| 中文摘要 | 第4-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 缩略词 | 第13-14页 |
| 1 绪论 | 第14-22页 |
| 1.1 引言 | 第14-15页 |
| 1.2 研究背景 | 第15-18页 |
| 1.2.1 莱氏野村菌概况 | 第15页 |
| 1.2.2 微菌核研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2.3 HOG通路相关基因研究 | 第16-18页 |
| 1.3 研究目的 | 第18页 |
| 1.4 研究内容 | 第18-20页 |
| 1.5 技术路线 | 第20页 |
| 1.6 本研究的创新之处 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1 菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 昆虫 | 第22页 |
| 2.1.3 载体 | 第22页 |
| 2.1.4 主要试剂及试剂盒 | 第22-23页 |
| 2.1.5 主要培养基配制方法 | 第23页 |
| 2.1.6 主要实验溶液配制方法 | 第23-24页 |
| 2.1.7 主要设备 | 第24-25页 |
| 2.2 主要实验方法 | 第25-46页 |
| 2.2.1 菌株活化及扩大培养 | 第25页 |
| 2.2.2 真菌基因组DNA微量提取 | 第25-26页 |
| 2.2.3 真菌总RNA提取 | 第26页 |
| 2.2.4 第一链cDNA的反转录合成 | 第26-27页 |
| 2.2.5 Nrssk1和Nrpbs2基因在微菌核诱导过程中的表达模式分析 | 第27-28页 |
| 2.2.6 基因克隆 | 第28-30页 |
| 2.2.7 FPNI-PCR扩增基因侧翼序列 | 第30-34页 |
| 2.2.8 Nrssk1和Nrpbs2的生物信息学分析 | 第34页 |
| 2.2.9 构建Nrssk1和Nrpbs2基因的敲除载体 | 第34-37页 |
| 2.2.10 敲除质粒载体的农杆菌转化 | 第37-38页 |
| 2.2.11 构建Nrssk1和Nrpbs2基因的突变菌株 | 第38-41页 |
| 2.2.12 敲除突变菌株的形态学变化分析 | 第41页 |
| 2.2.13 敲除突变菌株生长及产孢能力测定 | 第41-42页 |
| 2.2.14 突变菌株应对环境压力胁迫的研究 | 第42-43页 |
| 2.2.15 突变菌株对微菌核诱导及相关基因表达量的影响 | 第43页 |
| 2.2.16 突变菌株的毒力测定 | 第43-44页 |
| 2.2.17 数据分析 | 第44-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-68页 |
| 3.1 Nrssk1和Nrpbs2基因克隆与生物信息学分析 | 第46-52页 |
| 3.1.1 Nrssk1和Nrpbs2基因克隆 | 第46-47页 |
| 3.1.2 Nrssk1和Nrpbs2基因的生物信息学分析 | 第47-49页 |
| 3.1.3 同源比对及系统进化分析 | 第49-52页 |
| 3.2 Nrssk1和Nrpbs2基因在微菌核诱导过程中的表达模式 | 第52-53页 |
| 3.3 敲除载体的构建及突变菌株的筛选 | 第53-56页 |
| 3.3.1 敲除载体的构建 | 第53-54页 |
| 3.3.2 突变菌株的筛选 | 第54-56页 |
| 3.4 突变菌株的表型变化分析 | 第56-68页 |
| 3.4.1 突变菌株基本生长情况 | 第56-58页 |
| 3.4.2 突变菌株在环境压力胁迫下的生长情况 | 第58-63页 |
| 3.4.3 突变菌株的微菌核诱导及基因表达水平 | 第63-65页 |
| 3.4.4 毒力测定 | 第65-68页 |
| 4 讨论 | 第68-72页 |
| 4.1 莱氏野村菌群的“群体效应” | 第68页 |
| 4.2 Nrpbs2是莱氏野村菌正常生长所必须的 | 第68-69页 |
| 4.3 Nrssk1、Nrpbs2与HOG通路 | 第69-70页 |
| 4.4 Nrssk1、Nrpbs2对微菌核发育的影响 | 第70页 |
| 4.5 Nrssk1、Nrpbs2影响莱氏野村菌毒力 | 第70-72页 |
| 5 主要结论与后续工作 | 第72-74页 |
| 5.1 主要结论 | 第72页 |
| 5.2 后续工作建议 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 附录 | 第84-88页 |
| A. 作者在攻读硕士学位期间发表论文 | 第84页 |
| B. 作者在攻读硕士学位期间参与的科研项目 | 第84页 |
| C. Nrssk1和Nrpbs2全长cDNA序列 | 第84-87页 |
| D. 蛋白质序列名称及NCBI登录号 | 第87-88页 |
