| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 中英文缩略语表 | 第8-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-30页 |
| 1.1 单纯疱疹病毒 | 第15-18页 |
| 1.1.1 单纯疱疹病毒概况和抗病毒药物 | 第15-16页 |
| 1.1.2 HSV 的潜伏感染 | 第16-17页 |
| 1.1.3 HSV-1 作为基因治疗载体 | 第17-18页 |
| 1.2 细胞骨架与病毒感染 | 第18-21页 |
| 1.2.1 细胞微丝骨架与病毒感染 | 第18-20页 |
| 1.2.2 Cofilin 在病毒感染中的作用 | 第20-21页 |
| 1.3 病毒编码的 miRNA | 第21页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 1.5 参考文献 | 第23-30页 |
| 第二章 HSV-1 进入神经细胞通过 EGFR-PI3K 信号抑制 cofilin 活性 | 第30-68页 |
| 2.1 前言 | 第30页 |
| 2.2 材料与方法 | 第30-34页 |
| 2.2.1 细胞和病毒 | 第30-31页 |
| 2.2.2 抗体、小分子抑制剂、siRNAs 和质粒 | 第31页 |
| 2.2.3 流式细胞术检测 | 第31页 |
| 2.2.4 HSV-1 进入的测定 | 第31-32页 |
| 2.2.5 穿膜实验 | 第32页 |
| 2.2.6 Western blotting | 第32页 |
| 2.2.7 免疫共沉淀 | 第32-33页 |
| 2.2.8 转染与瞬时表达 | 第33页 |
| 2.2.9 免疫荧光染色与分析 | 第33页 |
| 2.2.10 统计学分析 | 第33-34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-53页 |
| 2.3.1 HSV-1 感染引起早期微丝的重构及 cofilin 活性的双向变化 | 第34-38页 |
| 2.3.2 调控 cofilin 的活性影响 HSV-1 感染引起细胞突起的形成及病毒的进入 | 第38-42页 |
| 2.3.3 病毒的进入及 cofilin 的磷酸化需要 RTKs 和 PI3K | 第42-45页 |
| 2.3.4 EGFR 通过 PI3K-Akt 信号通路介导了病毒引起的 cofilin 的磷酸化 | 第45-47页 |
| 2.3.5 EGFR-PI3K-Akt 信号传递需要脂筏 | 第47-49页 |
| 2.3.6 ERK1/2 在 EGFR-PI3K-Akt 信号传递和病毒引起的丝状伪足形成中的作用 | 第49-52页 |
| 2.3.7 激酶 ROCK 作为 ERK1/2 下游效应分子参与 cofilin 的磷酸化 | 第52-53页 |
| 2.4 讨论 | 第53-57页 |
| 2.5 参考文献 | 第57-63页 |
| 2.6 附表 | 第63-68页 |
| 第三章 钙离子信号激活 Slingshot 和 Calpain-1 促进 HSV-1 的核向运输 | 第68-83页 |
| 3.1 前言 | 第68-69页 |
| 3.2 实验方法与结果 | 第69-77页 |
| 3.2.1 病毒感染引起钙离子内流 | 第69-70页 |
| 3.2.2 IP3R-1 介导着病毒感染引起钙离子的释放 | 第70-71页 |
| 3.2.3 SSH 的激活促进病毒的入核运输 | 第71-75页 |
| 3.2.4 Calpain-1 的激活促进病毒的入核运输 | 第75-77页 |
| 3.3 讨论 | 第77-78页 |
| 3.4 参考文献 | 第78-81页 |
| 3.5 补充材料 | 第81-83页 |
| 第四章 Slingshot 调控 cofilin 活性利于 HSV-1 复制 | 第83-89页 |
| 4.1 前言 | 第83页 |
| 4.2 实验方法与结果 | 第83-87页 |
| 4.2.1 病毒复制需要细胞骨架的完整性 | 第83-84页 |
| 4.2.2 病毒复制需要 cofilin 失活 | 第84-85页 |
| 4.2.3 病毒复制过程 F-actin 的变化 | 第85-86页 |
| 4.2.4 泛素化依赖的 SSH 下调导致 cofilin 的磷酸化增加 | 第86-87页 |
| 4.2.5 SSH 下调利于病毒复制 | 第87页 |
| 4.3 讨论 | 第87-89页 |
