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内皮细胞EA.hy926氧化损伤及药物保护的脂质组学研究

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-10页
前言第10-12页
第一章 文献综述第12-31页
   ·血管内皮的功能及功能障碍第12-14页
     ·血管内皮细胞与血栓形成第13页
     ·血管内皮细胞与动脉粥样硬化第13页
     ·血管内皮细胞与氧化胁迫第13-14页
     ·内皮细胞与炎症反应第14页
   ·脂质组学研究进展第14-19页
     ·脂质组学的发展第14-16页
     ·脂质组学研究策略第16-19页
       ·脂质提取第16-17页
       ·脂质分离第17页
       ·脂质检测第17-18页
       ·建立脂质组学谱/库第18-19页
       ·生物信息学分析第19页
   ·磷脂、磷脂酶及相关信号转导途径第19-26页
     ·膜磷脂组成对细胞功能的影响第19-20页
     ·磷脂的代谢及调控作用及相关的脂质信号分子第20-24页
     ·花生四烯酸的代谢调控和相关信号转导途径第24-26页
   ·川芎嗪和丁烯苯酞及其药理作用第26-29页
     ·川芎嗪的药理作用第26-27页
       ·对心肌缺血一再灌注损伤的保护作用第26-27页
       ·保护血管内皮和抑制平滑肌细胞增殖的作用第27页
       ·对离子通道的影响第27页
       ·抗血小板凝集作用第27页
     ·丁烯苯酞的药理作用第27-29页
       ·抗肿瘤和抑制细胞增殖作用第27-28页
       ·影响钙离子通道第28页
       ·抗血小板凝集第28-29页
   ·本文研究意义和主要的研究内容第29-31页
     ·研究意义第29页
     ·研究内容第29-31页
第二章 基于LC/ESI/MS~n策略构建人脐静脉内皮细胞磷脂图谱第31-53页
   ·材料与方法第32-38页
     ·主要仪器与试剂第32-33页
     ·细胞培养第33-34页
     ·Bradford 法测定蛋白质浓度第34-35页
     ·内皮细胞系EA.hy926 膜磷脂的提取第35-36页
     ·膜磷脂的液相色谱串联质谱(LC/ESI/MS~n)分析第36-38页
     ·统计学处理第38页
   ·结果与讨论第38-52页
     ·细胞膜磷脂定性分析第38-43页
     ·细胞膜磷脂定量分析第43-52页
   ·小结第52-53页
第三章 氧化胁迫下EA.hy926 细胞磷脂图谱的变化第53-66页
   ·材料与方法第53-54页
     ·主要仪器与试剂第53页
     ·细胞培养第53页
     ·Bradford 法测定蛋白质浓度第53-54页
     ·内皮细胞系EA.hy926 膜磷脂的提取第54页
     ·膜磷脂的液相色谱串联质谱(LC/ESI/MS~n)分析第54页
     ·多元统计分析第54页
     ·统计学处理第54页
   ·结果与讨论第54-64页
     ·过氧化氢刺激下EA.hy926 细胞磷脂的变化第54-58页
     ·多元统计分析氧化胁迫下细胞磷脂代谢物的变化规律第58-64页
   ·小结第64-66页
第四章 川芎嗪、丁烯苯酞作用下EA.hy926 细胞磷脂图谱的变化第66-81页
   ·材料与方法第67-68页
     ·主要仪器与试剂第67页
     ·细胞培养第67页
     ·噻唑兰比色法检测细胞活力第67页
     ·Bradford 法测定蛋白质浓度第67页
     ·内皮细胞系EA.hy926 膜磷脂的提取第67-68页
     ·膜磷脂的液相色谱串联质谱(LC/ESI/MS~n)分析第68页
     ·多元统计分析第68页
     ·统计学处理第68页
   ·结果与讨论第68-80页
     ·川芎嗪和丁烯苯酞对H_20_2诱导损伤细胞的保护作用第68-69页
     ·TMP 和BP 预处理下EA.hy926 细胞磷脂的变化第69-75页
     ·多元统计分析TMP 和BP 预处理细胞磷脂代谢物的变化规律第75-80页
   ·小结第80-81页
第五章 抑制剂作用下EA.hy926 细胞磷脂图谱的变化第81-95页
   ·材料与方法第81-83页
     ·主要仪器与试剂第81-82页
     ·细胞培养第82页
     ·噻唑兰比色法检测细胞活力第82页
     ·Bradford 法测定蛋白质浓度第82页
     ·内皮细胞系EA.hy926 膜磷脂的提取第82页
     ·膜磷脂的液相色谱串联质谱(LC/ESI/MS~n)分析第82页
     ·多元统计分析第82页
     ·统计学处理第82-83页
   ·结果与讨论第83-93页
     ·ETYA 和PD98059 对细胞活力的影响第83-84页
     ·ETYA 和PD98059 作用下EA.hy926 细胞磷脂的变化第84-88页
     ·多元统计分析抑制剂预处理细胞磷脂代谢物的变化规律第88-93页
   ·小结第93-95页
第六章 磷脂酶及相关信号转导通路的研究第95-108页
   ·材料与方法第95-100页
     ·主要仪器与试剂第95-96页
     ·细胞培养第96页
     ·Bradford 法测定蛋白质浓度第96页
     ·薄层色谱法测定磷脂酶A 的活性第96页
     ·细胞总蛋白提取制备第96-97页
     ·蛋白免疫印迹(Western Blotting)第97-98页
     ·花生四烯酸的提取和纯化第98-99页
     ·LC-MS 测定花生四烯酸含量第99-100页
     ·统计学处理第100页
   ·结果与讨论第100-106页
     ·TMP 和BP 对cPLA_2活性的影响第100-103页
     ·药物和抑制剂对cPLA_2和ERK1/2 磷酸化的影响第103-104页
     ·药物和抑制剂对AA 释放的影响第104-106页
     ·药物对脂质代谢的调控的层次特征第106页
   ·小结第106-108页
第七章 结论与展望第108-111页
   ·结论第108-109页
   ·创新点第109页
   ·展望第109-111页
参考文献第111-131页
发表论文和科研情况说明第131-132页
附录第132-134页
致谢第134页

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