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XPF无义突变与肿瘤发生的相关性研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
目录第8-11页
全文缩略语中英文对照第11-13页
1 绪论第13-20页
2 材料与方法第20-59页
    2.1 实验使用的主要仪器和设备第20-23页
    2.2 试剂配制第23-28页
    2.3 实验方法第28-59页
        2.3.1 HEK293t细胞总RNA提取第28页
        2.3.2 定量RNA浓度O.D.值的测定和琼脂糖电泳检测第28-29页
        2.3.3 重组质粒的抽提第29-30页
        2.3.4 质粒的大量提取第30-31页
        2.3.5 琼脂糖凝胶DNA条带的回收第31-33页
        2.3.6 转化扩增酶切鉴定第33页
        2.3.7 表达载体的构建第33-38页
        2.3.8 突变载体pCDNA3.1/tXPF及pEGFP/tXPF的构建第38-39页
        2.3.9 带标签HA pCDNA3.1/tXPF及pCDNA3.1/XPF载体的构建第39-40页
        2.3.10 质粒的双酶切和测序鉴定第40页
        2.3.11 细胞培养第40-42页
        2.3.12 细胞冻存第42页
        2.3.13 细胞复苏第42-43页
        2.3.14 质粒转染第43页
        2.3.15 免疫共沉淀试验第43-44页
        2.3.16 免疫印迹第44-46页
        2.3.17 临床样本的收集第46-47页
        2.3.18 免疫组织化学第47-48页
        2.3.19 血液基因组DNA的提取第48-49页
        2.3.20 石蜡包埋胃癌组织DNA提取第49-50页
        2.3.21 RT-PCR及Real-Time-PCR第50-54页
        2.3.22 基因分型第54页
        2.3.23 彗星实验(细胞毒性修复实验)第54-56页
        2.3.24 微卫星不稳定性的检测第56-57页
        2.3.25 判断标准第57页
        2.3.26 统计学分析第57-59页
3 结果第59-80页
    3.1 胃癌组织中XPF基因微卫星不稳定性的分析第59-62页
    3.2 XPF、ERCC1 相互作用及rs2020959 位点附近序列分析第62-64页
    3.3 胃癌组织免疫酶标记结果第64-67页
    3.4 核苷酸内切修复酶XPF及tXPF与ERCC1 的相互作用,蛋白质稳定性的检测第67-69页
    3.5 肿瘤病人血样及不同肿瘤基因分型第69-73页
    3.6 XPF及tXPF在AGS,MNK45,SGC7901 及HEK293t细胞系中表达的检测第73-76页
    3.7 核苷酸内切修复酶XPF及其突变体泛素化途径的降解第76-78页
    3.8 彗星实验第78-80页
4 讨论第80-84页
5 结论第84-85页
6 参考文献第85-94页
附录 综述第94-124页
    综述参考文献第110-124页
致谢第124-125页
学术论文和科研成果目录第125页

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