英文缩略词表 | 第13-14页 |
中文摘要 | 第14-18页 |
ABSTRACT | 第18-21页 |
前言 | 第22-40页 |
1 水凝胶 | 第22-25页 |
1.1 水凝胶的定义 | 第22页 |
1.2 水凝胶的分类 | 第22-23页 |
1.3 水凝胶的应用 | 第23-25页 |
1.3.1 组织工程材料 | 第23页 |
1.3.2 药物载体 | 第23-24页 |
1.3.3 细胞载体 | 第24-25页 |
2 丝胶蛋白 | 第25-28页 |
2.1 丝胶蛋白的定义 | 第25页 |
2.2 丝胶蛋白的组成 | 第25页 |
2.3 丝胶蛋白的提取方法 | 第25-26页 |
2.4 丝胶蛋白的性质 | 第26-27页 |
2.5 丝胶蛋白的应用 | 第27-28页 |
3 立题依据 | 第28-30页 |
参考文献 | 第30-40页 |
第一部分 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶作为药物载体应用于恶性黑色素瘤的治疗 | 第40-87页 |
1 引言 | 第40-42页 |
2 材料与方法 | 第42-56页 |
2.1 实验材料 | 第42-43页 |
2.2 实验方法 | 第43-56页 |
2.2.1 丝胶蛋白的提取 | 第43-44页 |
2.2.2 丝胶蛋白的化学修饰 | 第44-45页 |
2.2.3 氧化葡聚糖的制备 | 第45-47页 |
2.2.4 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶的制备 | 第47页 |
2.2.5 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶冻干支架的制备 | 第47-48页 |
2.2.6 丝胶蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第48-49页 |
2.2.7 化学修饰的丝胶蛋白及丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶结构表征 | 第49-50页 |
2.2.8 氧化葡聚糖的结构表征 | 第50-51页 |
2.2.9 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶吸水膨胀测试 | 第51页 |
2.2.10 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶凝胶时间测试 | 第51页 |
2.2.11 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶流变学性能测试 | 第51-52页 |
2.2.12 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶微观结构表征 | 第52页 |
2.2.13 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶降解测试 | 第52页 |
2.2.14 细胞培养 | 第52-53页 |
2.2.15 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶体外生物相容性测试 | 第53-54页 |
2.2.16 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶体外控释性能测试 | 第54页 |
2.2.17 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶体外荧光测试 | 第54-55页 |
2.2.18 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶体内荧光测试 | 第55-56页 |
2.2.19 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶搭载阿霉素抑制黑色素瘤 | 第56页 |
2.2.20 统计分析 | 第56页 |
3 结果与讨论 | 第56-78页 |
3.1 丝胶蛋白的提取及化学修饰 | 第56-57页 |
3.2 化学修饰前后丝胶蛋白SDS-PAGE分析 | 第57-58页 |
3.3 化学修饰前后丝胶蛋白及丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶红外光谱分 | 第58-59页 |
3.4 葡聚糖及氧化葡聚糖结构表征分析 | 第59-60页 |
3.5 氧化葡聚糖氧化度及分子量的测定 | 第60-61页 |
3.6 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)不同温度条件下凝胶时间测定 | 第61-62页 |
3.7 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)不同pH条件下吸水膨胀性能评价 | 第62-63页 |
3.8 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)流变学性能评价 | 第63-64页 |
3.9 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)微观结构 | 第64-65页 |
3.10 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)降解动力学分析 | 第65-66页 |
3.11 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)体外生物相容性分析 | 第66-67页 |
3.12 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)体内生物相容性评价 | 第67-68页 |
3.13 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)体外释药行为评价 | 第68-70页 |
3.14 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)体外荧光特性评价 | 第70-72页 |
3.15 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)体内荧光特性评价 | 第72-73页 |
3.16 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)自发荧光体内监测药物释放及水凝胶降解 | 第73-76页 |
3.17 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)搭载化疗药物抑制恶性黑色素瘤 | 第76-78页 |
4 总结 | 第78-81页 |
参考文献 | 第81-87页 |
第二部分 紫外光交联的丝胶蛋白水凝胶的制备及作为3D生物支架的研究 | 第87-130页 |
1 引言 | 第87-89页 |
2 材料与方法 | 第89-100页 |
2.1 实验材料 | 第89-90页 |
2.2 实验方法 | 第90-100页 |
2.2.1 丝胶蛋白的提取 | 第90页 |
2.2.2 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白的制备 | 第90-91页 |
2.2.3 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)的制备 | 第91页 |
2.2.4 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)冻干支架的制备 | 第91页 |
2.2.5 丝胶蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第91页 |
2.2.6 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白及丝胶蛋白水凝胶结构表征 | 第91-92页 |
2.2.7 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)机械性能测试 | 第92页 |
2.2.8 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)吸水膨胀测试 | 第92-93页 |
2.2.9 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)微观结构检测 | 第93页 |
2.2.10 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)降解测试 | 第93页 |
2.2.11 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)药物控释测试 | 第93-94页 |
