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丝胶蛋白水凝胶和支架的制备及在生物医学中的应用

英文缩略词表第13-14页
中文摘要第14-18页
ABSTRACT第18-21页
前言第22-40页
    1 水凝胶第22-25页
        1.1 水凝胶的定义第22页
        1.2 水凝胶的分类第22-23页
        1.3 水凝胶的应用第23-25页
            1.3.1 组织工程材料第23页
            1.3.2 药物载体第23-24页
            1.3.3 细胞载体第24-25页
    2 丝胶蛋白第25-28页
        2.1 丝胶蛋白的定义第25页
        2.2 丝胶蛋白的组成第25页
        2.3 丝胶蛋白的提取方法第25-26页
        2.4 丝胶蛋白的性质第26-27页
        2.5 丝胶蛋白的应用第27-28页
    3 立题依据第28-30页
    参考文献第30-40页
第一部分 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶作为药物载体应用于恶性黑色素瘤的治疗第40-87页
    1 引言第40-42页
    2 材料与方法第42-56页
        2.1 实验材料第42-43页
        2.2 实验方法第43-56页
            2.2.1 丝胶蛋白的提取第43-44页
            2.2.2 丝胶蛋白的化学修饰第44-45页
            2.2.3 氧化葡聚糖的制备第45-47页
            2.2.4 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶的制备第47页
            2.2.5 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶冻干支架的制备第47-48页
            2.2.6 丝胶蛋白的SDS-PAGE电泳第48-49页
            2.2.7 化学修饰的丝胶蛋白及丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶结构表征第49-50页
            2.2.8 氧化葡聚糖的结构表征第50-51页
            2.2.9 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶吸水膨胀测试第51页
            2.2.10 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶凝胶时间测试第51页
            2.2.11 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶流变学性能测试第51-52页
            2.2.12 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶微观结构表征第52页
            2.2.13 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶降解测试第52页
            2.2.14 细胞培养第52-53页
            2.2.15 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶体外生物相容性测试第53-54页
            2.2.16 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶体外控释性能测试第54页
            2.2.17 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶体外荧光测试第54-55页
            2.2.18 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶体内荧光测试第55-56页
            2.2.19 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶搭载阿霉素抑制黑色素瘤第56页
            2.2.20 统计分析第56页
    3 结果与讨论第56-78页
        3.1 丝胶蛋白的提取及化学修饰第56-57页
        3.2 化学修饰前后丝胶蛋白SDS-PAGE分析第57-58页
        3.3 化学修饰前后丝胶蛋白及丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶红外光谱分第58-59页
        3.4 葡聚糖及氧化葡聚糖结构表征分析第59-60页
        3.5 氧化葡聚糖氧化度及分子量的测定第60-61页
        3.6 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)不同温度条件下凝胶时间测定第61-62页
        3.7 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)不同pH条件下吸水膨胀性能评价第62-63页
        3.8 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)流变学性能评价第63-64页
        3.9 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)微观结构第64-65页
        3.10 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)降解动力学分析第65-66页
        3.11 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)体外生物相容性分析第66-67页
        3.12 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)体内生物相容性评价第67-68页
        3.13 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)体外释药行为评价第68-70页
        3.14 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)体外荧光特性评价第70-72页
        3.15 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)体内荧光特性评价第72-73页
        3.16 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)自发荧光体内监测药物释放及水凝胶降解第73-76页
        3.17 丝胶蛋白/氧化葡聚糖复合水凝胶(SDH-1、SDH-2、SDH-3)搭载化疗药物抑制恶性黑色素瘤第76-78页
    4 总结第78-81页
    参考文献第81-87页
第二部分 紫外光交联的丝胶蛋白水凝胶的制备及作为3D生物支架的研究第87-130页
    1 引言第87-89页
    2 材料与方法第89-100页
        2.1 实验材料第89-90页
        2.2 实验方法第90-100页
            2.2.1 丝胶蛋白的提取第90页
            2.2.2 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白的制备第90-91页
            2.2.3 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)的制备第91页
            2.2.4 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)冻干支架的制备第91页
            2.2.5 丝胶蛋白的SDS-PAGE电泳第91页
            2.2.6 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白及丝胶蛋白水凝胶结构表征第91-92页
            2.2.7 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)机械性能测试第92页
            2.2.8 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)吸水膨胀测试第92-93页
            2.2.9 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)微观结构检测第93页
            2.2.10 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)降解测试第93页
            2.2.11 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)药物控释测试第93-94页
