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新型NF-κB抑制剂Clitocine抑制耐药性肿瘤细胞的分子机制研究

目录第1-9页
致谢第9-11页
英文缩略词(ABBREVIATION )第11-13页
摘要第13-15页
Abstract第15-18页
第一章 文献综述第18-31页
   ·前言第18页
   ·蘑菇和蘑菇提取物的抗癌活性第18-22页
     ·癌变抑制和癌症预防第18-19页
     ·诱导凋亡和抑制肿瘤细胞增殖第19-20页
     ·免疫调节第20页
     ·抗氧化作用第20-22页
   ·蘑菇和蘑菇提取物的抗癌活性的相关分子机制第22-29页
     ·抑制NF-κB的活化第22-23页
     ·抑制蛋白激酶活性第23-25页
     ·细胞周期调控第25页
     ·环氧合酶(Cyclooxygenase;COX)活性的抑制第25-26页
     ·DNA拓扑异构酶(DNA Topoisomerases)和DNA聚合酶活性(DNAPolymerase)的抑制第26-27页
     ·抗血管生成活性第27-28页
     ·免疫调节的机制第28-29页
   ·总结与展望第29页
   ·本研究的研究目的与研究内容第29-31页
第二章 Clitocine诱导耐药性肿瘤细胞的凋亡第31-51页
   ·前言第31-32页
   ·材料与方法第32-37页
     ·材料第32-33页
       ·细胞、菌株第32页
       ·主要试剂第32-33页
     ·培养基、试剂及缓冲液的配制第33-34页
     ·细胞培养第34页
     ·细胞存活能力测试(MTT)第34-35页
     ·DNA断裂检测第35页
     ·流式细胞仪检测细胞的凋亡第35页
     ·检测线粒体跨膜电位(ΔΨm)第35页
     ·蛋白免疫印迹第35-36页
     ·小干扰RNA的构建和转染第36页
     ·体内肿瘤生长抑制实验第36-37页
     ·统计分析第37页
   ·结果第37-48页
     ·Clitocine的确定第37-39页
     ·Clitocine诱导更多的R-HepG2细胞死亡第39-40页
     ·Clitocine诱导R-HepG2细胞凋亡第40-42页
     ·Clitocine使线粒体崩溃并释放细胞色素c到细胞质中第42-43页
     ·Clitocine诱导的细胞凋亡涉及细胞内与细胞外两条途径第43-45页
     ·Clitocine调控R-HepG2细胞Bcl-2家族蛋白的表达第45-46页
     ·Bad的敲低能够逆转Clitocine诱导的细胞凋亡第46-47页
     ·Clitocine在裸鼠模型内的抗癌作用第47-48页
   ·讨论第48-49页
   ·本章小结第49-51页
第三章 Clitocine逆转耐药性肿瘤细胞耐药性的分子机制研究第51-82页
   ·前言第51-52页
   ·材料与方法第52-67页
     ·材料第52-54页
       ·细胞、菌株和质粒第52-53页
       ·主要试剂第53-54页
     ·培养基、试剂及缓冲液的配制第54-56页
     ·感受态细胞的制备第56页
     ·质粒第56-63页
       ·MDR1启动子双报告萤光素酶检测系统的构建第56-61页
       ·突变型MDR1启动子萤光素酶检测系统的构建第61-62页
       ·NF-κB p65(RELA)表达载体的构建第62-63页
     ·细胞培养第63页
     ·细胞存活能力测试(MTT)第63页
     ·细胞内阿霉素积累检测第63页
     ·蛋白免疫印迹第63-64页
     ·实时定量PCR第64页
     ·萤光素酶报告活性检测第64-65页
     ·染色质免疫共沉淀(CHIP)第65页
     ·电泳迁移实验(EMSA)第65-66页
     ·细胞免疫化学第66-67页
     ·组织免疫化学第67页
     ·统计分析第67页
   ·结果第67-78页
     ·Clitocine对肿瘤细胞的增殖抑制作用第67-68页
     ·Clitocine能够逆转肿瘤细胞的耐药性第68-71页
     ·MDR1启动子序列的分段分析第71-73页
     ·NF-κB参与Clitocine对MDR1的抑制调控第73-76页
     ·Clitocine能抑制阿霉素诱导的NF-κB的激活第76-77页
     ·Clitocine能调控细胞模型和动物模型内NF-κB和P-gp蛋白的表达#60第77-78页
   ·讨论第78-80页
   ·本章小结第80-82页
第四章 全文总结及后续工作建议第82-84页
   ·全文总结第82页
   ·本文创新点第82-83页
   ·后续工作建议第83-84页
参考文献第84-93页
作者简历第93页

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