摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第1章 绪论 | 第14-27页 |
1.1 肿瘤代谢 | 第14-19页 |
1.1.1 瓦伯格效应-有氧糖酵解 | 第14-17页 |
1.1.2 肿瘤细胞代谢与线粒体功能变化 | 第17-19页 |
1.2 miRNA与肿瘤 | 第19-22页 |
1.2.1 miRNA的发现 | 第19-20页 |
1.2.2 miRNA生物发生及其作用机制 | 第20页 |
1.2.3 miRNA与肿瘤代谢 | 第20-21页 |
1.2.4 miR-199A简介 | 第21-22页 |
1.3 转录因子与肿瘤 | 第22-25页 |
1.3.1 转录因子简介 | 第22-23页 |
1.3.2 转录因子的结构 | 第23页 |
1.3.3 参与肿瘤代谢的转录因子 | 第23-25页 |
1.4 论文研究思路 | 第25-27页 |
第2章 miR-199a-3p对睾丸肿瘤细胞代谢的影响 | 第27-32页 |
2.1 前言 | 第27页 |
2.2 材料与方法 | 第27-30页 |
2.2.1 实验仪器 | 第27-28页 |
2.2.2 材料与试剂 | 第28页 |
2.2.3 实验方法 | 第28-30页 |
2.3 结果与讨论 | 第30-31页 |
2.3.1 miR-199A-3P对NTERA-2细胞葡萄糖摄取量和乳酸产量的影响 | 第30页 |
2.3.2 miR-199A-3P对NTERA-2细胞ROS水平的影响 | 第30-31页 |
2.3.3 miR-199A-3P对NTERA-2细胞ATP水平的影响 | 第31页 |
2.4 本章小结 | 第31-32页 |
第3章 miR-199a-3p靶向识别转录因子SP1 | 第32-43页 |
3.1 前言 | 第32页 |
3.2 材料与方法 | 第32-38页 |
3.2.1 仪器 | 第32-33页 |
3.2.2 材料 | 第33页 |
3.2.3 实验方法 | 第33-38页 |
3.3 结果与讨论 | 第38-42页 |
3.3.1 生物信息学分析SP1可能是MIR-199A-3P的靶基因 | 第38-39页 |
3.3.2 双荧光素酶报告基因实验分析SP1与MIR-199A-3P的靶向关系 | 第39-42页 |
3.4 本章小结 | 第42-43页 |
第4章 Sp1是miR-199a-3p调控睾丸肿瘤细胞代谢的功能靶基因 | 第43-52页 |
4.1 前言 | 第43页 |
4.2 材料与方法 | 第43-46页 |
4.2.1 仪器 | 第43-44页 |
4.2.2 材料与试剂 | 第44-45页 |
4.2.3 实验方法 | 第45-46页 |
4.3 结果与讨论 | 第46-50页 |
4.3.1 SP1对睾丸肿瘤细胞NTERA-2代谢的影响 | 第46-48页 |
4.3.2 PcDNA3.1-SP1表达载体构建 | 第48-49页 |
4.3.3 共转染对NTERA-2细胞葡萄糖摄取量和乳酸产量的影响 | 第49-50页 |
4.3.4 共转染对NTERA-2细胞ATP水平的影响 | 第50页 |
4.4 本章小结 | 第50-52页 |
第5章 miR-199a-3p/Sp1下游代谢基因的初步确定 | 第52-60页 |
5.1 前言 | 第52页 |
5.2 材料与方法 | 第52-57页 |
5.2.1 仪器 | 第52-53页 |
5.2.2 材料 | 第53页 |
5.2.3 实验方法 | 第53-57页 |
5.3 结果与讨论 | 第57-58页 |
5.3.1 SP1敲低对NTERA-2细胞糖代谢基因表达的影响 | 第57-58页 |
5.3.2 MIR-199A-3P过表达对LDHA蛋白表达水平的影响 | 第58页 |
5.3.3 SP1敲低对LDHA蛋白表达水平的影响 | 第58页 |
5.4 本章小结 | 第58-60页 |
结论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-69页 |
附录A 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |