| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第11-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-56页 |
| 1 引言 | 第18页 |
| 2 基因治疗 | 第18-27页 |
| 2.1 肿瘤基因治疗 | 第19-20页 |
| 2.2 高分子基因传递系统 | 第20-26页 |
| 2.2.1 基于聚赖氨酸(PLL)的基因载体 | 第21页 |
| 2.2.2 基于聚乙烯亚胺(PEI)的基因载体 | 第21-22页 |
| 2.2.3 多糖类基因载体 | 第22-25页 |
| 2.2.4 其他 | 第25-26页 |
| 2.3 基因传递过程中的屏障 | 第26-27页 |
| 3 高分子药物递送系统 | 第27-38页 |
| 3.1 概述 | 第27-29页 |
| 3.2 刺激响应型高分子药物载体 | 第29-38页 |
| 3.2.1 温度响应型药物载体 | 第29-30页 |
| 3.2.2 磁场响应型药物载体 | 第30-31页 |
| 3.2.3 超声响应型药物载体 | 第31-32页 |
| 3.2.4 光响应型药物载体 | 第32-33页 |
| 3.2.5 电场响应型药物载体 | 第33-34页 |
| 3.2.6 pH响应型药物载体 | 第34-36页 |
| 3.2.7 还原响应型药物载体 | 第36-37页 |
| 3.2.8 酶响应型药物载体 | 第37-38页 |
| 4 基因药物联合治疗 | 第38-40页 |
| 5 选题思路 | 第40-43页 |
| 参考文献 | 第43-56页 |
| 第二章 线性-超支化聚阳离子高分子作为高效基因载体的研究 | 第56-82页 |
| 1 前言 | 第56-57页 |
| 2 实验部分 | 第57-62页 |
| 2.1 试剂 | 第57-58页 |
| 2.2 聚乙二醇单甲醚-超支化聚甘油(mPEG-HPG)的合成 | 第58页 |
| 2.3 聚乙二醇单甲醚-超支化聚甘油-接枝-三(2-氨基乙基)胺(mPEG-HPG-g-TAEA)的合成 | 第58页 |
| 2.4 细胞培养与质粒DNA的分离纯化 | 第58-59页 |
| 2.5 载体/DNA复合物的制备 | 第59页 |
| 2.6 凝胶电泳 | 第59页 |
| 2.7 复合物粒径和电势的测定 | 第59页 |
| 2.8 透射电镜观测 | 第59-60页 |
| 2.9 缓冲能力的测定 | 第60页 |
| 2.10 体外转染实验 | 第60页 |
| 2.11 激光共聚焦显微镜观测 | 第60-61页 |
| 2.12 肝素钠置换实验 | 第61页 |
| 2.13 蛋白吸附 | 第61页 |
| 2.14 体外细胞毒性 | 第61-62页 |
| 2.15 统计学分析 | 第62页 |
| 3 结果与讨论 | 第62-76页 |
| 3.1 mPEG-HPG-g-TAEA的合成与表征 | 第62-65页 |
| 3.2 凝胶电泳 | 第65-66页 |
| 3.3 复合物的粒径与zeta电势测定 | 第66-67页 |
| 3.4 复合物形态观测 | 第67-68页 |
| 3.5 缓冲能力 | 第68-69页 |
| 3.6 体外转染 | 第69-71页 |
| 3.7 外加氯喹对转染的影响 | 第71页 |
| 3.8 细胞内吞 | 第71-73页 |
| 3.9 肝素钠置换实验 | 第73-74页 |
| 3.10 蛋白吸附 | 第74-75页 |
| 3.11 体外细胞毒性 | 第75-76页 |
| 4 结论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-82页 |
| 第三章 胆固醇修饰的基于硼酸酯的pH敏感纳米载药系统的构建 | 第82-104页 |
| 1 前言 | 第82-84页 |
| 2 实验部分 | 第84-89页 |
| 2.1 试剂 | 第84页 |