| 第五章 病毒编码的 miRNA 在病毒感染中的作用 | 第89-119页 |
| 5.1 前言 | 第89-90页 |
| 5.2 材料与方法 | 第90-94页 |
| 5.2.1 细胞和病毒 | 第90页 |
| 5.2.2 抗体、小分子抑制剂、siRNAs 和质粒 | 第90页 |
| 5.2.3 靶蛋白 3’UTR 载体构建 | 第90-91页 |
| 5.2.4 3’UTR 突变载体构建 | 第91页 |
| 5.2.5 双荧光素酶报告实验 | 第91-92页 |
| 5.2.6 病毒 DNA-荧光定量 PCR | 第92页 |
| 5.2.7 miRNA 含量检测 | 第92-93页 |
| 5.2.8 Western blotting | 第93页 |
| 5.2.9 基因 mRNA 表达水平分析 | 第93-94页 |
| 5.2.10 转染与瞬时表达 | 第94页 |
| 5.2.11 免疫荧光染色与分析 | 第94页 |
| 5.2.12 统计学分析 | 第94页 |
| 5.3 实验结果 | 第94-103页 |
| 5.3.1 miRNA 的表达分析 | 第94-95页 |
| 5.3.2 miRNA 在病毒感染中的作用 | 第95-96页 |
| 5.3.3 miRNA 的靶蛋白预测 | 第96-97页 |
| 5.3.4 miRNA 的靶蛋白 UBR1 的验证 | 第97-99页 |
| 5.3.5 靶蛋白 UBR1 的表达与活性受到 miRNA 抑制 | 第99-100页 |
| 5.3.6 miRNA 对泛素化的影响 | 第100-101页 |
| 5.3.7 miRNA 对病毒蛋白的影响 | 第101页 |
| 5.3.8 miRNA 对阿尔茨海默病的影响 | 第101-103页 |
| 5.4 讨论 | 第103-106页 |
| 5.5 参考文献 | 第106-112页 |
| 5.6 附表 | 第112-119页 |
| 第六章 氯离子通道抑制剂 tamoxifen 和 NPPB 抗 HSV-1 作用的研究 | 第119-139页 |
| 6.1 前言 | 第119-120页 |
| 6.2 材料与方法 | 第120-124页 |
| 6.2.1 细胞、病毒、抗体和试剂 | 第120页 |
| 6.2.2 体外抗病毒活性实验 | 第120-121页 |
| 6.2.3 不同时间点加药实验 | 第121页 |
| 6.2.4 细胞内氯离子检测 | 第121页 |
| 6.2.5 荧光定量 PCR 用于检测病毒的进入或吸附 | 第121-122页 |
| 6.2.6 RNA 的提取和实时 PCR | 第122页 |
| 6.2.7 Western Blotting | 第122-123页 |
| 6.2.8 免疫荧光染色和分析 | 第123页 |
| 6.2.9 细胞内钙离子检测 | 第123页 |
| 6.2.10 统计学分析 | 第123-124页 |
| 6.3 实验结果 | 第124-132页 |
| 6.3.1 NPPB 和 tamoxifen 的抗 HSV-1 活性 | 第124-125页 |
| 6.3.2 HSV-1 感染增加细胞内的氯离子浓度 | 第125-126页 |
| 6.3.3 NPPB 和 tamoxifen 对病毒 RNA 合成和蛋白表达的影响 | 第126-127页 |
| 6.3.4 NPPB 和 tamoxifen 抑制病毒增殖周期多个步骤 | 第127页 |
| 6.3.5 NPPB 和 tamoxifen 抑制病毒进入和病毒核定位 | 第127-129页 |
| 6.3.6 NPPB 和 tamoxifen 抑制病毒的膜定位 | 第129页 |
| 6.3.7 NPPB 和 tamoxifen 减少细胞内钙离子的释放 | 第129-131页 |
| 6.3.8 SiRNA 干扰氯离子通道对病毒进入的影响 | 第131-132页 |
| 6.4 讨论 | 第132-134页 |
| 6.5 参考文献 | 第134-139页 |
| 第七章 全文总结与展望 | 第139-142页 |
| 7.1 全文结论 | 第139-140页 |
| 7.1.1 Cofilin 活性及细胞骨架的调控促进 HSV-1 进入神经细胞 | 第139页 |
| 7.1.2 miR-H1 抑制 UBR1 的表达与功能促进 HSV-1 增殖 | 第139-140页 |
| 7.1.3 氯离子通道抑制剂抗 HSV-1 感染 | 第140页 |
| 7.2 创新之处 | 第140-141页 |
| 7.3 展望 | 第141-142页 |
| 博士期间发表的论文 | 第142-144页 |
| 致谢 | 第144页 |
