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江豚的增殖诱导配体(APRIL)基因和γ-IFN诱导的溶酶体巯基还原酶(GILT)基因的克隆、表达及生物学功能研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
绪论第5-9页
第一章 增殖诱导配体(APRIL)的研究进展第9-14页
    1.1 TNF的简介第9页
    1.2 APRIL的发现及命名第9页
    1.3 APRIL的结构特点第9-11页
        1.3.1 APRIL的基因结构特点第9-10页
        1.3.2 APRIL的蛋白结构特点第10页
        1.3.3 APRIL的转录加工第10页
        1.3.4 APRIL的表达分布第10页
        1.3.5 APRIL的受体第10-11页
        1.3.6 APRIL的信号转导途径第11页
    1.4 APRIL的生物学功能第11-13页
        1.4.1 APRIL对B细胞的功能第11-12页
        1.4.2 APRIL对T细胞的功能第12页
        1.4.3 APRIL对体液免疫的作用第12-13页
        1.4.4 APRIL对肿瘤细胞的作用第13页
    1.5 展望第13-14页
第二章 γ-干扰素诱导的溶酶体巯基还原酶(GILT)的研究进展第14-17页
    2.1 哺乳动物中干扰素的简介第14页
    2.2 GILT的发现及活性特征第14-15页
    2.3 GILT的分子特征第15页
    2.4 GILT的表达分布第15页
    2.5 GILT的研究概况,水平和发展趋势第15-17页
第三章 关于江豚的介绍第17-18页
第四章 江豚APRIL的克隆、表达、纯化以及生物活性鉴定第18-37页
    4.1 实验材料第18-19页
        4.1.1 实验动物,质粒和宿主菌第18页
        4.1.2 试剂与耗材第18页
        4.1.3 实验仪器第18-19页
    4.2 实验方法第19-28页
        4.2.1 血液样品总RNA的提取第19页
        4.2.2 江豚APRIL基因的克隆第19-23页
        4.2.3 生物信息学分析第23-24页
        4.2.4 原核表达载体的构建第24-26页
        4.2.5 重组pET-43.1a-FsAPRIL的表达、鉴定及纯化第26-27页
        4.2.6 重组蛋白的生物学活性检测第27-28页
    4.3 实验结果与分析第28-35页
        4.3.1 江豚全长APRIL(FAPRIL)cDNA序列及对应氨基酸序列第28-29页
        4.3.2 多重序列比对分析第29-31页
        4.3.3 蛋白质的三维结构模型第31页
        4.3.4 系统进化分析第31-33页
        4.3.5 pET-43.1a-fsAPRIL重组蛋白的表达与纯化分析第33页
        4.3.6 fsAPRIL蛋白对小鼠淋巴细胞的促存活作用第33-34页
        4.3.7 fsAPRIL蛋白对小鼠淋巴细胞的结合作用分析 26第34-35页
    4.4 讨论部分第35-37页
第五章 江豚γ-干扰素诱导的溶酶体巯基还原酶(GILT)的克隆,表达和活性分析第37-48页
    5.1 实验材料第37页
    5.2 实验方法第37-41页
        5.2.1 血液样本总RNA的提取和逆转录第37页
        5.2.2 江豚GILT基因的克隆第37-39页
        5.2.3 生物信息学分析第39页
        5.2.4 原核表达载体的构建第39-40页
        5.2.5 重组蛋白的表达及纯化第40页
        5.2.6 体外巯基还原酶活性的检测第40-41页
    5.3 结果与分析第41-45页
        5.3.1 FpGILT cDNA序列的鉴定与特征第41-42页
        5.3.2 多重序列比对分析第42-43页
        5.3.3 进化树分析第43-45页
    5.4 pET28a-FpsGILT重组蛋白的表达纯化分析第45-46页
    5.5 巯基还原酶活性分析第46页
    5.6 讨论部分第46-48页
参考文献第48-54页
在读期间发表的学术论文及研究成果第54-55页
致谢第55页

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