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大豆NDH复合体及其在盐胁迫中的作用

致谢第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-17页
縮略表第17-18页
第一章 文献综述与研究意义第18-39页
 第一节 研究目的、意义和内容第18-22页
     ·选题背景第18-20页
     ·研究意义第20页
     ·研究内容与目标第20-22页
 第二节 NDH复合体研究进展第22-39页
     ·NDH复合体的研究历史第22-24页
     ·NDH复合体的亚基组成及其生物合成第24-29页
       ·叶绿体基因编码的亚基第24-25页
       ·核基因编码的亚基第25-26页
       ·NDH复合体的生物合成第26-29页
     ·PSⅠ的组成及其电子传递途径第29-31页
       ·PSⅠ复合体的组成第29-30页
       ·PSⅠ的电子传递途径第30-31页
     ·NDH介导的CEF1的途径及其分子基础第31-34页
       ·PGR5介导的CEF1的途径第32-33页
       ·NDH介导的CEF1的途径第33-34页
       ·FNR介导的CEF1的途径第34页
     ·NDH复合体与PSⅠ之间的关系第34-35页
     ·NDH复合体的生理功能第35-37页
       ·NDH复合体在热胁迫中的作用第35-36页
       ·NDH复合体在干旱胁迫中的作用第36-37页
       ·NDH复合体在高光强和低温胁迫中的作用第37页
     ·NDH复合体研究的展望第37-39页
第二章 大豆NDH复合体的结构和功能分析第39-52页
   ·材料和方法第40-44页
     ·实验材料第40页
     ·实验方法第40-44页
       ·植物培养方法和条件第40页
       ·大豆总RNA的提取方法第40-41页
       ·逆转录和cDNA的制备第41页
       ·目的片段的PCR扩增第41-42页
       ·酵母双杂交的实验方法第42-44页
         ·酵母菌种的选用及培养所需的药品第42页
         ·载体的构建第42-43页
         ·BD自激活作用的检测第43页
         ·融合蛋白的毒性测试第43页
         ·酵母感受态的制作第43-44页
         ·酵母的转化第44页
       ·生物信息学分析第44页
   ·结果分析第44-49页
     ·NdhA和NdhC-NdhG亚基的结构分析第44-46页
     ·NdhB亚基的结构分析第46-48页
     ·酵母双杂交的结果分析第48-49页
     ·NDH复合体的初步互作模型第49页
   ·讨论第49-50页
     ·S111-9中NdhB亚基的特异性第49-50页
     ·大豆中NDH复合体亚基间的互作关系以及互作模型的初步建立第50页
   ·本章小结第50-52页
第三章 大豆NDH复合体的与PSI复合体之间的关系第52-65页
   ·材料和方法第53-57页
     ·实验材料第53页
     ·实验方法第53-57页
       ·植物培养方法和条件第53页
       ·大豆总RNA的提取方法第53页
       ·逆转录和cDNA的制备第53页
       ·目的片段的PCR扩增第53页
       ·拓扑分析以及酵母双杂交载体选择第53-54页
       ·酵母双杂交的实验方法第54-57页
         ·载体的构建第54-55页
         ·酵母菌种的选用及培养所需的药品第55-56页
         ·酵母感受态的制作及其载体转化第56页
         ·膜蛋白酵母双杂交互作原理第56-57页
   ·结果分析第57-63页
     ·PsaA和PsaB的结构分析第57-59页
     ·酵母载体选择的分析第59-60页
     ·膜蛋白酵母双杂交体系的建立第60-61页
     ·PsaA和PsaB与NDH复合体亲水亚基的互作关系第61-63页
   ·讨论第63-64页
     ·大豆中PsaA和PsaB的结构特性第63页
