致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-17页 |
縮略表 | 第17-18页 |
第一章 文献综述与研究意义 | 第18-39页 |
第一节 研究目的、意义和内容 | 第18-22页 |
·选题背景 | 第18-20页 |
·研究意义 | 第20页 |
·研究内容与目标 | 第20-22页 |
第二节 NDH复合体研究进展 | 第22-39页 |
·NDH复合体的研究历史 | 第22-24页 |
·NDH复合体的亚基组成及其生物合成 | 第24-29页 |
·叶绿体基因编码的亚基 | 第24-25页 |
·核基因编码的亚基 | 第25-26页 |
·NDH复合体的生物合成 | 第26-29页 |
·PSⅠ的组成及其电子传递途径 | 第29-31页 |
·PSⅠ复合体的组成 | 第29-30页 |
·PSⅠ的电子传递途径 | 第30-31页 |
·NDH介导的CEF1的途径及其分子基础 | 第31-34页 |
·PGR5介导的CEF1的途径 | 第32-33页 |
·NDH介导的CEF1的途径 | 第33-34页 |
·FNR介导的CEF1的途径 | 第34页 |
·NDH复合体与PSⅠ之间的关系 | 第34-35页 |
·NDH复合体的生理功能 | 第35-37页 |
·NDH复合体在热胁迫中的作用 | 第35-36页 |
·NDH复合体在干旱胁迫中的作用 | 第36-37页 |
·NDH复合体在高光强和低温胁迫中的作用 | 第37页 |
·NDH复合体研究的展望 | 第37-39页 |
第二章 大豆NDH复合体的结构和功能分析 | 第39-52页 |
·材料和方法 | 第40-44页 |
·实验材料 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-44页 |
·植物培养方法和条件 | 第40页 |
·大豆总RNA的提取方法 | 第40-41页 |
·逆转录和cDNA的制备 | 第41页 |
·目的片段的PCR扩增 | 第41-42页 |
·酵母双杂交的实验方法 | 第42-44页 |
·酵母菌种的选用及培养所需的药品 | 第42页 |
·载体的构建 | 第42-43页 |
·BD自激活作用的检测 | 第43页 |
·融合蛋白的毒性测试 | 第43页 |
·酵母感受态的制作 | 第43-44页 |
·酵母的转化 | 第44页 |
·生物信息学分析 | 第44页 |
·结果分析 | 第44-49页 |
·NdhA和NdhC-NdhG亚基的结构分析 | 第44-46页 |
·NdhB亚基的结构分析 | 第46-48页 |
·酵母双杂交的结果分析 | 第48-49页 |
·NDH复合体的初步互作模型 | 第49页 |
·讨论 | 第49-50页 |
·S111-9中NdhB亚基的特异性 | 第49-50页 |
·大豆中NDH复合体亚基间的互作关系以及互作模型的初步建立 | 第50页 |
·本章小结 | 第50-52页 |
第三章 大豆NDH复合体的与PSI复合体之间的关系 | 第52-65页 |
·材料和方法 | 第53-57页 |
·实验材料 | 第53页 |
·实验方法 | 第53-57页 |
·植物培养方法和条件 | 第53页 |
·大豆总RNA的提取方法 | 第53页 |
·逆转录和cDNA的制备 | 第53页 |
·目的片段的PCR扩增 | 第53页 |
·拓扑分析以及酵母双杂交载体选择 | 第53-54页 |
·酵母双杂交的实验方法 | 第54-57页 |
·载体的构建 | 第54-55页 |
·酵母菌种的选用及培养所需的药品 | 第55-56页 |
·酵母感受态的制作及其载体转化 | 第56页 |
·膜蛋白酵母双杂交互作原理 | 第56-57页 |
·结果分析 | 第57-63页 |
·PsaA和PsaB的结构分析 | 第57-59页 |
·酵母载体选择的分析 | 第59-60页 |
·膜蛋白酵母双杂交体系的建立 | 第60-61页 |
·PsaA和PsaB与NDH复合体亲水亚基的互作关系 | 第61-63页 |
·讨论 | 第63-64页 |
·大豆中PsaA和PsaB的结构特性 | 第63页 |
·PsaA和PsaB与NdhH、NdhI、NdhJ和NdhK之间的互作关系 | 第63-64页 |
