摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 引言 | 第12-20页 |
·棉铃虫的危害概况和转Bt棉花的种植情况 | 第12页 |
·苏云金芽孢杆菌及其作用机制 | 第12-14页 |
·苏云金芽孢杆菌简介 | 第12-13页 |
·苏云金芽孢杆菌的作用机制 | 第13-14页 |
·Bt抗性机制 | 第14-15页 |
·昆虫中肠受体种类 | 第15-18页 |
·类钙粘蛋白 | 第15-16页 |
·氨肽酶N | 第16-17页 |
·碱性磷酸酯酶 | 第17页 |
·糖脂 | 第17页 |
·肌动蛋白和 V-ATP酶 | 第17-18页 |
·文库构建的研究进展 | 第18-19页 |
·本实验的目的和意义 | 第19-20页 |
第二章 棉铃虫中肠均一化cDNA文库的构建 | 第20-33页 |
·材料与方法 | 第20-27页 |
·供试昆虫 | 第20页 |
·主要药剂 | 第20-21页 |
·主要仪器设备 | 第21页 |
·培养基及试剂的配制 | 第21-22页 |
·技术路线 | 第22页 |
·主要方法 | 第22-27页 |
·结果与分析 | 第27-31页 |
·棉铃虫中肠RNA的提取 | 第27-28页 |
·cDNA双链的合成 | 第28页 |
·均一化处理 | 第28-29页 |
·cDNA文库质量的鉴定 | 第29页 |
·EST序列测定与拼接 | 第29页 |
·序列分析 | 第29-31页 |
·讨论 | 第31-33页 |
第三章 棉铃虫中肠V-ATP酶亚基B的基因克隆 | 第33-46页 |
·材料与方法 | 第33-39页 |
·供试昆虫 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33-34页 |
·主要仪器设备 | 第34页 |
·培养基及试剂的配制 | 第34-35页 |
·技术路线 | 第35页 |
·主要方法 | 第35-39页 |
·结果与分析 | 第39-44页 |
·棉铃虫中肠总RNA的提取 | 第39-40页 |
·V-ATP酶亚基B基因PCR扩增产物 | 第40-41页 |
·序列结果与分析 | 第41-42页 |
·氨基酸序列同源性分析 | 第42-44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
第四章 棉铃虫V-ATP酶亚基B基因的原核表达及Ligand Blot分析 | 第46-56页 |
·材料与方法 | 第46-52页 |
·供试昆虫 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46-47页 |
·主要仪器设备 | 第47页 |
·培养基及试剂的配制 | 第47-50页 |
·技术路线 | 第50页 |
·主要方法 | 第50-52页 |
·结果与分析 | 第52-54页 |
·目的蛋白的诱导表达 | 第52页 |
·Western blot 分析 | 第52-53页 |
·Ligand blot 分析 | 第53-54页 |
·生物学测定结果 | 第54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
第五章 抗感棉铃虫V-ATP酶亚基B基因表达量的比较 | 第56-64页 |
·材料与方法 | 第56-60页 |
·供试昆虫 | 第56页 |
·主要试剂 | 第56-57页 |
·仪器设备 | 第57页 |
·培养基及试剂的配制 | 第57-58页 |
·技术路线 | 第58页 |
·主要方法 | 第58-60页 |
·结果与分析 | 第60-62页 |
·棉铃虫RNA的提取和cDNA的合成 | 第60页 |
·扩增效率的验证 | 第60页 |
·棉铃虫不同虫态V-ATP酶亚基B基因的表达 | 第60-61页 |
·棉铃虫肠道不同部位V-ATP酶亚基B基因的表达 | 第61页 |
·棉铃虫不同品系V-ATP酶亚基B基因的表达 | 第61-62页 |
·讨论 | 第62-64页 |
第六章 全文结论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
作者简历 | 第74页 |