| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第14-31页 |
| 1.1 鸡球虫病概述 | 第15-24页 |
| 1.1.1 鸡球虫的生活史 | 第15-17页 |
| 1.1.2 鸡球虫形态特点 | 第17-18页 |
| 1.1.3 鸡球虫病的流行病学 | 第18-19页 |
| 1.1.4 鸡球虫病的临床症状和病理变化 | 第19-22页 |
| 1.1.5 鸡球虫病的防治 | 第22-24页 |
| 1.2 鸡球虫抗原研究 | 第24-27页 |
| 1.2.1 微线蛋白 | 第24-25页 |
| 1.2.2 子孢子表面抗原 | 第25-26页 |
| 1.2.3 裂殖子表面抗原 | 第26页 |
| 1.2.4 配子体抗原 | 第26-27页 |
| 1.2.5 折光体抗原及其它相关的抗原 | 第27页 |
| 1.3 抗鸡球虫基因工程疫苗研究进展 | 第27-30页 |
| 1.3.1 DNA 疫苗 | 第27-28页 |
| 1.3.2 活载体疫苗的研究 | 第28-29页 |
| 1.3.3 重组亚单位疫苗 | 第29-30页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-49页 |
| 2.1 材料 | 第31-36页 |
| 2.1.1 菌株、表达系统、虫种和实验动物 | 第31页 |
| 2.1.2 引物、载体、酶和试剂 | 第31页 |
| 2.1.3 相关溶液与培养基的成分 | 第31-35页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第35-36页 |
| 2.2 方法 | 第36-49页 |
| 2.2.1 柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第36页 |
| 2.2.2 EtMIC2 基因的扩增、克隆与测序 | 第36-38页 |
| 2.2.3 真核表达载体的构建 | 第38-40页 |
| 2.2.4 原核表达载体的构建 | 第40页 |
| 2.2.5 酵母细胞的转化及筛选 | 第40-42页 |
| 2.2.6 EtMIC2 表达株的筛选及鉴定 | 第42-43页 |
| 2.2.7 EtMIC2 蛋白大量表达及纯化 | 第43-44页 |
| 2.2.8 兔抗 EtMIC2 蛋白多克隆抗体的制备及检测 | 第44页 |
| 2.2.9 免疫和感染实验动物 | 第44-45页 |
| 2.2.10 免疫保护力评价 | 第45-46页 |
| 2.2.11 抗体水平检测 | 第46页 |
| 2.2.12 体外诱导细胞因子及其表达水平检测 | 第46-47页 |
| 2.2.13 脾淋巴细胞的检测 | 第47-49页 |
| 3 结果 | 第49-60页 |
| 3.1 EtMIC2 基因的克隆和测序 | 第49页 |
| 3.2 重组表达载体酶切的鉴定 | 第49-50页 |
| 3.3 酵母重组子的筛选及 PCR 鉴定 | 第50-51页 |
| 3.4 EtMIC2 蛋白的表达及鉴定 | 第51-53页 |
| 3.5 兔抗 EtMIC2 多克隆抗体的检测 | 第53-54页 |
| 3.6 EtMIC2 蛋白的免疫保护力评价 | 第54-57页 |
| 3.6.1 体重增长 | 第54-55页 |
| 3.6.2 盲肠病变计分 | 第55-56页 |
| 3.6.3 卵囊排出量及卵囊减少率 | 第56页 |
| 3.6.4 抗球虫指数（ACI） | 第56-57页 |
| 3.7 抗体水平 | 第57-58页 |
| 3.8 细胞免疫水平 | 第58-60页 |
| 3.8.1 细胞因子水平 | 第58页 |
| 3.8.2 淋巴细胞转化 | 第58-59页 |
| 3.8.3 CD4~+、CD8~+ T 淋巴细胞亚群 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-64页 |
| 4.1 EtMIC2 抗原基因 | 第60页 |
| 4.2 毕赤酵母表达 EtMIC2 蛋白的意义及效果 | 第60-62页 |
| 4.3 细胞因子表达水平分析 | 第62-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 硕士攻读期间发表论文 | 第74页 |
