| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 研究背景 | 第12页 |
| 1.2 植物抗寒基因的研究进展 | 第12-16页 |
| 1.2.1 抗冻蛋白基因的研究 | 第12-13页 |
| 1.2.2 抗渗透胁迫基因的研究 | 第13-14页 |
| 1.2.3 抗寒调控基因的研究 | 第14页 |
| 1.2.4 MBF1基因的研究 | 第14-16页 |
| 1.3 检测植物抗寒性的方法研究进展 | 第16-19页 |
| 1.3.1 电导法 | 第16-17页 |
| 1.3.2 叶绿素含量及叶绿素荧光法 | 第17-19页 |
| 1.3.3 植物细胞抗氧化系统的变化 | 第19页 |
| 1.4 生物信息学研究进展 | 第19-20页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株与载体 | 第21页 |
| 2.1.3 酶与生化试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 设备 | 第21-22页 |
| 2.1.5 生物信息学分析网站和软件 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-31页 |
| 2.2.1 银腺杨MBFI(PtMBF1)基因的克隆及生物信息学分析 | 第22-26页 |
| 2.2.1.1 银腺杨总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.1.2 cDNA的合成 | 第23页 |
| 2.2.1.3 PCR扩增 | 第23-24页 |
| 2.2.1.4 PCR产物的克隆及测序 | 第24-25页 |
| 2.2.1.5 银腺杨PtMBF1基因的生物信息学分析 | 第25-26页 |
| 2.2.2 银腺杨杨PtMBF1基因的表达模式研究 | 第26-27页 |
| 2.2.2.1 qRT-PCR检测PtMBF1基因在银腺杨不同组织的表达模式 | 第26页 |
| 2.2.2.2 qRT-PCR检测银腺杨PtMBF1基因在冷胁迫调控下的表达模式 | 第26-27页 |
| 2.2.3 转南极拟三列真藓BpMBF1基因银腺杨的抗寒性研究 | 第27-31页 |
| 2.2.3.1 南极拟三列真藓BpMBF1基因转化银腺杨 | 第27-28页 |
| 2.2.3.2 转基因植株PCR检测 | 第28-29页 |
| 2.2.3.3 转基因植株qRT-PCR检测 | 第29页 |
| 2.2.3.4 转基因植株叶绿素含量以及叶绿素荧光参数的测定 | 第29页 |
| 2.2.3.5 转基因植株电解质渗出率的测定 | 第29-30页 |
| 2.2.3.6 转基因植株SOD活性测定 | 第30页 |
| 2.2.3.7 转基因植株POD活性测定 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-42页 |
| 3.1 银腺杨PtMBF1基因cDNA编码序列克隆与生物信息学分析 | 第31-34页 |
| 3.1.1 序列分析 | 第31-32页 |
| 3.1.2 PtMBF1基因跨膜结构域分析 | 第32页 |
| 3.1.3 不同物种MBF1基因的进化及保守结构域分析 | 第32-34页 |
| 3.2 银腺杨PtMBF1基因表达分析 | 第34-35页 |
| 3.2.1 银腺杨PtMBF1基因在不同器官表达分析 | 第34-35页 |
| 3.2.2 银腺杨PtMBF1基因低温诱导表达分析 | 第35页 |
| 3.3 南极拟三列真藓BpMBF1基因转化银腺杨转基因苗的获得 | 第35-38页 |
| 3.3.1 转基因银腺杨的获得 | 第35-36页 |
| 3.3.2 转基因植株的PCR检测结果分析 | 第36-37页 |
| 3.3.3 转基因植株qRT-PCR检测结果分析 | 第37-38页 |
| 3.4 转基因植株抗寒性分析结果 | 第38-42页 |
| 3.4.1 低温胁迫对叶绿素含量的影响 | 第38页 |
| 3.4.2 低温胁迫对Fv/Fm的影响 | 第38-39页 |
| 3.4.3 低温胁迫对转基因银腺杨的膜透性的影响 | 第39-40页 |
| 3.4.4 低温胁迫对转基因银腺杨细胞抗氧化酶的影响 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 4.1 MBF1基因结构分析 | 第42页 |
| 4.2 电解质渗出率可用来衡量植物的抗寒性 | 第42-43页 |
| 4.3 叶绿素含量可用来衡量植物的抗寒性 | 第43-44页 |
| 5 实验结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 附录 | 第51-63页 |
| 附件1 | 第51-55页 |
| 附件2 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
