| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 1 引言 | 第12-23页 |
| 1.1 DUF结构域简介 | 第12页 |
| 1.2 植物中DUF家族的生物学功能 | 第12-15页 |
| 1.2.1 DUF家族与植物生长发育 | 第13-14页 |
| 1.2.2 DUF家族与植物逆境胁迫 | 第14-15页 |
| 1.2.3 DUF家族参与的其它生命活动 | 第15页 |
| 1.3 DUF220、DUF247和DUF966结构域研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 植物与氮元素 | 第16-18页 |
| 1.5 植物与乙烯 | 第18-21页 |
| 1.6 中间锦鸡儿及相关研究 | 第21页 |
| 1.7 研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 1.8 技术路线 | 第22-23页 |
| 2 实验材料和方法 | 第23-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株 | 第23页 |
| 2.1.3 质粒 | 第23页 |
| 2.2 实验药品、试剂和仪器 | 第23-28页 |
| 2.2.1 试剂盒 | 第23-24页 |
| 2.2.2 实验药品、试剂及酶 | 第24页 |
| 2.2.3 培养基和相关试剂的配置 | 第24-26页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.2.5 本研究涉及的引物序列 | 第27页 |
| 2.2.6 相关软件及相关网站 | 第27-28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-37页 |
| 2.3.1 中间锦鸡儿处理方法 | 第28页 |
| 2.3.2 拟南芥处理方法 | 第28-29页 |
| 2.3.3 RNA提取及cDNA的合成 | 第29页 |
| 2.3.4 DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.3.5 启动子的克隆及分析 | 第30页 |
| 2.3.6 基因表达分析 | 第30-31页 |
| 2.3.7 目的基因的克隆 | 第31-32页 |
| 2.3.8 重组质粒构建及感受态细胞的转化方法 | 第32-34页 |
| 2.3.9 目的片段胶回收 | 第34页 |
| 2.3.10 质粒提取 | 第34页 |
| 2.3.11 农杆菌感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| 2.3.12 农杆菌介导拟南芥的遗传转化 | 第35页 |
| 2.3.13 拟南芥转基因植物纯合体筛选及鉴定 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-60页 |
| 3.1 CiDUF220-1、CiDUF247-1和CiDUF966-1生物信息学分析 | 第37-44页 |
| 3.1.1 DUF220、DUF247和DUF966家族进化树分析 | 第37-40页 |
| 3.1.2 DUF220亚家族Ⅲ、DUF247亚家族Ⅱ和DUF966亚家族Ⅳ启动子作用元件分析 | 第40-43页 |
| 3.1.3 CiDUF220-1和CiDUF966-1亚家族拟南芥同源基因表达量分析 | 第43-44页 |
| 3.2 CiDUF220-1、CiDUF247-1和CiDUF966-1表达模式分析 | 第44-46页 |
| 3.3 CiDUF966-1基因的克隆及功能分析 | 第46-60页 |
| 3.3.1 CiDUF966-1基因的克隆和表达载体的构建 | 第46-49页 |
| 3.3.2 CiDUF966-1启动子顺式作用元件的分析 | 第49-50页 |
| 3.3.3 CiDUF966-1的亚细胞定位观察 | 第50-52页 |
| 3.3.4 植物材料的鉴定 | 第52-54页 |
| 3.3.5 拟南芥野生型、突变体及过表达株系的形态学观察 | 第54-56页 |
| 3.3.6 CiDUF966-1基因与非生物胁迫 | 第56-57页 |
| 3.3.7 过表达植物提前衰老死亡现象 | 第57-60页 |
| 4 讨论 | 第60-63页 |
| 4.1 CiDUF220-1、CiDUF247-1和CiDUF966-1基因生物信息学分析 | 第60页 |
| 4.2 CiDUF220-1、CiDUF247-1和CiDUF966-1表达模式分析 | 第60-61页 |
| 4.3 CiDUF966-1基因功能的分析 | 第61-63页 |
| 4.3.1 CiDUF966-1基因与非生物胁迫 | 第61页 |
| 4.3.2 CiDUF966-1过表达株系提前衰老死亡的现象 | 第61-63页 |
| 5 结论 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-74页 |
| 作者简介 | 第74页 |
