摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-13页 |
第1章 Hfq 蛋白的溶液核磁共振研究 | 第13-48页 |
·背景 | 第13-18页 |
·非编码 RNA 简介 | 第13-14页 |
·大肠杆菌中的非编码 RNA 调控以及 Hfq 蛋白 | 第14-16页 |
·Hfq 蛋白 RNA 分子伴侣的结构 | 第16-18页 |
·针对大分子量蛋白的溶液核磁共振方法 | 第18-24页 |
·针对大蛋白的标记方法 | 第19-20页 |
·Methyl TROSY | 第20-21页 |
·选择性标记样品的甲基认证 | 第21-22页 |
·动力学和 methyl CPMG | 第22-24页 |
·Hfq 蛋白 Sm 结构域(Hfq65)的核磁共振表征 | 第24-33页 |
·Hfq65 的主链认证 | 第24-28页 |
·全氘代 Hfq65 蛋白的 I,L,V 甲基选择性标记 | 第28-33页 |
·Hfq 全长蛋白(Hfq FL)的核磁共振表征 | 第33-36页 |
·Hfq FL 的克隆 | 第33页 |
·Hfq FL 的表达和纯化 | 第33-35页 |
·全氘代 Hfq FL 的 I,L,V 甲基选择性标记 | 第35页 |
·Hfq FL 与 Hfq65 核磁共振谱的显著差异 | 第35-36页 |
·NMR 研究 Hfq 蛋白 C 末端尾巴(HfqCTD)与 Hfq65 的相互作用 | 第36-46页 |
·Hfq CTD 的克隆 | 第36-37页 |
·Hfq CTD 的表达纯化 | 第37-38页 |
·Hfq CTD 与 Hfq65 的相互的 NMR 滴定 | 第38-40页 |
·Hfq CTD 的主链认证 | 第40-42页 |
·基于镧系金属 Gd 的顺磁弛豫增强实验 | 第42-46页 |
·Hfq 蛋白核磁共振研究的总结 | 第46-48页 |
第2章 Hfq 蛋白介导 sRNA 对 mRNA 的转录后调控的结构基础研究 | 第48-75页 |
·背景简介 | 第48-50页 |
·目前对 Hfq 功能结构基础的认识 | 第48-49页 |
·Hfq 帮助 DsrA 调控 rpoS 过程中的作用 | 第49-50页 |
·Hfq 的 ATP 酶活性简介 | 第50页 |
·Hfq 的 ATP 酶活性研究 | 第50-60页 |
·Hfq 与 ADP 的复合物晶体结构 | 第50-53页 |
·Hfq 上的点突变对 ATP 酶活性的影响 | 第53-57页 |
·Hfq ATP 酶活性可能的生理功能 | 第57-60页 |
·Hfq 与 DsrA 以及 rpoS 的相互作用研究 | 第60-75页 |
·用荧光偏振实验测量 Hfq 与 DsrA 片段的结合亲和力 | 第60-62页 |
·Hfq 与 DsrA 上 U-rich 片段的复合物晶体结构 | 第62-65页 |
·Hfq 与 DsrA 上片断 AU6A 和 Uex的溶液核磁共振滴定实验 | 第65-67页 |
·用荧光共振能量转移(FRET)检测不同 Hfq 六聚体的合作 | 第67-71页 |
·用顺磁弛豫增强(PRE)检测 Hfq 六聚体在结合 DsrA 时的合作 | 第71-73页 |
·有可能的基于多个六聚体合作的 Hfq 发挥功能的机制 | 第73-75页 |
第3章 总结 | 第75-76页 |
·研究结果和意义 | 第75页 |
·对未来工作的展望 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第84-85页 |