| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 绪论 | 第9-15页 |
| 1.1 引言 | 第9-10页 |
| 1.2 泛素连接酶的概述 | 第10-12页 |
| 1.2.1 泛素 | 第10页 |
| 1.2.2 泛素化途径 | 第10-11页 |
| 1.2.3 泛素连接酶E3 | 第11-12页 |
| 1.3 锌指蛋白概述 | 第12-13页 |
| 1.3.1 锌指蛋白的分类 | 第12页 |
| 1.3.2 锌指蛋白的功能 | 第12-13页 |
| 1.3.3 C3HC4型锌指蛋白 | 第13页 |
| 1.4 研究目的意义 | 第13-15页 |
| 2 拟南芥AtZFP6基因的表达及非抗逆性分析 | 第15-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第15页 |
| 2.1.2 菌种与载体 | 第15页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第15页 |
| 2.1.4 培养基与实验药品溶液配制 | 第15-16页 |
| 2.1.5 引物合成与测序 | 第16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-29页 |
| 2.2.1 拟南芥AtZFP6基因编码区克隆 | 第16-17页 |
| 2.2.2 过表达载体35S：AtZFP6的构建 | 第17-24页 |
| 2.2.3 野生型拟南芥的培养与转化 | 第24-25页 |
| 2.2.4 转基因拟南芥的筛选和检测 | 第25-26页 |
| 2.2.5 突变体拟南芥的筛选及纯合株系检测 | 第26-28页 |
| 2.2.6 转基因拟南芥及突变体拟南芥中AtZFP6基因表达量分析 | 第28页 |
| 2.2.7 转基因拟南芥在不同胁迫条件下种子萌发能力分析 | 第28-29页 |
| 2.2.8 转基因拟南芥在不同胁迫条件下幼苗抗逆能力分析 | 第29页 |
| 2.2.9 转基因拟南芥表型分析 | 第29页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第29-38页 |
| 2.3.1 过表达载体35S：AtZFP6的构建 | 第29-30页 |
| 2.3.2 转35S：AtZFP6基因拟南芥的筛选与检测 | 第30-31页 |
| 2.3.3 突变体拟南芥的筛选与检测 | 第31-32页 |
| 2.3.4 转基因拟南芥的表达量分析 | 第32-33页 |
| 2.3.5 转AtZFP6基因拟南芥在不同胁迫下种子萌发能力分析 | 第33-34页 |
| 2.3.6 转AtZFP6基因拟南芥在不同胁迫下幼苗抗逆能力分析 | 第34-36页 |
| 2.3.7 转AtZFP6基因拟南芥表型分析 | 第36-38页 |
| 2.4 本章小结与讨论 | 第38-40页 |
| 3 拟南芥AtZFP6互作蛋白的研究 | 第40-59页 |
| 3.1 实验材料 | 第40-42页 |
| 3.1.1 菌株和载体 | 第40页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第40页 |
| 3.1.3 培养基 | 第40-41页 |
| 3.1.4 实验药品溶液配制 | 第41-42页 |
| 3.1.5 引物合成与测序 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-53页 |
| 3.2.1 酵母双杂交Bait表达载体(pGBKT7-AtZFP6)构建 | 第42-44页 |
| 3.2.2 Bait载体小量转化酵母细胞 | 第44-45页 |
| 3.2.3 Prey载体的构建 | 第45-49页 |
| 3.2.4 选定转录因子基因转化酵母细胞 | 第49-51页 |
| 3.2.5 酵母双杂交 | 第51-52页 |
| 3.2.6 候选Prey质粒的分离和鉴定 | 第52-53页 |
| 3.2.7 Bait与候选Prey的互作确认 | 第53页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第53-57页 |
| 3.3.1 构建酵母双杂交Bait表达载体(pGBKT7-AtZFP6)构建 | 第53-54页 |
| 3.3.2 Prey载体的构建 | 第54页 |
| 3.3.3 AtZFP6互作蛋白的筛选 | 第54-55页 |
| 3.3.4 AtZFP6互作蛋白的验证 | 第55-57页 |
| 3.4 本章小结与讨论 | 第57-59页 |
| 4 拟南芥AtZFP6的亚细胞定位 | 第59-68页 |
| 4.1 实验材料 | 第59-60页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第59页 |
| 4.1.2 菌株与载体 | 第59页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第59页 |
| 4.1.4 培养基与实验药品溶液配制 | 第59-60页 |
| 4.2 实验方法 | 第60-64页 |
| 4.2.1 荧光定位表达载体(35S：AtZFP6-GFP)的构建 | 第60-63页 |
| 4.2.2 AtZFP6基因的亚细胞定位 | 第63-64页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第64-67页 |
| 4.3.1 AtZFP6基因片段的克隆 | 第64-65页 |
| 4.3.2 融合基因AtZFP6-GFP的扩增 | 第65页 |
| 4.3.3 荧光定位表达载体(35S：AtZFP6-GFP)转化大肠杆菌 | 第65页 |
| 4.3.4 AtZFP6基因的亚细胞定位 | 第65-67页 |
| 4.4 本章小结与讨论 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 附录 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