     ·PsaA和PsaB与NdhH、NdhI、NdhJ和NdhK之间的互作关系第63-64页
   ·本章小结第64-65页
第四章 大豆NDH复合体在盐胁迫中的作用第65-99页
   ·材料和方法第65-75页
     ·实验材料与栽培方法第65-66页
     ·PSⅡ最大光化学效率(F_v/F_m)、PSⅠ和PSⅡ光化学效率(Y(Ⅰ)和Y(Ⅱ))的测定第66页
     ·作用光关闭后叶绿素荧光的瞬时上升的测定第66-67页
     ·P700~+再还原速率的测定第67页
     ·NdhB和NdhH抗体的制备第67-68页
     ·Rubisco抗体的制备第68页
     ·大豆叶片中总蛋白的提取第68页
     ·用Western Blotting检测NdhB、NdhH和Rubisco的含量第68-72页
       ·SDS-PADE电泳第68-69页
       ·转膜第69-71页
       ·免疫反应第71页
       ·化学发光、显影和定影第71-72页
       ·凝胶图象分析第72页
     ·叶绿体的结构观察和NdhB、NdhH和Rubisco的亚细胞定位第72-74页
       ·低温包埋步骤第72页
       ·样品超薄切片的制作第72页
       ·切片胶体金标记第72-73页
       ·切片染色第73页
       ·电镜观察第73页
       ·胶体金标记形态定量第73-74页
     ·特异性NdhB亚基的亚细胞定位第74页
       ·35s::cDNA::sGFP载体的构建第74页
       ·烟草叶片的选用第74页
       ·荧光显微镜观察第74页
     ·有效磷含量的测定第74-75页
   ·结果分析第75-91页
     ·盐胁迫对大豆生长的影响第75-76页
     ·盐胁迫对大豆叶片PSⅡ最大光化学效率(F_v/F_m)的影响第76-77页
     ·盐胁迫对大豆叶片这PSⅠ和PSⅡ光化学效率(Y(Ⅰ)和Y(Ⅱ))的影响第77-78页
     ·盐胁迫对大豆叶片作用光关闭后叶绿素荧光瞬时上升的影响第78-80页
     ·盐胁迫对大豆叶片P700~+再还原速率的影响第80-81页
     ·盐胁迫对大豆叶片中NdhB和NdhH含量的影响第81-82页
     ·盐胁迫对大豆叶片中NdhB和NdhH定位及分布的影响第82-85页
     ·S111-9中特异性NdhB亚基的亚细胞定位第85页
     ·盐胁迫对大豆叶片中Rubisco含量的影响第85-88页
     ·盐胁迫对大豆叶片叶绿体中淀粉粒运输的影响第88-89页
     ·盐胁迫对大豆叶片中有效磷含量的影响第89-91页
   ·讨论第91-98页
     ·PSⅠ比PSⅡ对盐胁迫更敏感第91页
     ·在盐胁迫条件下,S111-9中NDH复合体活性和含量高于Melrose第91-93页
     ·S111-9中ndhB所含有的类囊体转运肽有助于NDH复合体的积累第93-95页
     ·在盐胁迫条件下,S111-9中Rubisco含量高于Melrose第95页
     ·大豆叶片中有效磷含量影响淀粉粒的运输第95-98页
   ·本章小结第98-99页
第五章 全文讨论与总结第99-106页
   ·讨论第99-103页
     ·大豆中NDH复合体互作模型的初步建立第99-100页
     ·大豆中NDH复合体亲水亚基与PsaA和PsaB之间的互作关系第100页
     ·NDH复合体介导的CEF1在大豆抗耐盐中的作用第100-101页
     ·类囊体转运肽对NDH复合体含量的影响第101-102页
     ·有效磷含量下降影响大豆叶绿体中淀粉降解和运输第102-103页
   ·本研究结论与创新点第103-104页
   ·未来可能的研究动态第104-106页
     ·新的蛋白质分离纯化技术的引入第104页
     ·NDH复合体与PSⅠ复合体互作形成的超级复合体的作用第104页
     ·PSⅠ复合体与NDH复合体的比例是否会影响CEF1活性第104-106页
附录Ⅰ第106-107页
附录Ⅱ第107-108页
附录Ⅲ第108-109页
附录Ⅳ第109-110页
参考文献第110-125页
博士期间发表的论文第125页

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