧制 | 第54页 |
| 4.3.2 透射电镜观察 | 第54-55页 |
| 4.3.3 最佳pH的确定 | 第55-56页 |
| 4.3.4 最佳抗体标记量的确定 | 第56页 |
| 4.3.5 检测线(T)最佳包被浓度 | 第56-57页 |
| 4.3.6 质控线(C)最佳包被浓度 | 第57页 |
| 4.3.7 特异性试验 | 第57-58页 |
| 4.3.8 敏感性试验 | 第58页 |
| 4.3.9 重复性试验 | 第58-59页 |
| 4.3.10 保存期试验 | 第59-60页 |
| 4.3.11 临床样品检测 | 第60页 |
| 4.4 讨论 | 第60-61页 |
| 4.5 小结 | 第61-62页 |
| 结论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 导师简介 | 第74-76页 |
| 作者简介 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
