| 中文摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 英汉缩略词对照表 | 第11-12页 |
| 1 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 课题研究背景 | 第12-14页 |
| 1.2 酶的固定化 | 第14-18页 |
| 1.2.1 固定化酶的制备方法 | 第14-16页 |
| 1.2.2 固定化酶的载体 | 第16-17页 |
| 1.2.3 固定化酶的工业应用 | 第17-18页 |
| 1.3 科学问题的提出及研究意义 | 第18-19页 |
| 1.4 主要研究内容 | 第19-20页 |
| 1.5 技术路线 | 第20-22页 |
| 2 载体的修饰与表征 | 第22-30页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第22-23页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第23页 |
| 2.3 实验方法与步骤 | 第23-24页 |
| 2.3.1 氨基-环氧基树脂的制备 | 第23页 |
| 2.3.2 氨基-环氧基树脂的表征 | 第23-24页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第24-28页 |
| 2.4.1 红外吸收光谱（FT-IR） | 第24-25页 |
| 2.4.2 扫描电镜（SEM） | 第25-26页 |
| 2.4.3 氨基修饰密度随时间的变化 | 第26页 |
| 2.4.4 Zeta电位表征 | 第26-27页 |
| 2.4.5 接触角（CA） | 第27-28页 |
| 2.5 本章小结 | 第28-30页 |
| 3 7α-HSDH和 7β-HSDH的制备及固定化研究 | 第30-44页 |
| 3.1 引言 | 第30页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第30-32页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第31-32页 |
| 3.3 实验方法与步骤 | 第32-35页 |
| 3.3.1 7α-HSDH和 7β-HSDH的表达及纯化 | 第32页 |
| 3.3.2 游离酶蛋白浓度测定 | 第32-33页 |
| 3.3.3 游离酶酶活的检测 | 第33页 |
| 3.3.4 7α-HSDH和 7β-HSDH的固定化 | 第33-34页 |
| 3.3.5 固定化条件的优化 | 第34-35页 |
| 3.3.6 固定化 7α-HSDH和 7β-HSDH的酶活测定 | 第35页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第35-42页 |
| 3.4.1 7α-HSDH和 7β-HSDH的制备 | 第35-36页 |
| 3.4.2 不同EDA修饰密度的氨基-环氧基树脂对 7α-HSDH和 7β-HSDH的固定 | 第36-37页 |
| 3.4.3 环氧基树脂与氨基-环氧基树脂固定化酶的活性比较 | 第37-39页 |
| 3.4.4 固定化条件的优化 | 第39-42页 |
| 3.5 本章小结 | 第42-44页 |
| 4 固定化酶的性质研究 | 第44-54页 |
| 4.1 引言 | 第44页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第44-45页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第44页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第44-45页 |
| 4.3 实验方法与步骤 | 第45-47页 |
| 4.3.1 最适反应条件 | 第45-46页 |
| 4.3.2 米氏常数的测定 | 第46页 |
| 4.3.3 热稳定性 | 第46页 |
| 4.3.4 操作稳定性 | 第46-47页 |
| 4.3.5 贮藏稳定性 | 第47页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第47-52页 |
| 4.4.1 最适反应条件 | 第47-48页 |
| 4.4.2 米氏常数的测定 | 第48-49页 |
| 4.4.3 热稳定性 | 第49-50页 |
| 4.4.4 操作稳定性 | 第50-51页 |
| 4.4.5 贮藏稳定性 | 第51-52页 |
| 4.5 本章小结 | 第52-54页 |
| 5 7α-HSDH和 7β-HSDH双酶共固定转化体系的建立 | 第54-64页 |
| 5.1 引言 | 第54页 |
| 5.2 实验材料与仪器 | 第54-55页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第54-55页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第55页 |
| 5.3 实验方法与步骤 | 第55-58页 |
| 5.3.1 HPLC-ELSD检测 | 第55-56页 |
| 5.3.2 7α-HSDH和 7β-HSDH共固定 | 第56-58页 |
| 5.3.3 底物浓度优化 | 第58页 |
| 5.3.4 辅酶浓度优化 | 第58页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第58-62页 |
| 5.4.1 HPLC-ELSD检测 | 第58-59页 |
| 5.4.2 酶的固定化顺序对转化结果的影响 | 第59页 |
| 5.4.3 双酶比例对转化结果的影响 | 第59-60页 |
| 5.4.4 底物浓度的优化 | 第60-61页 |
| 5.4.5 辅酶浓度的优化 | 第61-62页 |
| 5.5 本章小结 | 第62-64页 |
| 6 全文总结及后续工作建议 | 第64-66页 |
| 6.1 全文总结 | 第64-65页 |
| 6.2 后续工作建议 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-78页 |
| 附录 | 第78页 |
| A. 攻读硕士学位期间研究成果 | 第78页 |
| B. 攻读硕士学位期间参与的科研项目 | 第78页 |
