中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写词表 | 第8-11页 |
第一章 前言 | 第11-21页 |
1.1 肿瘤的基因治疗 | 第11-12页 |
1.2 TRAIL 治疗基因 | 第12-16页 |
1.3 非病毒载体 | 第16-20页 |
1.3.1 阳离子脂质体载体 | 第16-17页 |
1.3.2 聚乙烯亚胺(polyethylenimine, PEI) | 第17-18页 |
1.3.3 核定位肽 | 第18-19页 |
1.3.4 叶酸 | 第19-20页 |
1.4 立题依据及实验设计 | 第20-21页 |
第二章 实验材料与方法 | 第21-31页 |
2.1 实验材料、试剂、仪器 | 第21-23页 |
2.1.1 实验细胞、菌株、质粒 | 第21页 |
2.1.2 主要试剂、材料 | 第21-22页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-31页 |
2.2.1 质粒 DNA 的转化、提取、质量检测 | 第23页 |
2.2.2 细胞的复苏、培养、冻存 | 第23-24页 |
2.2.3 细胞凋亡检测 | 第24-25页 |
2.2.4 细胞表面 TRAIL 受体检测 | 第25页 |
2.2.5 NLS/DNA 复合物的制备 | 第25页 |
2.2.6 复合物粒径及电位的测定 | 第25-26页 |
2.2.7 琼脂糖凝胶电泳实验 | 第26页 |
2.2.8 lipo2000/NLS/DNA 复合物的制备 | 第26页 |
2.2.9 PEI/NLS/DNA 的制备 | 第26页 |
2.2.10 体外细胞转染效率考察 | 第26-27页 |
2.2.11 细胞毒性检测 | 第27-28页 |
2.2.12 PEI/DNA 复合物的制备 | 第28页 |
2.2.13 阳离子脂质体/PEI/DNA 复合物的制备 | 第28页 |
2.2.14 PEIlip 的制备 | 第28-29页 |
2.2.15 PEIlip/NLS/DNA 的制备 | 第29页 |
2.2.16 细胞表面叶酸受体检测 | 第29-30页 |
2.2.17 荧光叶酸脂质体的制备及考察 | 第30页 |
2.2.18 叶酸脂质体的制备及性质考察 | 第30页 |
2.2.19 叶酸脂质体/PEI/NLS/DNA 复合物的制备 | 第30页 |
2.2.20 统计学分析 | 第30-31页 |
第三章 结果与讨论 | 第31-50页 |
3.1 TRAIL 基因对鼻咽癌细胞的促凋亡作用考察 | 第31-34页 |
3.1.1 CNE、HNE-1 细胞膜表面 TRAIL 受体的检测 | 第31-32页 |
3.1.2 TRAIL 基因对 CNE 细胞的促凋亡作用评价 | 第32-34页 |
3.2 NLS 的促转染作用 | 第34-40页 |
3.2.1 NLS/DNA 复合物的性质及制备考察 | 第34-35页 |
3.2.2 NLS 对 PEI/DNA 的促转染作用 | 第35-38页 |
3.2.3 NLS 对 lipo2000/DNA 的促转染作用 | 第38-39页 |
3.2.4 小结 | 第39-40页 |
3.3 阳离子脂质体与 PEI 复合载体制备方法改进及性质考察 | 第40-45页 |
3.3.1 N/P 的影响 | 第40-41页 |
3.3.2 超声与过膜处理对 PEIlip/DNA 复合物的影响 | 第41-43页 |
3.3.3 两种方法制备三元复合物性质比较 | 第43-44页 |
3.3.5 小结 | 第44-45页 |
3.4 叶酸修饰复合物对鼻咽癌细胞的靶向作用 | 第45-50页 |
3.4.1 细胞表面叶酸受体 ELLSA 检测 | 第45页 |
3.4.2 叶酸脂质体的靶向作用 | 第45-47页 |
3.4.3 叶酸修饰三元复合载体的靶向性 | 第47-49页 |
3.4.4 小结 | 第49-50页 |
全文总结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
作者简介 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |