致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-14页 |
1 引言 | 第14-17页 |
2 实验材料 | 第17-23页 |
2.1 实验动物及人体组织标本 | 第17页 |
2.2 实验仪器 | 第17-18页 |
2.3 实验试剂 | 第18-21页 |
2.4 RT-PCR引物列表 | 第21页 |
2.5 一抗及二抗列表 | 第21-23页 |
3 实验方法 | 第23-33页 |
3.1 C57BL/6小鼠及人主动脉平滑肌细胞分离、培养、传代及鉴定 | 第23-24页 |
3.2 SMCs成骨分化诱导 | 第24页 |
3.3 茜素红染色 | 第24页 |
3.4 钙、磷离子检测 | 第24-25页 |
3.5 碱性磷酸酶活性检测 | 第25页 |
3.6 免疫荧光染色 | 第25-26页 |
3.7 蛋白印记 | 第26-27页 |
3.8 实时荧光定量PCR | 第27-29页 |
3.9 转录组测序及分析 | 第29-30页 |
3.10 cAMP含量测定 | 第30页 |
3.11 活性氧测定 | 第30页 |
3.12 细胞内游离钙离子测定 | 第30页 |
3.13 NADPH氧化酶活性测定 | 第30-31页 |
3.14 转基因小鼠基因型鉴定 | 第31-32页 |
3.15 小鼠体内实验及微型CT扫描 | 第32页 |
3.16 统计学分析 | 第32-33页 |
4 实验结果 | 第33-49页 |
4.1 GHRH受体表达于平滑肌细胞表面,MR409不影响高磷环境下平滑肌细胞增殖及迁移 | 第33-35页 |
4.2 MR409抑制平滑肌细胞体外钙化 | 第35-37页 |
4.3 基因芯片结果提示MR409影响NADPH氧化酶表达 | 第37-38页 |
4.4 MR409可通过抑制NADPH氧化酶活性,抑制Pi引起的平滑肌细胞ROS产生增加 | 第38-41页 |
4.5 MR409不加重高磷导致的Akt磷酸化,但可减弱高磷诱导的ERK磷酸化 | 第41-42页 |
4.6 OPG-/-小鼠鉴定 | 第42-43页 |
4.7 MR409的长期作用不影响OPG~(-/-)小鼠体重变化 | 第43-44页 |
4.8 MR409抑制OPG~(-/-)小鼠血管钙化 | 第44-47页 |
4.9 MR409抑制人血管平滑肌细胞体外钙化 | 第47-49页 |
5 讨论 | 第49-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
综述 | 第62-78页 |
参考文献 | 第70-78页 |
个人简历及在读期间所取得的科研成果 | 第78页 |