| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-27页 |
| 1.1 血吸虫的生物学概述 | 第15-18页 |
| 1.1.1 血吸虫及其分布 | 第15页 |
| 1.1.2 日本血吸虫的生活史 | 第15-16页 |
| 1.1.3 血吸虫与宿主的相互作用 | 第16-18页 |
| 1.2 血吸虫疫苗的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.2.1 血吸虫疫苗研究的意义 | 第18页 |
| 1.2.2 辐照致弱血吸虫疫苗研究进展 | 第18-19页 |
| 1.2.3 辐照致弱血吸虫尾蚴疫苗的作用机制 | 第19-20页 |
| 1.3 HMGB1 分子的生物学特性 | 第20-23页 |
| 1.3.1 HMGB1 分子的结构和功能特征 | 第20-21页 |
| 1.3.2 HMGB1 的免疫生物学功能 | 第21-23页 |
| 1.4 细胞凋亡与坏死 | 第23-27页 |
| 1.4.1 常用检测方法 | 第23-24页 |
| 1.4.2 血吸虫的细胞凋亡研究 | 第24页 |
| 1.4.3 细胞的免疫原性死亡 | 第24-27页 |
| 第二章 SjHMGB1 的原核表达及其免疫原性分析 | 第27-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 菌株 | 第27-28页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第28页 |
| 2.1.3 主要试剂和仪器设备 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-33页 |
| 2.2.1 SjHMGB1 引物设计和目的片段扩增 | 第28-29页 |
| 2.2.2 pET28a(+)-SjHMGB1 重组载体的构建 | 第29-31页 |
| 2.2.3 SjHMGB1 重组蛋白的表达 | 第31页 |
| 2.2.4 SjHMGB1 蛋白的表达纯化 | 第31-32页 |
| 2.2.5 SjHMGB1 蛋白的鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.6 SjHMGB1 蛋白的免疫原性分析 | 第33页 |
| 2.3 实验结果 | 第33-37页 |
| 2.3.1 SjHMGB1 基因的克隆和重组载体鉴定 | 第33-34页 |
| 2.3.2 SjHMGB1 蛋白的表达 | 第34-35页 |
| 2.3.3 SjHMGB1 重组蛋白的纯化和鉴定 | 第35-36页 |
| 2.3.4 SjHMGB1 重组蛋白免疫原性鉴定 | 第36-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 SjHMGB1 蛋白在日本血吸虫中的表达研究 | 第39-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 3.1.1 相关试剂和仪器 | 第39-40页 |
| 3.1.2 钉螺和实验动物 | 第40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-41页 |
| 3.2.1 不同发育阶段日本血吸虫虫体收集 | 第40页 |
| 3.2.2 切片制备 | 第40-41页 |
| 3.2.3 SjHMGB1 在不同时期虫体中的分布 | 第41页 |
| 3.3 实验结果 | 第41-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 SjHMGB1 在杆状病毒表达系统中的表达 | 第45-55页 |
| 4.1 实验材料 | 第45-46页 |
| 4.1.1 载体、细胞和菌种 | 第45页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第45-46页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第46页 |
| 4.2 方法 | 第46-50页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第46页 |
| 4.2.2 pFastBacHTA-SjHMGB1 转移载体的构建 | 第46-47页 |
| 4.2.3 重组穿梭质粒 Bacmid-SjHMGB1 的构建和鉴定 | 第47-48页 |
| 4.2.4 重组 Bacmid-SjHMGB1 质粒转染 Sf9 昆虫细胞 | 第48-49页 |
| 4.2.5 间接免疫荧光检测重组 SjHMGB1 蛋白在 Sf9 细胞中的表达 | 第49页 |
| 4.2.6 SjHMGB1 重组蛋白的纯化和鉴定 | 第49-50页 |
| 4.3 实验结果 | 第50-54页 |
| 4.3.1 pFastBacHTA-SjHMGB1 转移载体的构建 | 第50页 |
| 4.3.2 重组穿梭质粒 pFastBacHTA-SjHMGB1 的构建和鉴定 | 第50-51页 |
| 4.3.3 SjHMGB1 重组蛋白在 Sf9 中的表达鉴定 | 第51-54页 |
| 4.4 讨论 | 第54-55页 |
| 第五章 SjHMGB1 活化 DC 表型成熟的研究 | 第55-63页 |
| 5.1 实验材料 | 第56-57页 |
| 5.1.1 实验动物 | 第56页 |
| 5.1.2 实验试剂及耗材 | 第56页 |
| 5.1.3 仪器设备 | 第56-57页 |
| 5.2 实验方法 | 第57-59页 |
| 5.2.1 制备 BMDC | 第57-58页 |
| 5.2.2 SjHMGB1 刺激 BMDC | 第58页 |
| 5.2.3 流式细胞术检测 BMDC 表型成熟 | 第58-59页 |
| 5.3 实验结果 | 第59-61页 |
| 5.4 讨论 | 第61-63页 |
| 第六章 辐照致弱日本血吸虫的凋亡坏死研究 | 第63-73页 |
| 6.1 实验材料 | 第63-64页 |
| 6.1.1 实验动物 | 第63页 |
| 6.1.2 主要试剂和和耗材 | 第63-64页 |
| 6.1.3 实验仪器 | 第64页 |
| 6.1.4 溶液配制 | 第64页 |
| 6.2 实验方法 | 第64-66页 |
| 6.2.1 尾蚴的收集与处理 | 第64-65页 |
| 6.2.2 不同时期血吸虫凋亡与坏死的超微结构观察 | 第65页 |
| 6.2.3 不同时期童虫细胞的凋亡检测 | 第65-66页 |
| 6.3 实验结果 | 第66-70页 |
| 6.3.1 不同时期血吸虫凋亡与坏死的超微结构观察 | 第66-68页 |
| 6.3.2 流式细胞仪检测不同时期童虫细胞的凋亡情况 | 第68-70页 |
| 6.4 讨论 | 第70-73页 |
| 第七章 全文总结 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第83页 |