| 2.2 苄氧羰基保护的赖氨酸-N-羧基-环内酸酐(Lys(Z)-NCA)的合成 | 第84页 |
| 2.3 聚乙二醇单甲醚-聚赖氨酸(mPEG-PLL)的合成 | 第84-85页 |
| 2.4 聚乙二醇单甲醚-聚赖氨酸-接枝-3-(2,4-二羟基苯基)丙酸(mPEG-PLL-g-DHPA)的合成 | 第85页 |
| 2.5 胆固醇修饰的苯硼酸(Chol-PBA)的合成 | 第85页 |
| 2.6 mPEG-PLL-g-DHPA/Chol-PBA(MPDP)组装体的制备 | 第85页 |
| 2.7 产物表征 | 第85-86页 |
| 2.8 荧光竞争法检测mPEG-PLL-g-DHPA与Chol-PBA的结合 | 第86页 |
| 2.9 纳米组装体pH敏感性的表征 | 第86-87页 |
| 2.10 药物包载与pH敏感的释药行为 | 第87页 |
| 2.11 体外细胞毒性 | 第87-88页 |
| 2.12 激光共聚焦显微镜观测 | 第88页 |
| 2.13 流式细胞检测 | 第88页 |
| 2.14 统计学分析 | 第88-89页 |
| 3 结果与讨论 | 第89-98页 |
| 3.1 载体材料的合成与表征 | 第89-92页 |
| 3.2 纳米组装体pH敏感性的表征 | 第92-94页 |
| 3.3 药物包载与pH敏感的释药行为 | 第94-95页 |
| 3.4 体外细胞毒性 | 第95页 |
| 3.5 细胞内吞与外加胆固醇的抑制 | 第95-97页 |
| 3.6 外加NH_4Cl对内涵体酸化过程的影响 | 第97-98页 |
| 4 结论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-104页 |
| 第四章 利用苯硼酸与主客体作用组装构建基因-药物纳米共载控释体系 | 第104-130页 |
| 1 前言 | 第104-105页 |
| 2 实验部分 | 第105-110页 |
| 2.1 试剂 | 第105-106页 |
| 2.2 载体材料PEI1.8K-PB_(2.9)-γ-CDs的合成 | 第106页 |
| 2.3 细胞培养与质粒DNA的分离纯化 | 第106页 |
| 2.4 载体/DNA复合物的制备 | 第106-107页 |
| 2.5 凝胶电泳 | 第107页 |
| 2.6 复合物粒径和电势的测定 | 第107页 |
| 2.7 透射电镜观测 | 第107页 |
| 2.8 体外细胞毒性 | 第107页 |
| 2.9 荧光素酶的检测 | 第107页 |
| 2.10 荧光蛋白的表达 | 第107-108页 |
| 2.11 流式细胞检测 | 第108页 |
| 2.12 蛋白吸附 | 第108页 |
| 2.13 药物包载 | 第108-109页 |
| 2.14 激光共聚焦显微镜观测 | 第109页 |
| 2.15 体外释药行为 | 第109页 |
| 2.16 载药后的体外转染 | 第109页 |
| 2.17 统计学分析 | 第109-110页 |
| 3 结果与讨论 | 第110-123页 |
| 3.1 载体材料PEI1.8K-PB_(2.9)-γ-CD的合成与结构表征 | 第110-111页 |
| 3.2 载体材料的生理化学性质表征 | 第111-112页 |
| 3.3 体外细胞毒性 | 第112-113页 |
| 3.4 无血清条件下的转染 | 第113-114页 |
| 3.5 血清条件下的转染 | 第114-117页 |
| 3.6 细胞内吞与蛋白吸附 | 第117-119页 |
| 3.7 药物包载与pH敏感的释药行为 | 第119-121页 |
| 3.8 药物包载对转染的影响 | 第121-123页 |
| 4 结论 | 第123-124页 |
| 参考文献 | 第124-130页 |
| 第五章 两亲性聚阳离子囊泡组装体用于基因和药物共传递的初步研究 | 第130-150页 |
| 1 前言 | 第130-131页 |
