| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写 | 第8-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 乳腺癌 | 第12-13页 |
| 1.1.1 概述 | 第12页 |
| 1.1.2 乳腺癌的分子表型 | 第12-13页 |
| 1.2 乳腺癌的转移—EMT过程 | 第13-19页 |
| 1.2.1 EMT的概述 | 第13-14页 |
| 1.2.2 EMT的分类 | 第14-16页 |
| 1.2.3 EMT相关信号通路 | 第16-18页 |
| 1.2.4 EMT研究现状 | 第18页 |
| 1.2.5 肿瘤转移后的治疗 | 第18-19页 |
| 1.3 转录因子-FOXP2 | 第19-21页 |
| 1.3.1 转录因子概述-Fox家族 | 第19页 |
| 1.3.2 FOXP2的结构 | 第19-20页 |
| 1.3.3 FOXP2的生物学功能和研究进展 | 第20-21页 |
| 1.4 本文章的研究目的和意义 | 第21-23页 |
| 第2章 FOXP2与乳腺癌EMT及生存预后的相关性分析 | 第23-37页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料和实验仪器 | 第23-25页 |
| 2.2.1 临床样本 | 第23-24页 |
| 2.2.2 实验细胞 | 第24页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-34页 |
| 2.3.1 临床样本的处理 | 第25页 |
| 2.3.2 细胞株复苏、培养和冻存 | 第25-27页 |
| 2.3.3 Western bloting(WB)实验 | 第27-30页 |
| 2.3.4 RNA的提取以及逆转录cDNA | 第30-32页 |
| 2.3.5 实时定量PCR(qRT-PCR) | 第32-33页 |
| 2.3.6 Transwell实验 | 第33页 |
| 2.3.7 统计分析 | 第33-34页 |
| 2.4 结果 | 第34-35页 |
| 2.4.1 FOXP2、E-cadherin和Vimentin在临床样本中表达的相关性以及生存分析 | 第34-35页 |
| 2.4.2 FOXP2与EMT研究体系的确定 | 第35页 |
| 2.5 小结 | 第35-37页 |
| 第3章 FOXP2高表达抑制MDA-MB-231细胞的间质表型和迁移 | 第37-44页 |
| 3.1 前言 | 第37页 |
| 3.2 实验材料和实验仪器 | 第37-40页 |
| 3.2.1 实验细胞 | 第37-38页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第38-39页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第39-40页 |
| 3.3 实验方法 | 第40-42页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第40页 |
| 3.3.2 pcDNA3.1-his-FOXP2重组质粒的大提 | 第40-41页 |
| 3.3.3 脂质体转染 | 第41-42页 |
| 3.3.4 Western bloting(WB)实验 | 第42页 |
| 3.3.5 荧光定量PCR | 第42页 |
| 3.3.6 Transwell实验 | 第42页 |
| 3.3.7 统计分析 | 第42页 |
| 3.4 结果和讨论 | 第42-43页 |
| 3.4.1 高表达FOXP2抑制MDA-MB-231细胞的间质表型和迁移能力 | 第42-43页 |
| 3.5 小结 | 第43-44页 |
| 第4章 干扰FOXP2促进MCF-7细胞的迁移、增殖和成瘤能力 | 第44-56页 |
| 4.1 前言 | 第44页 |
| 4.2 实验材料和实验试剂 | 第44-47页 |
| 4.2.1 实验细胞 | 第44-45页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第45-46页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第46-47页 |
| 4.3 实验方法 | 第47-52页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第47页 |
| 4.3.2 慢病毒的制备和感染 | 第47-50页 |
| 4.3.3 WB检测MCF-7中shFOXP2干扰效果 | 第50-51页 |
| 4.3.4 荧光定量PCR | 第51页 |
| 4.3.5 Transwell实验 | 第51页 |
| 4.3.6 MTT检测细胞增殖能力 | 第51页 |
| 4.3.7 平板克隆形成实验检测细胞的克隆形成率 | 第51页 |
| 4.3.8 统计分析 | 第51-52页 |
| 4.4 结果和讨论 | 第52-55页 |
| 4.4.1 慢病毒的构建和成功包装 | 第52-53页 |
| 4.4.2 沉默FOXP2表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的上皮表型 | 第53-54页 |
| 4.4.3 沉默FOXP2的表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖和成瘤能力 | 第54-55页 |
| 4.5 小结 | 第55-56页 |
| 结论和展望 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-66页 |
| 附录A 常用缓冲液和试剂配方 | 第66-67页 |
| 附录B 攻读学位期间发表的论文 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
