| 中文摘要 | 第10-11页 |
| 英文摘要 | 第11页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 蝎毒素的组成 | 第12页 |
| 1.2 蝎毒素的分类 | 第12-14页 |
| 1.3 蝎毒素的药用研究概况 | 第14-17页 |
| 1.4 蝎毒素在毕赤酵母中表达概况 | 第17-18页 |
| 1.5 毕赤酵母表达系统简介 | 第18-21页 |
| 1.6 立体依据 | 第21-22页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第22-32页 |
| 2.1 实验材料,仪器和试剂 | 第22-25页 |
| 2.1.1 细菌、质粒和实验动物 | 第22页 |
| 2.1.2 主要生化试剂和材料 | 第22页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要溶液的配置 | 第23-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-32页 |
| 2.2.1 PCR | 第25-26页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
| 2.2.3 DNA片段回收 | 第26-27页 |
| 2.2.4 DNA酶切和连接 | 第27页 |
| 2.2.5 用氯化锰制备大肠杆菌感受态细胞 | 第27页 |
| 2.2.6 热转化大肠杆菌感受态细胞 | 第27-28页 |
| 2.2.7 质粒的小量制备 | 第28页 |
| 2.2.8 大肠杆菌重组子的鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.9 毕赤酵母电转化方法 | 第29页 |
| 2.2.10 酵母重组子的诱导表达 | 第29-30页 |
| 2.2.11 SDS-PAGE | 第30-31页 |
| 2.2.12 三氯醋酸法沉淀蛋白 | 第31-32页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第32-49页 |
| 3.1 表达质粒的构建 | 第32-41页 |
| 3.1.1 表达质粒pPIC9K-AGAP的构建 | 第32-36页 |
| 3.1.2 中间载体pPIC6K-AGAP'的构建 | 第36-38页 |
| 3.1.3 表达质粒pPIC9K-AGAP'的构建 | 第38-41页 |
| 3.2 AGAP毕赤酵母重组子的制备 | 第41-47页 |
| 3.2.1 pPIC9K-AGAP电转化毕赤酵母 | 第41-42页 |
| 3.2.2 pPIC9K-AGAP'电转化毕赤酵母 | 第42页 |
| 3.2.3 筛选高表达重组子及诱导表达 | 第42-47页 |
| 3.4 讨论 | 第47-49页 |
| 全文结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
