中文摘要 | 第5-9页 |
Abstract | 第9-14页 |
第1章 引言 | 第21-41页 |
1.1 综述 1:抑癌基因RBM5的研究进展 | 第23-30页 |
1.1.1 RBM5基因表达及调控 | 第23-25页 |
1.1.2 RBM5蛋白结构 | 第25-26页 |
1.1.3 RBM5的生物学功能 | 第26-28页 |
1.1.4 RBM5与肿瘤发生 | 第28-29页 |
1.1.5 RBM5与肿瘤治疗 | 第29-30页 |
1.2 综述 2:自噬与肺癌的研究进展 | 第30-41页 |
1.2.1 自噬的概述 | 第31-33页 |
1.2.2 自噬的调控机制 | 第33-36页 |
1.2.3 自噬与肺癌的发生 | 第36-37页 |
1.2.4 自噬与肺癌的治疗 | 第37-41页 |
第2章 材料和方法 | 第41-67页 |
2.1 自噬调控异常在人肺腺癌A549细胞顺铂耐药中的作用 | 第41-49页 |
2.1.1 主要仪器 | 第41页 |
2.1.2 主要试剂 | 第41-42页 |
2.1.3 主要液体配制 | 第42-43页 |
2.1.4 细胞培养 | 第43页 |
2.1.5 MTT检测A549和A549/DDP细胞的顺铂敏感性 | 第43-44页 |
2.1.6 Western Blot | 第44-47页 |
2.1.7 吖啶橙染色 | 第47-48页 |
2.1.8 MDC染色 | 第48页 |
2.1.9 透射电镜检测 | 第48-49页 |
2.1.10 统计学方法 | 第49页 |
2.2 RBM5过表达对人肺腺癌A549细胞自噬的调节作用 | 第49-61页 |
2.2.1 主要仪器 | 第49-50页 |
2.2.2 主要试剂 | 第50-51页 |
2.2.3 主要液体配制 | 第51-52页 |
2.2.4 细胞培养 | 第52页 |
2.2.5 动物培养 | 第52页 |
2.2.6 菌株与质粒 | 第52-53页 |
2.2.7 细胞转染 | 第53-54页 |
2.2.8 RBM5基因引物设计 | 第54-55页 |
2.2.9 RT-PCR | 第55-57页 |
2.2.10 MTT检测A549细胞的生存率和顺铂敏感性 | 第57页 |
2.2.11 Western Blot | 第57页 |
2.2.12 吖啶橙染色 | 第57-58页 |
2.2.13 MDC染色 | 第58页 |
2.2.14 透射电镜检测 | 第58-59页 |
2.2.15 A549裸鼠皮下移植瘤模型建立及处理 | 第59-60页 |
2.2.16 免疫组化法检测移植瘤组织中相关蛋白的表达 | 第60-61页 |
2.2.17 统计学方法 | 第61页 |
2.3 RBM5过表达对顺铂耐药A549/DDP细胞自噬的调节作用 | 第61-67页 |
2.3.1 主要仪器 | 第61-62页 |
2.3.2 主要试剂 | 第62页 |
2.3.3 主要液体配制 | 第62-63页 |
2.3.4 细胞培养 | 第63-64页 |
2.3.5 菌株与质粒 | 第64页 |
2.3.6 细胞转染 | 第64页 |
2.3.7 RBM5基因引物设计 | 第64页 |
2.3.8 RT-PCR | 第64页 |
2.3.9 MTT检测A549细胞的生存率和顺铂敏感性 | 第64-65页 |
2.3.10 Western Blot | 第65页 |
2.3.11 吖啶橙染色 | 第65页 |
2.3.12 MDC染色 | 第65-66页 |
2.3.13 透射电镜检测 | 第66页 |
2.3.14 统计学方法 | 第66-67页 |
第3章 实验结果 | 第67-89页 |
3.1 自噬调控异常在人肺腺癌A549细胞顺铂耐药中的作用 | 第67-72页 |
3.1.1 A549及A549/DDP细胞顺铂敏感性检测 | 第67-68页 |
3.1.2 倒置显微镜观察A549/DDP细胞与A549细胞形态差异 | 第68页 |
3.1.3 自噬相关蛋白表达水平检测 | 第68-70页 |
3.1.4 吖啶橙染色检测A549/DDP与A549细胞中自噬囊泡的形成 | 第70-71页 |
3.1.5 MDC染色检测A549/DDP与A549细胞中自噬囊泡的形成 | 第71-72页 |
3.1.6 透射电镜检测A549/DDP与A549细胞中自噬囊泡的形成 | 第72页 |
3.2 RBM5过表达对A549细胞自噬的调节作用及意义 | 第72-81页 |
3.2.1 转染GV287-RBM5后A549细胞中RBM5表达水平检测 | 第72-73页 |
3.2.2 A549细胞中RBM5过表达对自噬相关蛋白表达水平的影响 | 第73-75页 |
3.2.3 吖啶橙染色检测过表达RBM5的A549细胞中自噬囊泡的形成 | 第75页 |
3.2.4 MDC染色检测过表达RBM5的A549细胞中自噬囊泡的形成 | 第75-76页 |
3.2.5 透射电镜检测过表达RBM5的A549细胞中自噬囊泡的形成 | 第76-77页 |
3.2.6 过表达RBM5的A549细胞生存率及顺铂敏感性检测 | 第77-78页 |
3.2.7 A549细胞中RBM5过表达对自噬调节蛋白表达水平的影响 | 第78-79页 |
3.2.8 A549移植瘤中RBM5及自噬相关蛋白表达水平的检测 | 第79-81页 |
3.3 RBM5过表达对A549/DDP细胞自噬的调节作用及意义 | 第81-89页 |
3.3.1 A549 /DDP细胞中RBM5及自噬相关蛋白表达水平检测 | 第81-82页 |
3.3.2 荧光染色检测A549/DDP细胞中自噬囊泡的形成 | 第82-83页 |
3.3.3 透射电镜检测A549/DDP细胞中自噬囊泡的形成 | 第83-84页 |
3.3.4 3-MA有效抑制RBM5诱导的A549/DDP细胞自噬增强 | 第84-86页 |
3.3.5 3-MA及RBM5过表达对A549/DDP细胞增殖活性影响 | 第86-89页 |
第4章 讨论 | 第89-97页 |
第5章 结论 | 第97-98页 |
创新点 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-123页 |
作者简介及博士期间所取得的科研成果 | 第123-127页 |
致谢 | 第127页 |