| 中文摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写词表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第14-26页 |
| 第一章 布鲁氏菌的研究进展 | 第14-21页 |
| 1.1 布鲁氏菌的分类和特性 | 第14-15页 |
| 1.2 布鲁氏菌病的现状 | 第15页 |
| 1.3 布鲁氏菌的感染机制 | 第15-19页 |
| 1.3.1 布鲁氏菌的传播方式 | 第16页 |
| 1.3.2 布鲁氏菌逃避免疫系统机制 | 第16-19页 |
| 1.4 布鲁氏菌病的检测和疫苗 | 第19-20页 |
| 1.5 布鲁氏菌的基因编辑方法 | 第20-21页 |
| 第二章 CRISPR的研究进展 | 第21-26页 |
| 2.1 CRISPR的来源 | 第21-22页 |
| 2.2 CRISPR的发展 | 第22-23页 |
| 2.3 CRISPR的应用 | 第23-24页 |
| 2.4 CRISPR的优势与前景 | 第24-26页 |
| 第二篇 研究内容 | 第26-67页 |
| 第一章 组成型的CRISPR/cas9系统在布鲁氏菌中的基因编辑效果 | 第26-43页 |
| 1.1 材料 | 第26-29页 |
| 1.1.1 主要菌株、引物和质粒 | 第26-29页 |
| 1.1.2 主要试剂、抗生素和培养基 | 第29页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第29页 |
| 1.2 方法 | 第29-37页 |
| 1.2.1 质粒的构建 | 第30-34页 |
| 1.2.2 布鲁氏菌的转化 | 第34-36页 |
| 1.2.3 Western Blot | 第36-37页 |
| 1.3 结果 | 第37-41页 |
| 1.3.1 组成型cas9表达载体pBBR2-cas9-gRNA-H的构建 | 第37-40页 |
| 1.3.2 组成型的CRISPR/cas9的切割效果 | 第40-41页 |
| 1.3.3 组成型的CRISPR/cas9的编辑效果 | 第41页 |
| 1.4 讨论 | 第41-42页 |
| 1.5 小结 | 第42-43页 |
| 第二章 组成型的CRISPR/cpf1系统在布鲁氏菌中的基因编辑效果 | 第43-53页 |
| 2.1 材料 | 第43-46页 |
| 2.1.1 主要菌株、引物、质粒 | 第43-46页 |
| 2.1.2 主要试剂、抗生素和培养基 | 第46页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第46页 |
| 2.2 方法 | 第46页 |
| 2.3 结果 | 第46-51页 |
| 2.3.1 组成型Fn/Lbcpf1表达载体pBBR2-Fn/Lbcpf1-gRNA-H的构建 | 第46-50页 |
| 2.3.2 组成型的Fn/Lbcpf1的切割效果 | 第50-51页 |
| 2.3.3 组成型的pBBR2-Fn/Lbcpf1-crRNA1/2-H1/H2的编辑效果 | 第51页 |
| 2.4 讨论 | 第51-52页 |
| 2.5 小结 | 第52-53页 |
| 第三章 诱导型的CRISPR/cas9系统在布鲁氏菌中的基因编辑效果 | 第53-67页 |
| 3.1 材料 | 第54-57页 |
| 3.1.1 主要菌株、引物、质粒 | 第54-57页 |
| 3.1.2 主要试剂、抗生素和培养基 | 第57页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第57页 |
| 3.2 方法 | 第57页 |
| 3.3 结果 | 第57-64页 |
| 3.3.1 诱导型CRISPR/cas9载体pBBR2-lac-cas9-gRNA-H的构建 | 第57-61页 |
| 3.3.2 温度诱导型CRISPR/cas9载体pBBR2-cits-cas9-gRNA-H的构建 | 第61-64页 |
| 3.4 讨论 | 第64-65页 |
| 3.5 小结 | 第65-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 导师简介 | 第75-77页 |
| 作者简介 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