| 2 实验部分 | 第131-135页 |
| 2.1 试剂 | 第131页 |
| 2.2 环糊精接枝超支化聚甘油(CD-HPG)的合成 | 第131-132页 |
| 2.3 末端氨基化的CD-HPG-TAEA的合成 | 第132页 |
| 2.4 金刚烷修饰的十八烷基链(C_(18)-AD)的合成 | 第132页 |
| 2.5 聚阳离子囊泡C_(18)-AD/CD-HPG-TAEA的构建 | 第132-133页 |
| 2.6 细胞培养与质粒DNA的分离纯化 | 第133页 |
| 2.7 载体/DNA复合物的制备 | 第133页 |
| 2.8 凝胶电泳 | 第133页 |
| 2.9 复合物粒径和电势的测定 | 第133页 |
| 2.10 透射电镜观测 | 第133页 |
| 2.11 体外细胞毒性 | 第133-134页 |
| 2.12 体外转染实验 | 第134页 |
| 2.13 药物包载与pH敏感的释药行为 | 第134页 |
| 2.14 激光共聚焦显微镜观测 | 第134页 |
| 2.15 流式细胞检测 | 第134-135页 |
| 2.16 载药后的体外转染 | 第135页 |
| 2.17 统计学分析 | 第135页 |
| 3 结果与讨论 | 第135-145页 |
| 3.1 超分子组装体C_(18)-AD/CD-HPG-TAEA的合成与表征 | 第135-138页 |
| 3.2 凝胶电泳 | 第138页 |
| 3.3 复合物的粒径与zeta电势测定 | 第138-139页 |
| 3.4 透射电镜观测 | 第139-140页 |
| 3.5 体外细胞毒性 | 第140页 |
| 3.6 体外转染 | 第140-142页 |
| 3.7 细胞内吞 | 第142-143页 |
| 3.8 药物包载与pH敏感的释药行为 | 第143-145页 |
| 3.9 药物包载对转染的影响 | 第145页 |
| 4 结论 | 第145-147页 |
| 参考文献 | 第147-150页 |
| 第六章 通过模板-模块组装的新方式构建具有穿膜功能的低分子量基因载体 | 第150-166页 |
| 1 前言 | 第150-151页 |
| 2 实验部分 | 第151-154页 |
| 2.1 试剂 | 第151-152页 |
| 2.2 β-环糊精-三(2-氨基乙基)胺(CD-TAEA)的合成 | 第152页 |
| 2.3 金刚烷修饰的苯硼酸(PB-AD)的合成 | 第152页 |
| 2.4 超分子组装体PB-AD/CD-TAEA的构建 | 第152页 |
| 2.5 细胞培养与质粒DNA的分离纯化 | 第152页 |
| 2.6 载体/DNA复合物的制备 | 第152-153页 |
| 2.7 凝胶电泳及缓冲能力的测定 | 第153页 |
| 2.8 复合物粒径和电势的测定 | 第153页 |
| 2.9 透射电镜观测 | 第153页 |
| 2.10 激光共聚焦显微镜观测 | 第153页 |
| 2.11 流式细胞检测 | 第153页 |
| 2.12 体外细胞毒性 | 第153-154页 |
| 2.13 体外转染实验 | 第154页 |
| 2.14 统计学分析 | 第154页 |
| 3 结果与讨论 | 第154-161页 |
| 3.1 超分子组装体PB-AD/CD-TAEA的合成与表征 | 第154-156页 |
| 3.2 凝胶电泳及缓冲能力 | 第156-157页 |
| 3.3 复合物的粒径与zeta电势测定 | 第157-158页 |
| 3.4 复合物形态观测 | 第158页 |
| 3.5 细胞内吞 | 第158-159页 |
| 3.6 体外毒性测试 | 第159-160页 |
| 3.7 体外转染 | 第160-161页 |
| 4 结论 | 第161-163页 |
| 参考文献 | 第163-166页 |
| 全文总结 | 第166-168页 |
| 附录 作者在攻读博士学位期间已发表和待发表的论文 | 第168-170页 |
| 致谢 | 第170页 |
