摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-16页 |
第一章 引言 | 第16-29页 |
·猪瘟与猪瘟病毒 | 第16-18页 |
·猪瘟 | 第16页 |
·猪瘟病毒 | 第16-18页 |
·猪瘟新型疫苗研究进展 | 第18-25页 |
·亚单位疫苗 | 第18-19页 |
·DNA 疫苗 | 第19-20页 |
·活病毒载体疫苗 | 第20-22页 |
·CSFV 基因缺失疫苗 | 第22-24页 |
·嵌合瘟病毒疫苗 | 第24-25页 |
·复制子载体疫苗 | 第25页 |
·提高 DNA 疫苗免疫效果的策略 | 第25-28页 |
·密码子优化 | 第25-26页 |
·分子佐剂 | 第26-27页 |
·Prime-boost 免疫策略 | 第27页 |
·递送方式 | 第27-28页 |
·本研究的目的与意义 | 第28-29页 |
第二章 表达猪瘟病毒 E2 蛋白的重组腺病毒的构建及其免疫原性分析 | 第29-44页 |
·材料和方法 | 第30-35页 |
·载体、细胞、生化试剂 | 第30-31页 |
·仪器设备 | 第31页 |
·重组腺病毒穿梭载体的构建 | 第31页 |
·重组腺粒的获得 | 第31-32页 |
·转染 HEK293 细胞 | 第32页 |
·重组腺病毒的鉴定 | 第32-33页 |
·家兔免疫攻毒试验 | 第33页 |
·猪体免疫攻毒试验 | 第33页 |
·阻断 ELISA | 第33页 |
·淋巴细胞增殖 | 第33-34页 |
·荧光定量 RT-PCR | 第34-35页 |
·结果 | 第35-42页 |
·遗传稳定性及蛋白表达 | 第35-36页 |
·一步生长曲线 | 第36-37页 |
·家兔上诱导的免疫应答 | 第37-39页 |
·猪只诱导的免疫应答 | 第39-42页 |
·讨论 | 第42-44页 |
第三章 甲病毒复制子载体猪瘟疫苗与重组腺病毒活载体疫苗联合免疫效果评价...29 | 第44-52页 |
·材料和方法 | 第45-47页 |
·疫苗和免疫 | 第45页 |
·攻毒 | 第45-46页 |
·阻断 ELISA | 第46页 |
·细胞免疫应答 | 第46-47页 |
·荧光定量 RT-PCR | 第47页 |
·结果 | 第47-50页 |
·CSFV 特异性抗体 | 第47页 |
·特异性淋巴细胞增殖 | 第47-49页 |
·攻毒保护 | 第49页 |
·攻毒后血液中的病毒含量 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-52页 |
第四章 腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗的构建及其免疫原性分析 | 第52-71页 |
·材料和方法 | 第54-59页 |
·载体、细胞、抗体、疫苗和主要试剂 | 第54页 |
·主要仪器设备 | 第54页 |
·转移载体 pShuttle-SFV-E2 的构建 | 第54-55页 |
·重组腺粒 pAdV-SFV-E2 的构建 | 第55页 |
·腺病毒/甲病毒复制子嵌合病毒的包装 | 第55-56页 |
·腺病毒/甲病毒复制子嵌合病毒的鉴定 | 第56-57页 |
·表达外源蛋白的比较 | 第57页 |
·嵌合病毒 rAdV-SFV-E2 诱导细胞凋亡 | 第57页 |
·猪体免疫效力评价 | 第57-59页 |
·结果 | 第59-69页 |
·外源基因的表达 | 第59-60页 |
·病毒粒子形态的比较 | 第60-61页 |
·E2 蛋白表达量的比较 | 第61页 |
·一步生长曲线 | 第61-62页 |
·诱导的细胞凋亡 | 第62-63页 |
·抗 CSFV 特异性抗体 | 第63-64页 |
·攻毒保护 | 第64-65页 |
·特异性淋巴细胞增殖及细胞因子的检测 | 第65-69页 |
·讨论 | 第69-71页 |
第五章 腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗的系统评价 | 第71-85页 |
·材料和方法 | 第72-75页 |
·疫苗、病毒 | 第72页 |
·免疫 | 第72-73页 |
·攻毒 | 第73页 |
·阻断 ELISA | 第73-74页 |
·荧光定量 RT-PCR | 第74页 |
·组织病理学检查 | 第74页 |
·腺病毒中和试验 | 第74-75页 |
·结果 | 第75-83页 |
·rAdV-SFV-E2 对靶动物及非靶动物安全 | 第75页 |
·6.25×105TCID50的免疫剂量能够完全保护猪抵抗强毒攻击 | 第75-77页 |
·rAdV-SFV-E2 免疫一次能够提供完全保护 | 第77-79页 |
·猪瘟母源抗体不影响 rAdV-SFV-E2 的免疫效果 | 第79-80页 |
·rAdV-SFV-E2 与伪狂犬病疫苗同时免疫互不干扰 | 第80-81页 |
·rAdV-SFV-E2 不诱导抗腺病毒的中和抗体 | 第81-82页 |
·BVDV 及 CSFV 抗体不影响 rAdV-SFV-E2 增殖 | 第82-83页 |
·讨论 | 第83-85页 |
第六章 全文结论 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
作者简历 | 第100页 |