摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
1 引言 | 第11-20页 |
1.1 山羊肉品质研究进展 | 第11页 |
1.2 衡量肉品质优劣的标准 | 第11-13页 |
1.3 肌纤维研究概述 | 第13-14页 |
1.3.1 肌纤维的类型研究 | 第13页 |
1.3.2 肌肉的产生及分化 | 第13-14页 |
1.3.3 肌纤维类型对肉品质的影响 | 第14页 |
1.4 影响肉品质相关基因 | 第14-15页 |
1.4.1 与肌纤维生长发育的相关基因 | 第14-15页 |
1.4.2 MYL3蛋白概述 | 第15页 |
1.5 蛋白质组学研究 | 第15-18页 |
1.5.1 蛋白质组学概述 | 第15-16页 |
1.5.2 传统蛋白质组学研究方法 | 第16-17页 |
1.5.3 非标记定量-SWATH技术 | 第17页 |
1.5.4 蛋白质组学在肉品质中的研究进展 | 第17-18页 |
1.6 目的意义 | 第18-20页 |
1.7 技术路线 | 第20页 |
2 研究一内蒙古绒山羊骨骼肌氨基酸与脂肪酸测定 | 第20-29页 |
2.1 试验材料 | 第20-21页 |
3.1.1 试验样品 | 第20页 |
3.1.2 主要试剂和溶液配制 | 第20-21页 |
2.2 试验方法 | 第21-23页 |
3.2.1 氨基酸的提取 | 第21-22页 |
3.2.2 氨基酸的测定 | 第22页 |
3.2.3 脂肪酸提取 | 第22页 |
3.2.4 脂肪酸测定 | 第22页 |
3.2.5 数据处理 | 第22-23页 |
2.3 试验结果与分析 | 第23-27页 |
3.3.1 氨基酸的测定 | 第23-24页 |
3.3.2 氨基酸显著性分析 | 第24-25页 |
3.3.3 脂肪酸测定 | 第25-26页 |
3.3.4 脂肪酸显著性分析 | 第26-27页 |
2.4 讨论 | 第27-29页 |
2.4.1 实验技术中的注意事项 | 第27页 |
2.4.2 实验结果分析 | 第27-29页 |
2.5 小结 | 第29页 |
3 研究二内蒙古绒山羊骨骼肌蛋白库构建 | 第29-40页 |
3.1 实验材料 | 第29-30页 |
3.1.1 试验样品 | 第29页 |
3.1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
3.1.3 主要仪器软件 | 第30页 |
3.2 试验方法 | 第30-33页 |
3.2.1 总蛋白提取 | 第30-31页 |
3.2.2 蛋白浓度的测定 | 第31页 |
3.2.3 SDS-PAGE凝胶电泳检测 | 第31-32页 |
3.2.4 总蛋白的酶解 | 第32页 |
3.2.5 液相色谱质谱联用检测 | 第32-33页 |
3.2.6 总蛋白的鉴定 | 第33页 |
3.2.7 GO功能分析 | 第33页 |
3.2.8 KEGG通路富集分析 | 第33页 |
3.3 试验结果与分析 | 第33-38页 |
3.3.1 总蛋白提取 | 第33-35页 |
3.3.2 液相色谱质谱联用采集数据 | 第35页 |
3.3.3 绒山羊总蛋白建库 | 第35-36页 |
3.3.4 总蛋白GO功能分析 | 第36-37页 |
3.3.5 总蛋白KEGG通路分析 | 第37-38页 |
3.4 讨论 | 第38-40页 |
3.5 小结 | 第40页 |
4 研究三内蒙古绒山羊影响肉质的差异蛋白筛选 | 第40-54页 |
4.1 试验材料 | 第40-42页 |
4.1.1 试验样品 | 第40页 |
4.1.2 主要试剂 | 第40-41页 |
4.1.3 主要仪器软件 | 第41-42页 |
4.2 试验方法 | 第42-43页 |
4.2.1 总蛋白的提取 | 第42页 |
4.2.2 总蛋白的酶解 | 第42页 |
4.2.3 液相色谱质谱联用检测 | 第42-43页 |
4.2.4 保留时间校准 | 第43页 |
4.2.5 差异蛋白的筛选 | 第43页 |
4.2.6 差异蛋白功能及通路分析 | 第43页 |
4.3 试验结果与分析 | 第43-52页 |
4.3.1 液相色谱质谱联用检测 | 第43-44页 |
4.3.2 差异蛋白筛选与鉴定 | 第44-45页 |
4.3.3 与肌纤维相关的差异蛋白 | 第45-46页 |
4.3.4 肌纤维结构差异蛋白KEGG注释 | 第46-51页 |
4.3.5 肌球蛋白轻链3(MYL3)蛋白网络互作 | 第51-52页 |
4.4 讨论 | 第52-53页 |
4.5 小结 | 第53-54页 |
5 研究四MYL3蛋白的westernblot定量与免疫组化定位研究 | 第54-62页 |
5.1 试验材料 | 第54-55页 |
5.1.1 试验样品 | 第54页 |
5.1.2 主要试剂 | 第54页 |
5.1.3 主要仪器软件 | 第54-55页 |
5.2 试验方法 | 第55-58页 |
5.2.1 提取绒山羊肌肉组织的总蛋白质 | 第55页 |
5.2.2 BCA法测总蛋白浓度 | 第55页 |
5.2.3 目的蛋白与内参的Westernblot试验 | 第55-57页 |
5.2.4 组织石蜡切片的制备 | 第57页 |
5.2.5 免疫组化过程 | 第57-58页 |
5.3 试验结果与分析 | 第58-59页 |
5.3.1 MYL3蛋白的westernblot定量研究 | 第58页 |
5.3.2 MYL3蛋白的免疫组化定位研究 | 第58-59页 |
5.4 讨论 | 第59-60页 |
5.5 小结 | 第60-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
附表 | 第70-72页 |
作者简介 | 第72页 |