| 摘要 | 第3-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 符号说明 | 第11-19页 |
| 综述 | 第19-45页 |
| 1. 禽流感病毒的发现和发展 | 第19-26页 |
| 1.1 禽流感病毒的发现 | 第19-23页 |
| 1.2 主要的HPAI爆发事件 | 第23-25页 |
| 1.3 低致病性禽流感研究现状及其对公共安全影响 | 第25-26页 |
| 2. 禽流感的结构和编码的蛋白 | 第26-31页 |
| 2.1 禽流感的结构 | 第26-28页 |
| 2.2 聚合酶蛋白(PA,PB1和PB2蛋白) | 第28-29页 |
| 2.3 血凝素(HA) | 第29-30页 |
| 2.4 神经氨酸酶(NA) | 第30页 |
| 2.5 核蛋白(NP) | 第30-31页 |
| 2.6 基质蛋白(M) | 第31页 |
| 2.7 非结构蛋白(NS) | 第31页 |
| 3. HA产生抗体的部位及抗体的特性 | 第31-45页 |
| 3.1. HA头部产生的抗体 | 第34-35页 |
| 3.2 对H1广谱反应的CH65抗体 | 第35页 |
| 3.3 不同亚型的中和抗体 | 第35-36页 |
| 3.4 单一loop中和性抗体 | 第36页 |
| 3.5 针对茎部的广谱抗体 | 第36-38页 |
| 3.6 中和1组禽流感的抗体 | 第38-39页 |
| 3.7 中和2组禽流感的抗体 | 第39-40页 |
| 3.8 中和所有禽流感的抗体 | 第40-41页 |
| 3.9 B类流感的广谱中和抗体 | 第41-43页 |
| 3.10 总结和展望 | 第43-45页 |
| 研究内容一：抗H9N2病毒HA和NA克隆抗体的制备 | 第45-60页 |
| 1 材料 | 第46-48页 |
| 1.1 病毒 | 第46-47页 |
| 1.2 细胞及实验动物 | 第47页 |
| 1.3 培养基 | 第47-48页 |
| 1.4 主要仪器 | 第48页 |
| 2. 方法 | 第48-54页 |
| 2.1 A/chicken/Jiangsu/x1/2004(H9N2)(X1)病毒扩增 | 第48页 |
| 2.2 单克隆抗体研制 | 第48-50页 |
| 2.3 IFA筛选阳性杂交瘤细胞 | 第50-52页 |
| 2.4 杂交瘤细胞亚克隆 | 第52页 |
| 2.5 HI试验 | 第52-53页 |
| 2.6 H9N2 HA构建pcDNA-HA转染293T细胞筛分析单克隆抗体 | 第53页 |
| 2.7 单克隆抗体与不同毒株的免疫反应性分析 | 第53-54页 |
| 3 结果 | 第54-57页 |
| 3.1 获得多株抗H9N2特异性单克隆抗体 | 第54-56页 |
| 3.2 单克隆抗体HI检测分析 | 第56页 |
| 3.3 HI阴性的抗HA单抗的鉴定 | 第56-57页 |
| 3.4 抗NA单克隆抗体的鉴定结果 | 第57页 |
| 4. 讨论 | 第57-60页 |
| 研究内容二：抗体压力下H9N2病毒HA蛋白抗原位点氨基酸变异分析 | 第60-78页 |
| 1 材料 | 第61-62页 |
| 1.1 病毒 | 第61页 |
| 1.2 细胞及实验动物 | 第61页 |
| 1.3 培养基 | 第61-62页 |
| 1.4 主要仪器 | 第62页 |
| 2 方法 | 第62-67页 |
| 2.1 病毒扩增 | 第62页 |
| 2.2 抗体亚类鉴定 | 第62页 |
| 2.3 腹水制备 | 第62-63页 |
| 2.4 HA和HI检测腹水效价 | 第63页 |
| 2.5 IFA检测腹水IF效价 | 第63页 |
| 2.6 MN试验 | 第63-64页 |
| 2.7 逃逸株的制备方法 | 第64-65页 |
| 2.8 野毒株和逃逸株HA测序 | 第65-67页 |
| 2.9 序列分析 | 第67页 |
| 3 结果 | 第67-75页 |
| 3.1 抗HA单克隆抗体的亚类鉴定以及腹水抗体效价鉴定 | 第67-68页 |
| 3.2 单克隆抗体的特异性检测 | 第68-69页 |
| 3.3 单克隆抗体的病毒逃逸株 | 第69-70页 |
| 3.4 逃逸株和原始病毒对mAbs的交叉反应实验 | 第70-72页 |
| 3.5 抗体逃逸株的HA基因序列分析 | 第72-73页 |
| 3.6 田间野毒氨基酸的变异分析结果 | 第73-75页 |
| 4 讨论 | 第75-78页 |
| 研究内容三：抗体压力下H9N2 NA抗原位点氨基酸变异分析 | 第78-98页 |
| 1 材料 | 第79-81页 |
| 1.1 病毒 | 第79页 |
| 1.2 细胞及实验动物 | 第79页 |
| 1.3 培养基及试剂 | 第79-81页 |
| 1.4 主要仪器 | 第81页 |
| 2 方法 | 第81-89页 |
| 2.1 亚类鉴定 | 第81页 |
| 2.2 腹水制备 | 第81页 |
| 2.3 腹水纯化 | 第81-82页 |
| 2.4 HA试验 | 第82页 |
| 2.5 MN试验 | 第82-84页 |
| 2.6 抗体逃逸株的制备方法 | 第84页 |
| 2.7 野毒株和抗体逃逸株NA序列分析 | 第84-86页 |
| 2.8 序列分析 | 第86页 |
| 2.9 NI试验 | 第86-89页 |
| 3 结果 | 第89-96页 |
| 3.1 抗NA单克隆抗体生物学特性 | 第89-90页 |
| 3.2 筛选单克隆抗体的X1株H9N2病毒抗体逃逸株 | 第90页 |
| 3.3 单克隆抗体对原始病毒和抗体逃逸株的抑制作用 | 第90-91页 |
| 3.4 抗体逃逸株的测序结果分析 | 第91-95页 |
| 3.5 田间野毒NA氨基酸的变异分析 | 第95-96页 |
| 4 讨论 | 第96-98页 |
| 研究内容四：HI阴性抗HA单克隆抗体与HA结合位点的鉴定 | 第98-112页 |
| 1 材料 | 第99-100页 |
| 1.1 病毒 | 第99页 |
| 1.2 细胞及实验动物 | 第99页 |
| 1.3 培养基及试剂 | 第99-100页 |
| 1.4 主要仪器 | 第100页 |
| 2 方法 | 第100-106页 |
| 2.1 亚类鉴定 | 第100-101页 |
| 2.2 腹水制备 | 第101页 |
| 2.3 腹水纯化 | 第101-102页 |
| 2.4 HA试验 | 第102页 |
| 2.5 MN试验 | 第102-106页 |
| 3 结果 | 第106-110页 |
| 3.1 2A8单克隆抗体生物学特点 | 第106-107页 |
| 3.2 2A8单克隆抗体的抗体逃逸株 | 第107-108页 |
| 3.3 抗体逃逸株的测序分析 | 第108-109页 |
| 3.4 田间野毒氨基酸的变异结果分析 | 第109-110页 |
| 4 讨论 | 第110-112页 |
| 全文总结 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第135-136页 |