            2.2.12 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)细胞降解测试第94页
            2.2.13 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白及丝胶蛋白水凝胶体外荧光检测第94-95页
            2.2.14 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白及丝胶蛋白水凝胶体内荧光检测第95页
            2.2.15 细胞培养第95页
            2.2.16 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)体外生物相容性检测第95页
            2.2.17 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)培养Raw264.7细胞形态观察第95-96页
            2.2.18 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)刺激Raw264.7细胞TNF-α、IL-β的mRNA水平检测第96页
            2.2.19 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)体内生物相容性检测第96页
            2.2.20 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)细胞粘附测试第96-97页
            2.2.21 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)长期支持细胞生长测试第97页
            2.2.22 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)细胞粘附形态观察第97页
            2.2.23 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白(SMA-1、SMA-2、SMA-3)促进细胞增殖测试第97-98页
            2.2.24 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)促进细胞增殖测试第98页
            2.2.25 通过流式细胞术检测甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白(SMA-1、SMA-2、SMA-3)对细胞周期的影响第98-99页
            2.2.26 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)3D细胞培养第99页
            2.2.27 统计分析第99-100页
    3. 结果与讨论第100-122页
        3.1 丝胶蛋白的提取及化学修饰第100-101页
        3.2 化学修饰前后丝胶蛋白SDS-PAGE分析第101-102页
        3.3 化学修饰前后丝胶蛋白及丝胶蛋白水凝胶红外光谱分析第102-103页
        3.4 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶凝胶条件分析第103-104页
        3.5 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)机械性能评价第104页
        3.6 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)吸水膨胀评价第104-105页
        3.7 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)微观结构第105-107页
        3.8 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)降解动力学分析第107-108页
        3.9 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)体外释药行为评价第108-109页
        3.10 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)体外生物相容性分析第109-110页
        3.11 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白(SMA-1、SMA-2、SMA-3)及丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)体外生物相容性评价第110-112页
        3.12 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)体内生物相容性评价第112-114页
        3.13 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)荧光特性评价第114-116页
        3.14 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)细胞粘附性能评价第116-119页
        3.15 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)促进细胞增殖评价第119-121页
        3.16 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-1、SMH-2、SMH-3)3D细胞培养分析第121-122页
    4. 总结第122-124页
    参考文献第124-130页
第三部分 丝胶蛋白水凝胶应用于伤口修复的研究第130-148页
    1 引言第130-131页
    2 材料与方法第131-135页
        2.1 实验材料第131-132页
        2.2 实验方法第132-135页
            2.2.1 丝胶蛋白的提取第132页
            2.2.2 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白的制备第132页
            2.2.3 甲基丙烯基修饰的丝胶蛋白水凝胶(SMH-2)的制备第132页
            2.2.4 小鼠皮肤损伤模型的建立第132-133页
            2.2.5 皮肤伤口面积统计第133页
            2.2.6 皮肤损伤小鼠伤口组织H&E染色第133页
            2.2.7 皮肤损伤小鼠伤口组织免疫组化染色第133-134页
            2.2.8 丝胶蛋白水凝胶刺激NIH3T3细胞VEGF、EGF的mRNA水平检测第134页
            2.2.9 SMH-2修复后皮肤组织中VEGF、EGF的mRNA水平检测第134页
            2.2.10 统计分析第134-135页
    3. 结果与讨论第135-142页
        3.1 小鼠全皮层损伤模型的建立第135页
        3.2 小鼠皮肤伤口面积测定第135-136页
        3.3 小鼠皮肤伤口组织H&E及Masson染色第136页
        3.4 小鼠皮肤伤口组织CD68及MPO染色第136-138页
        3.5 小鼠皮肤伤口VEGF、CD31及α-SMA染色第138-141页
        3.6 丝胶蛋白水凝胶刺激NIH3T3细胞VEGF、EGF的mRNA水平分析第141页
        3.7 SMH-2修复后皮肤组织中VEGF、EGF的mRNA水平分析第141-142页
    4. 总结第142-144页
    参考文献第144-148页
文献综述第148-165页
    1. 丝胶蛋白第148-149页
    2. 丝胶蛋白的分离方法第149-151页
        2.1 高温水解法第149页
        2.2 碳酸钠高温提取法第149-150页
        2.3 溴化锂低温提取法第150页
        2.4 其他方法第150-151页
    3. 丝胶蛋白的性能第151-153页
        3.1 丝胶蛋白具有良好的细胞粘附性能第151-152页
        3.2 丝胶蛋白具有良好的生物相容性第152页
        3.3 丝胶蛋白具有促进细胞增殖的性能第152页
        3.4 丝胶蛋白具有促进细胞迁移的性能第152-153页
    4. 丝胶蛋白的应用形式第153-155页
        4.1 丝胶蛋白水凝胶第153-154页
        4.2 丝胶蛋白生物支架第154页
        4.3 丝胶蛋白纳米粒子第154-155页
    5. 丝胶蛋白的应用第155-157页
        5.1 丝胶蛋白应用于美容行业第155页
        5.2 丝胶蛋白应用于生物医学领域第155-156页
        5.3 丝胶蛋白应用于其他领域第156-157页
    参考文献第157-165页
攻读博士学位期间的学术成果第165-166页
致谢第166-167页

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