中文摘要 | 第6-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
符号说明 | 第12-14页 |
前言 | 第14-16页 |
第一部分 真核表达质粒pTARGETim-1HA的构建及特异性抑制Tim-1表达的siRNA表达质粒的构建 | 第16-43页 |
前言 | 第16-17页 |
1 材料 | 第17-23页 |
1.1 质粒与菌种 | 第17页 |
1.2 细胞 | 第17-18页 |
1.3 主要试剂 | 第18页 |
1.4 PCR引物和siRNA设计与合成 | 第18-20页 |
1.5 其他试剂 | 第20-22页 |
1.6 主要实验仪器 | 第22-23页 |
2 方法 | 第23-36页 |
2.1 表达Tim-1HA融合蛋白重组子的构建 | 第23-29页 |
2.2 真核表达载体pTARGETim-1HA体外表达研究 | 第29-32页 |
2.3 pAVU6+27 siRNA表达质粒的构建 | 第32-34页 |
2.4 pAVU6+27siRNA表达质粒对Tim-1抑制作用的研究 | 第34-36页 |
3 结果 | 第36-38页 |
3.1 表达Tim-1HA融合蛋白重组子的构建 | 第36页 |
3.2 真核表达载体pTARGETim-1HA体外表达研究 | 第36-37页 |
3.3 pAVU6+27 siRNA表达质粒的构建 | 第37-38页 |
3.4 pAVU6+27 siRNA表达质粒显著抑制Tim-1表达 | 第38页 |
讨论 | 第38-43页 |
第二部分 Tim家族分子在小鼠肝炎模型中表达的初步研究 | 第43-51页 |
前言 | 第43-44页 |
1 材料 | 第44页 |
1 材料 | 第44-45页 |
1.1 实验动物及来源 | 第44页 |
1.2 主要试剂 | 第44页 |
1.3 PCR引物 | 第44-45页 |
1.4 主要实验仪器 | 第45页 |
2 方法 | 第45-47页 |
2.1 小鼠ConA急性肝炎模型的制备 | 第45页 |
2.2 测定小鼠血清ALT值 | 第45-46页 |
2.3 小鼠肝组织HE染色 | 第46-47页 |
2.4 实时定量PCR测定Tim-1,Tim-2和Tim-3表达情况 | 第47页 |
3 结果 | 第47-48页 |
3.1 测定小鼠血清ALT水平 | 第47-48页 |
3.2 小鼠肝组织病理改变 | 第48页 |
3.3 实时定量PCR测定ConA小鼠急性肝炎模型中Tim-1、Tim-2和Tim-3的表达 | 第48页 |
3.4 实时定量PCR测定HBV转基因小鼠中Tim-2和Tim-3的表达 | 第48页 |
讨论 | 第48-51页 |
小结 | 第51页 |
展望 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
附图 | 第56-66页 |
附录 | 第66-68页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第70页 |