2.2.12 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)细胞降解测试 | 第94页 |
2.2.13 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白及丝胶蛋白水凝胶体外荧光检测 | 第94-95页 |
2.2.14 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白及丝胶蛋白水凝胶体内荧光检测 | 第95页 |
2.2.15 细胞培养 | 第95页 |
2.2.16 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)体外生物相容性检测 | 第95页 |
2.2.17 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)培养Raw264.7细胞形态观察 | 第95-96页 |
2.2.18 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)刺激Raw264.7细胞TNF-α、IL-β的mRNA水平检测 | 第96页 |
2.2.19 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)体内生物相容性检测 | 第96页 |
2.2.20 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)细胞粘附测试 | 第96-97页 |
2.2.21 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)长期支持细胞生长测试 | 第97页 |
2.2.22 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)细胞粘附形态观察 | 第97页 |
2.2.23 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白(SMA-1、SMA-2、SMA-3)促进细胞增殖测试 | 第97-98页 |
2.2.24 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)促进细胞增殖测试 | 第98页 |
2.2.25 通过流式细胞术检测甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白(SMA-1、SMA-2、SMA-3)对细胞周期的影响 | 第98-99页 |
2.2.26 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)3D细胞培养 | 第99页 |
2.2.27 统计分析 | 第99-100页 |
3. 结果与讨论 | 第100-122页 |
3.1 丝胶蛋白的提取及化学修饰 | 第100-101页 |
3.2 化学修饰前后丝胶蛋白SDS-PAGE分析 | 第101-102页 |
3.3 化学修饰前后丝胶蛋白及丝胶蛋白水凝胶红外光谱分析 | 第102-103页 |
3.4 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶凝胶条件分析 | 第103-104页 |
3.5 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)机械性能评价 | 第104页 |
3.6 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)吸水膨胀评价 | 第104-105页 |
3.7 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)微观结构 | 第105-107页 |
3.8 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)降解动力学分析 | 第107-108页 |
3.9 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)体外释药行为评价 | 第108-109页 |
3.10 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)体外生物相容性分析 | 第109-110页 |
3.11 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白(SMA-1、SMA-2、SMA-3)及丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)体外生物相容性评价 | 第110-112页 |
3.12 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)体内生物相容性评价 | 第112-114页 |
3.13 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)荧光特性评价 | 第114-116页 |
3.14 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)细胞粘附性能评价 | 第116-119页 |
3.15 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)促进细胞增殖评价 | 第119-121页 |
3.16 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)3D细胞培养分析 | 第121-122页 |
4. 总结 | 第122-124页 |
参考文献 | 第124-130页 |
第三部分 丝胶蛋白水凝胶应用于伤口修复的研究 | 第130-148页 |
1 引言 | 第130-131页 |
2 材料与方法 | 第131-135页 |
2.1 实验材料 | 第131-132页 |
2.2 实验方法 | 第132-135页 |
2.2.1 丝胶蛋白的提取 | 第132页 |
2.2.2 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白的制备 | 第132页 |
2.2.3 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-2)的制备 | 第132页 |
2.2.4 小鼠皮肤损伤模型的建立 | 第132-133页 |
2.2.5 皮肤伤口面积统计 | 第133页 |
2.2.6 皮肤损伤小鼠伤口组织H&E染色 | 第133页 |
2.2.7 皮肤损伤小鼠伤口组织免疫组化染色 | 第133-134页 |
2.2.8 丝胶蛋白水凝胶刺激NIH3T3细胞VEGF、EGF的mRNA水平检测 | 第134页 |
2.2.9 SMH-2修复后皮肤组织中VEGF、EGF的mRNA水平检测 | 第134页 |
2.2.10 统计分析 | 第134-135页 |
3. 结果与讨论 | 第135-142页 |
3.1 小鼠全皮层损伤模型的建立 | 第135页 |
3.2 小鼠皮肤伤口面积测定 | 第135-136页 |
3.3 小鼠皮肤伤口组织H&E及Masson染色 | 第136页 |
3.4 小鼠皮肤伤口组织CD68及MPO染色 | 第136-138页 |
3.5 小鼠皮肤伤口VEGF、CD31及α-SMA染色 | 第138-141页 |
3.6 丝胶蛋白水凝胶刺激NIH3T3细胞VEGF、EGF的mRNA水平分析 | 第141页 |
3.7 SMH-2修复后皮肤组织中VEGF、EGF的mRNA水平分析 | 第141-142页 |
4. 总结 | 第142-144页 |
参考文献 | 第144-148页 |
文献综述 | 第148-165页 |
1. 丝胶蛋白 | 第148-149页 |
2. 丝胶蛋白的分离方法 | 第149-151页 |
2.1 高温水解法 | 第149页 |
2.2 碳酸钠高温提取法 | 第149-150页 |
2.3 溴化锂低温提取法 | 第150页 |
2.4 其他方法 | 第150-151页 |
3. 丝胶蛋白的性能 | 第151-153页 |
3.1 丝胶蛋白具有良好的细胞粘附性能 | 第151-152页 |
3.2 丝胶蛋白具有良好的生物相容性 | 第152页 |
3.3 丝胶蛋白具有促进细胞增殖的性能 | 第152页 |
3.4 丝胶蛋白具有促进细胞迁移的性能 | 第152-153页 |
4. 丝胶蛋白的应用形式 | 第153-155页 |
4.1 丝胶蛋白水凝胶 | 第153-154页 |
4.2 丝胶蛋白生物支架 | 第154页 |
4.3 丝胶蛋白纳米粒子 | 第154-155页 |
5. 丝胶蛋白的应用 | 第155-157页 |
5.1 丝胶蛋白应用于美容行业 | 第155页 |
5.2 丝胶蛋白应用于生物医学领域 | 第155-156页 |
5.3 丝胶蛋白应用于其他领域 | 第156-157页 |
参考文献 | 第157-165页 |
攻读博士学位期间的学术成果 | 第165-166页 |
致谢 | 第166-167页 |