| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-24页 |
| 1.1 鸡输卵管生物反应器生产药用蛋白的研究进展与应用 | 第10-18页 |
| 1.1.1 鸡输卵管生物反应器生产药用蛋白的原理和优势 | 第10-11页 |
| 1.1.2 利用鸡输卵管生物反应器生产药用蛋白的研究方法 | 第11-17页 |
| 1.1.2.1 逆转录病毒载体法 | 第11-14页 |
| 1.1.2.2 原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)介导法 | 第14-16页 |
| 1.1.2.3 转基因鸡生产新技术展望：定点基因敲除-敲入技术 | 第16-17页 |
| 1.1.3 小结 | 第17-18页 |
| 1.2 人凝血因子Ⅸ的研究进展与应用 | 第18-24页 |
| 1.2.1 人凝血因子Ⅸ基因和蛋白的结构 | 第19-20页 |
| 1.2.2 人凝血因子Ⅸ与血友病B | 第20页 |
| 1.2.3 血友病B治疗的研究现状 | 第20-23页 |
| 1.2.3.1 包含人凝血因子Ⅸ的凝血酶原复合物(PCC) | 第20-21页 |
| 1.2.3.2 高纯的FⅨ和重组FⅨ | 第21-22页 |
| 1.2.3.3 人凝血因子Ⅸ在血友病B基因治疗中的研究现状 | 第22-23页 |
| 1.2.4 小结 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-35页 |
| 2.1 材料 | 第24-29页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第24页 |
| 2.1.2 主要仪器与设备 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要实验试剂与试剂盒 | 第25页 |
| 2.1.4 主要实验试剂的配置 | 第25-28页 |
| 2.1.4.1 琼脂糖凝胶电泳相关试剂配制 | 第25-26页 |
| 2.1.4.2 菌液质粒大提相关试剂配置 | 第26-28页 |
| 2.1.4.3 质粒注射液预处理相关试剂配置 | 第28页 |
| 2.1.5 实验相关引物及核酸 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法及步骤 | 第29-35页 |
| 2.2.1 重组hFⅨ基因cDNA的合成 | 第29页 |
| 2.2.2 重组hFⅨ鸡输卵管特异性表达载体的构建及鉴定 | 第29-30页 |
| 2.2.3 改良的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法制备重组质粒 | 第30-31页 |
| 2.2.4 重组质粒去除内毒素 | 第31-32页 |
| 2.2.5 产蛋鸡翅静脉注射重组质粒 | 第32页 |
| 2.2.6 ELISA检测 | 第32-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-42页 |
| 3.1 密码子优化后的重组FⅨ基因序列 | 第35-36页 |
| 3.2 重组质粒pL-hFⅨ的双酶切鉴定 | 第36-38页 |
| 3.3 使用人凝血因子IX酶联免疫分析试剂盒检测蛋清样品中人凝血因子K的浓度 | 第38-40页 |
| 3.4 计算实验组产蛋鸡所产鸡蛋蛋清中hFⅨ的浓度 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 4.1 人工合成密码子优化后的人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)基因序列 | 第42页 |
| 4.2 基因表达质粒载体的构建和制备 | 第42-43页 |
| 4.3 hFⅨ蛋白在鸡输卵管中的暂态表达 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51-52页 |
