摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词 | 第11-14页 |
第一章 引言 | 第14-24页 |
·靶向白血病干细胞治疗进展 | 第14-19页 |
·前言 | 第14-16页 |
·白血病干细胞的表型特征 | 第16-18页 |
·LSC 的靶向治疗 | 第18-19页 |
·基于提高腺病毒靶向性的改造策略 | 第19-23页 |
·课题来源 | 第23页 |
·实验目的和意义 | 第23页 |
·创新点 | 第23页 |
·实验方案 | 第23-24页 |
第二章 溶瘤腺病毒Ad.sp-E1A-sCAR-IL-3 构建及鉴定 | 第24-54页 |
·实验材料 | 第24-28页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·主要质粒、菌株及细胞株 | 第24-25页 |
·主要实验仪器 | 第25-26页 |
·主要溶液配制 | 第26-27页 |
·引物的设计与合成 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-47页 |
·质粒pAd.sp-sCAR-IL-3 的构建步骤及方法 | 第28-41页 |
·病毒Ad.sp-E1A-sCAR-IL-3 的包装、纯化、鉴定、大量扩增及滴度测定 | 第41-47页 |
·实验结果 | 第47-54页 |
·质粒载体pXC2.sp-sCAR-IL-3 的构建及鉴定结果 | 第47-51页 |
·重组目的病毒Ad.sp-E1A-sCAR-IL-3 鉴定 | 第51-54页 |
第三章 溶瘤腺病毒杀伤白血病干细胞的体外研究 | 第54-68页 |
·实验材料 | 第54-55页 |
·细胞株 | 第54页 |
·病毒 | 第54页 |
·主要仪器设备 | 第54-55页 |
·实验方法 | 第55-58页 |
·融合蛋白sCAR-IL-3 的原核表达 | 第55页 |
·Western blot | 第55-57页 |
·KG-1 细胞表型分析 | 第57页 |
·MTT 法检测细胞存活率 | 第57页 |
·凋亡细胞染色实验:Hochst 33342 染色 | 第57-58页 |
·电镜观察 | 第58页 |
·统计学分析 | 第58页 |
·实验结果 | 第58-68页 |
·KG-1 细胞表型分析 | 第58-59页 |
·融合蛋白原核表达SDS-PAGE 鉴定 | 第59-60页 |
·融合蛋白sCAR-IL-3 显著提高溶瘤腺病毒杀伤能力 | 第60-62页 |
·重组病毒E1A 蛋白及所携带基因在KG-1 细胞中高效表达 | 第62-63页 |
·电镜观察溶瘤腺病毒高效侵染KG-1 细胞 | 第63页 |
·Ad.sp-E1A-sCAR-IL-3 显著抑制KG-1 增殖 | 第63-64页 |
·重组病毒可以有效诱导KG-1 细胞凋亡 | 第64-65页 |
·电镜观察溶瘤腺病毒诱导KG-1 细胞凋亡 | 第65-66页 |
·Western blot 检测凋亡相关蛋白的表达 | 第66页 |
·溶瘤腺病毒Ad.sp-E1A-sCAR-IL-3 对正常细胞的安全性 | 第66-68页 |
讨论 | 第68-70页 |
结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-75页 |
附录 Ad.sp-sCAR-IL-3 的构建示意图 | 第75-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
硕士研究生期间发表论文 | 第78-79页 |
硕士研究生期间参与项目与奖励 | 第79页 |