| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-28页 |
| 1.1 昆虫碳氢化合物 | 第13-17页 |
| 1.1.1 化学组成与结构多样性 | 第13-14页 |
| 1.1.2 合成途径 | 第14-16页 |
| 1.1.3 合成部位与运输 | 第16-17页 |
| 1.2 表皮碳氢化合物 | 第17-22页 |
| 1.2.1 主要生物学功能 | 第18-19页 |
| 1.2.2 种内变异 | 第19-21页 |
| 1.2.3 提取和检测方法 | 第21-22页 |
| 1.3 昆虫P450与4G亚家族 | 第22-25页 |
| 1.3.1 昆虫P450概述 | 第22-23页 |
| 1.3.2 P450与碳氢化合物合成 | 第23页 |
| 1.3.3 CYP4Gs研究现状 | 第23-25页 |
| 1.4 蚜虫 | 第25-27页 |
| 1.5 研究目的、意义及内容 | 第27-28页 |
| 1.5.1 研究目的及意义 | 第27页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第27-28页 |
| 第二章 豌豆蚜表皮碳氢化合物种内变异 | 第28-46页 |
| 2.1 前言 | 第28-29页 |
| 2.2 材料与方法 | 第29-33页 |
| 2.2.1 供试昆虫与植物 | 第29页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.2.3 线粒体COI基因变异检测 | 第30-31页 |
| 2.2.4 正己烷浸泡法提取豌豆蚜CHC | 第31页 |
| 2.2.5 豌豆蚜CHC的固相微萃取 | 第31-32页 |
| 2.2.6 GC-MS分析 | 第32页 |
| 2.2.7 数据处理与统计 | 第32-33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-43页 |
| 2.3.1 五个地理种群线粒体COI基因变异检测 | 第33页 |
| 2.3.2 不同SPME纤维头对CHC吸附效率比较 | 第33页 |
| 2.3.3 SPME的可重复性及有效性 | 第33-36页 |
| 2.3.4 不同发育阶段、翅型对CHC的影响 | 第36页 |
| 2.3.5 寄主植物对CHC的影响 | 第36-39页 |
| 2.3.6 豌豆蚜CHC在不同地理种群中的变异 | 第39-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-46页 |
| 第三章 豌豆蚜碳氢化合物合成途径关键基因CYP4G51的功能研究 | 第46-71页 |
| 3.1 前言 | 第46-47页 |
| 3.2 材料与方法 | 第47-56页 |
| 3.2.1 供试昆虫与植物 | 第47页 |
| 3.2.2 主要设备及试剂 | 第47-48页 |
| 3.2.3 基因序列获得与生物信息学分析 | 第48页 |
| 3.2.4 耐旱性生物测定 | 第48-49页 |
| 3.2.5 组织解剖、总RNA抽提及cDNA合成 | 第49-50页 |
| 3.2.6 荧光定量PCR(qPCR) | 第50-52页 |
| 3.2.7 豌豆蚜CYP4G51基因片段的克隆 | 第52-53页 |
| 3.2.8 dsRNA的合成 | 第53-54页 |
| 3.2.9 dsRNA的导入及RNAi效率检测 | 第54-55页 |
| 3.2.10 碳氢化合物的提取与色谱分析 | 第55-56页 |
| 3.2.11 统计学 | 第56页 |
| 3.3 结果与分析 | 第56-67页 |
| 3.3.1 CYP4G51序列分析与RNAi策略 | 第56-57页 |
| 3.3.2 CYP4G51时空表达谱分析 | 第57-58页 |
| 3.3.3 干旱胁迫对CYP4G51表达量的影响 | 第58-59页 |
| 3.3.4 人工饲料诱导CYP4G51的上调表达与CHC的增加 | 第59-61页 |
| 3.3.5 dsRNA介导的CYP4G51沉默效率检测 | 第61-63页 |
| 3.3.6 CYP4G51沉默对碳氢化合物含量的影响 | 第63-65页 |
| 3.3.7 CYP4G51沉默对蚜虫耐旱性的影响 | 第65-67页 |
| 3.4 讨论 | 第67-71页 |
| 第四章 CYP4G51基因的真核表达与活性检测 | 第71-84页 |
| 4.1 前言 | 第71页 |
| 4.2 材料与方法 | 第71-78页 |
| 4.2.1 质粒与菌株 | 第71页 |
| 4.2.2 主要设备和试剂 | 第71-72页 |
| 4.2.3 细胞色素P450还原酶(CPR)的抗体制备 | 第72-75页 |
| 4.2.4 CYP4G51-CPR融合蛋白的真核表达 | 第75-77页 |
| 4.2.5 Sf9细胞微粒体蛋白的提取 | 第77-78页 |
| 4.2.6 P450的CO差光谱 | 第78页 |
| 4.3 结果与分析 | 第78-82页 |
| 4.3.1 CPR原核表达载体的酶切验证 | 第78-79页 |
| 4.3.2 CPR原核表达蛋白的纯化检测 | 第79-80页 |
| 4.3.3 CPR多克隆抗体的特异性检测 | 第80页 |
| 4.3.4 CYP4G51-CPR融合蛋白和CPR蛋白供应载体的酶切验证 | 第80页 |
| 4.3.5 CYP4G51-CPR融合蛋白的Western检测 | 第80-82页 |
| 4.3.6 CYP4G51-CPR融合蛋白的CO差光谱检测 | 第82页 |
| 4.4 讨论 | 第82-84页 |
| 第五章 全文总结 | 第84-86页 |
| 5.1 结论 | 第84页 |
| 5.2 创新点 | 第84页 |
| 5.3 研究展望 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-100页 |
| 附录 | 第100-103页 |
| 缩略词 | 第103-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 作者简介及攻读学位期间所取得的学术成果 | 第106-107页 |
