| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-32页 |
| 1.1 调节性T细胞 | 第12-20页 |
| 1.1.1 调节性T细胞的分类 | 第12-14页 |
| 1.1.2 调节性T细胞发挥作用的方式及分子机制 | 第14-16页 |
| 1.1.3 调节性T细胞与疾病、病毒感染 | 第16-18页 |
| 1.1.4 调节性T细胞与移植排斥和疾病治疗 | 第18-19页 |
| 1.1.5 鸡调节性T细胞 | 第19-20页 |
| 1.2 传染性法氏囊病 | 第20-28页 |
| 1.2.1 IBDV的结构与基因组 | 第20-24页 |
| 1.2.2 IBDV复制与表达调控 | 第24-25页 |
| 1.2.3 IBDV的致病机制 | 第25-28页 |
| 1.3 免疫耐受 | 第28-31页 |
| 1.3.1 免疫耐受的分类 | 第29页 |
| 1.3.2 人工诱导免疫耐受 | 第29-30页 |
| 1.3.3 调节性T细胞与免疫耐受 | 第30-31页 |
| 1.3.4 鸡中免疫耐受的研究 | 第31页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第31-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-55页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-35页 |
| 2.1.1 质粒与菌株 | 第32页 |
| 2.1.2 实验动物与鸡胚 | 第32页 |
| 2.1.3 病毒与细胞系 | 第32页 |
| 2.1.4 试剂及试剂盒 | 第32-33页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第33-34页 |
| 2.1.6 主要试剂配制 | 第34-35页 |
| 2.1.7 实验数据分析相关软件 | 第35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-55页 |
| 2.2.1 无信号肽和跨膜区的鸡CD25序列扩增 | 第35-39页 |
| 2.2.2 无信号肽和跨膜区的鸡CD25蛋白表达 | 第39-41页 |
| 2.2.3 鸡CD25单克隆抗体的制备与纯化 | 第41-44页 |
| 2.2.4 CFSE染色 | 第44-45页 |
| 2.2.5 流式细胞术 | 第45-46页 |
| 2.2.6 RNA提取 | 第46-47页 |
| 2.2.7 Reverse transcription(RT)-PCR | 第47页 |
| 2.2.8 实时荧光定量PCR | 第47-48页 |
| 2.2.9 Western Blot | 第48-49页 |
| 2.2.10 细胞培养 | 第49-50页 |
| 2.2.11 病毒增殖 | 第50页 |
| 2.2.12 病毒滴度的测定 | 第50-52页 |
| 2.2.13 免疫耐受相关动物实验 | 第52-53页 |
| 2.2.14 ELISA检测 | 第53-54页 |
| 2.2.15 引物合成与测序 | 第54页 |
| 2.2.16 实验数据的分析与图片处理 | 第54-55页 |
| 第三章 结果与分析 | 第55-84页 |
| 3.1 鸡CD25抗体的制备及鸡CD4~+CD25~+细胞免疫抑制特性分析 | 第55-68页 |
| 3.1.1 鸡CD25序列的抗原性分析 | 第55-56页 |
| 3.1.2 鸡CD25编码区全长序列的克隆与鉴定 | 第56-58页 |
| 3.1.3 制备鸡CD25抗体区域序列的克隆与鉴定 | 第58-59页 |
| 3.1.4 CD25蛋白的表达和纯化 | 第59-61页 |
| 3.1.5 鸡CD25单克隆抗体的制备 | 第61-62页 |
| 3.1.6 鸡CD25抗体的特异性鉴定 | 第62-63页 |
| 3.1.7 鸡CD4~+CD25~+细胞抑制特性的鉴定 | 第63-67页 |
| 3.1.8 小结 | 第67-68页 |
| 3.2 鸡CD4~+CD25~+细胞在不同毒力IBDV感染过程中的作用 | 第68-76页 |
| 3.2.1 IBDV感染后法氏囊中vp2基因表达水平 | 第68-69页 |
| 3.2.2 IBDV感染后胸腺和脾脏中CD4~+CD25~+细胞迅速减少 | 第69-70页 |
| 3.2.3 IBDV感染后外周血中CD4~+CD25~+细胞比例波动变化 | 第70-71页 |
| 3.2.4 IBDV感染后CD4~+T细胞浸润法氏囊,CD4~+CD25~+细胞占很大比例 | 第71-73页 |
| 3.2.5 IBDV感染后中枢免疫器官中IL-10和TGF-β mRNA表达量变化 | 第73-75页 |
| 3.2.6 小结 | 第75-76页 |
| 3.3 鸡CD4~+CD25~+细胞在晚期胚胎注射外源蛋白诱导免疫耐受的作用 | 第76-84页 |
| 3.3.1 EID20鸡血管注射外源BSA诱导出孵后鸡对BSA的免疫耐受 | 第76-78页 |
| 3.3.2 EID20鸡血管注射BSA诱导免疫耐受过程中外周血中CD4~+CD25~+细胞比例升高 | 第78-79页 |
| 3.3.3 EID16血管注射CD25抗体减少CD4~+CD25~+细胞鸡模型的建立 | 第79-80页 |
| 3.3.4 EID16注射CD25抗体后EID20注射BSA,免疫耐受水平降低 | 第80-83页 |
| 3.3.5 小结 | 第83-84页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第84-87页 |
| 4.1 不同毒力的IBDV感染鸡体免疫表现的异同 | 第84页 |
| 4.2 鸡CD4~+CD25~+调节性T细胞的来源和作用方式 | 第84-85页 |
| 4.3 鸡CD4~+CD25~+细胞与IBDV引起的免疫抑制 | 第85页 |
| 4.4 注射鸡CD25抗体减少CD4~+CD25~+细胞的鸡动物模型建立 | 第85-86页 |
| 4.5 鸡胚动物模型与人类疾病研究 | 第86-87页 |
| 第五章 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 附录 | 第101-105页 |
| 个人简历 | 第105页 |