·本章小结 | 第64-65页 |
第四章 大豆NDH复合体在盐胁迫中的作用 | 第65-99页 |
·材料和方法 | 第65-75页 |
·实验材料与栽培方法 | 第65-66页 |
·PSⅡ最大光化学效率(F_v/F_m)、PSⅠ和PSⅡ光化学效率(Y(Ⅰ)和Y(Ⅱ))的测定 | 第66页 |
·作用光关闭后叶绿素荧光的瞬时上升的测定 | 第66-67页 |
·P700~+再还原速率的测定 | 第67页 |
·NdhB和NdhH抗体的制备 | 第67-68页 |
·Rubisco抗体的制备 | 第68页 |
·大豆叶片中总蛋白的提取 | 第68页 |
·用Western Blotting检测NdhB、NdhH和Rubisco的含量 | 第68-72页 |
·SDS-PADE电泳 | 第68-69页 |
·转膜 | 第69-71页 |
·免疫反应 | 第71页 |
·化学发光、显影和定影 | 第71-72页 |
·凝胶图象分析 | 第72页 |
·叶绿体的结构观察和NdhB、NdhH和Rubisco的亚细胞定位 | 第72-74页 |
·低温包埋步骤 | 第72页 |
·样品超薄切片的制作 | 第72页 |
·切片胶体金标记 | 第72-73页 |
·切片染色 | 第73页 |
·电镜观察 | 第73页 |
·胶体金标记形态定量 | 第73-74页 |
·特异性NdhB亚基的亚细胞定位 | 第74页 |
·35s::cDNA::sGFP载体的构建 | 第74页 |
·烟草叶片的选用 | 第74页 |
·荧光显微镜观察 | 第74页 |
·有效磷含量的测定 | 第74-75页 |
·结果分析 | 第75-91页 |
·盐胁迫对大豆生长的影响 | 第75-76页 |
·盐胁迫对大豆叶片PSⅡ最大光化学效率(F_v/F_m)的影响 | 第76-77页 |
·盐胁迫对大豆叶片这PSⅠ和PSⅡ光化学效率(Y(Ⅰ)和Y(Ⅱ))的影响 | 第77-78页 |
·盐胁迫对大豆叶片作用光关闭后叶绿素荧光瞬时上升的影响 | 第78-80页 |
·盐胁迫对大豆叶片P700~+再还原速率的影响 | 第80-81页 |
·盐胁迫对大豆叶片中NdhB和NdhH含量的影响 | 第81-82页 |
·盐胁迫对大豆叶片中NdhB和NdhH定位及分布的影响 | 第82-85页 |
·S111-9中特异性NdhB亚基的亚细胞定位 | 第85页 |
·盐胁迫对大豆叶片中Rubisco含量的影响 | 第85-88页 |
·盐胁迫对大豆叶片叶绿体中淀粉粒运输的影响 | 第88-89页 |
·盐胁迫对大豆叶片中有效磷含量的影响 | 第89-91页 |
·讨论 | 第91-98页 |
·PSⅠ比PSⅡ对盐胁迫更敏感 | 第91页 |
·在盐胁迫条件下,S111-9中NDH复合体活性和含量高于Melrose | 第91-93页 |
·S111-9中ndhB所含有的类囊体转运肽有助于NDH复合体的积累 | 第93-95页 |
·在盐胁迫条件下,S111-9中Rubisco含量高于Melrose | 第95页 |
·大豆叶片中有效磷含量影响淀粉粒的运输 | 第95-98页 |
·本章小结 | 第98-99页 |
第五章 全文讨论与总结 | 第99-106页 |
·讨论 | 第99-103页 |
·大豆中NDH复合体互作模型的初步建立 | 第99-100页 |
·大豆中NDH复合体亲水亚基与PsaA和PsaB之间的互作关系 | 第100页 |
·NDH复合体介导的CEF1在大豆抗耐盐中的作用 | 第100-101页 |
·类囊体转运肽对NDH复合体含量的影响 | 第101-102页 |
·有效磷含量下降影响大豆叶绿体中淀粉降解和运输 | 第102-103页 |
·本研究结论与创新点 | 第103-104页 |
·未来可能的研究动态 | 第104-106页 |
·新的蛋白质分离纯化技术的引入 | 第104页 |
·NDH复合体与PSⅠ复合体互作形成的超级复合体的作用 | 第104页 |
·PSⅠ复合体与NDH复合体的比例是否会影响CEF1活性 | 第104-106页 |
附录Ⅰ | 第106-107页 |
附录Ⅱ | 第107-108页 |
附录Ⅲ | 第108-109页 |
附录Ⅳ | 第109-110页 |
参考文献 | 第110-125页 |
博士期间发表的论文 | 第125页 |