摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第8-11页 |
全文缩略语中英文对照 | 第11-13页 |
1 绪论 | 第13-20页 |
2 材料与方法 | 第20-59页 |
2.1 实验使用的主要仪器和设备 | 第20-23页 |
2.2 试剂配制 | 第23-28页 |
2.3 实验方法 | 第28-59页 |
2.3.1 HEK293t细胞总RNA提取 | 第28页 |
2.3.2 定量RNA浓度O.D.值的测定和琼脂糖电泳检测 | 第28-29页 |
2.3.3 重组质粒的抽提 | 第29-30页 |
2.3.4 质粒的大量提取 | 第30-31页 |
2.3.5 琼脂糖凝胶DNA条带的回收 | 第31-33页 |
2.3.6 转化扩增酶切鉴定 | 第33页 |
2.3.7 表达载体的构建 | 第33-38页 |
2.3.8 突变载体pCDNA3.1/tXPF及pEGFP/tXPF的构建 | 第38-39页 |
2.3.9 带标签HA pCDNA3.1/tXPF及pCDNA3.1/XPF载体的构建 | 第39-40页 |
2.3.10 质粒的双酶切和测序鉴定 | 第40页 |
2.3.11 细胞培养 | 第40-42页 |
2.3.12 细胞冻存 | 第42页 |
2.3.13 细胞复苏 | 第42-43页 |
2.3.14 质粒转染 | 第43页 |
2.3.15 免疫共沉淀试验 | 第43-44页 |
2.3.16 免疫印迹 | 第44-46页 |
2.3.17 临床样本的收集 | 第46-47页 |
2.3.18 免疫组织化学 | 第47-48页 |
2.3.19 血液基因组DNA的提取 | 第48-49页 |
2.3.20 石蜡包埋胃癌组织DNA提取 | 第49-50页 |
2.3.21 RT-PCR及Real-Time-PCR | 第50-54页 |
2.3.22 基因分型 | 第54页 |
2.3.23 彗星实验(细胞毒性修复实验) | 第54-56页 |
2.3.24 微卫星不稳定性的检测 | 第56-57页 |
2.3.25 判断标准 | 第57页 |
2.3.26 统计学分析 | 第57-59页 |
3 结果 | 第59-80页 |
3.1 胃癌组织中XPF基因微卫星不稳定性的分析 | 第59-62页 |
3.2 XPF、ERCC1 相互作用及rs2020959 位点附近序列分析 | 第62-64页 |
3.3 胃癌组织免疫酶标记结果 | 第64-67页 |
3.4 核苷酸内切修复酶XPF及tXPF与ERCC1 的相互作用,蛋白质稳定性的检测 | 第67-69页 |
3.5 肿瘤病人血样及不同肿瘤基因分型 | 第69-73页 |
3.6 XPF及tXPF在AGS,MNK45,SGC7901 及HEK293t细胞系中表达的检测 | 第73-76页 |
3.7 核苷酸内切修复酶XPF及其突变体泛素化途径的降解 | 第76-78页 |
3.8 彗星实验 | 第78-80页 |
4 讨论 | 第80-84页 |
5 结论 | 第84-85页 |
6 参考文献 | 第85-94页 |
附录 综述 | 第94-124页 |
综述参考文献 | 第110-124页 |
致谢 | 第124-125页 |
学术论文和科研成果目录 | 第125页 |