棉花种子特异性表达启动子的克隆及功能分析
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-24页 |
| ·启动子的概念 | 第13页 |
| ·植物启动子的基本结构 | 第13-14页 |
| ·TATA-box | 第13-14页 |
| ·GC-box | 第14页 |
| ·特有的上游元件 | 第14页 |
| ·植物启动子的分类 | 第14-20页 |
| ·组成型启动子 | 第14-16页 |
| ·诱导型启动子 | 第16-17页 |
| ·组织特异性启动子 | 第17-20页 |
| ·启动子相关的网络信息资源 | 第20-21页 |
| ·启动子克隆方法 | 第21-22页 |
| ·利用基因组文库克隆启动子 | 第21页 |
| ·构建启动子质粒探针载体克隆启动子 | 第21页 |
| ·利用PCR 技术克隆启动子 | 第21-22页 |
| ·启动子功能分析方法 | 第22-23页 |
| ·胚胎发育后期丰富蛋白的研究进展 | 第23-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-36页 |
| ·试验材料 | 第24-28页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌株及载体 | 第24-25页 |
| ·主要试剂、试剂盒和酶 | 第25-28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| ·棉花基因组DNA 的提取 | 第28-30页 |
| ·棉花基因组DNA 的提取方法 | 第28-29页 |
| ·棉花基因组DNA 提取液的配制 | 第29-30页 |
| ·D113、D34 启动子片段的扩增 | 第30-32页 |
| ·PCR 产物制备 | 第30页 |
| ·克隆前PCR 产物处理 | 第30-31页 |
| ·PCR 产物克隆 | 第31-32页 |
| ·阳性克隆检测 | 第32页 |
| ·测序 | 第32页 |
| ·数据处理 | 第32页 |
| ·表达载体的构建 | 第32-34页 |
| ·接头制备 | 第32-33页 |
| ·改造表达载体pBI121 | 第33-34页 |
| ·转基因拟南芥的获得 | 第34-35页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第34页 |
| ·转化感受态细胞 | 第34页 |
| ·转化拟南芥植物 | 第34-35页 |
| ·转基因拟南芥的检测 | 第35-36页 |
| ·MS-Kana 筛选转基因植物 | 第35页 |
| ·转基因拟南芥的分子检测 | 第35页 |
| ·转基因拟南芥的GUS 检测 | 第35-36页 |
| 第三章 试验结果与分析 | 第36-48页 |
| ·棉花石系亚1 号基因组DNA 的提取 | 第36页 |
| ·D113、D34 启动子的扩增 | 第36-37页 |
| ·克隆、重组子鉴定 | 第37-38页 |
| ·PCR 扩增片段的序列分析 | 第38-42页 |
| ·pBI121-D 植物表达载体的构建 | 第42-44页 |
| ·拟南芥的遗传转化 | 第44-46页 |
| ·转基因拟南芥的分子检测 | 第46页 |
| ·转基因拟南芥的GUS 检测 | 第46-48页 |
| 第四章 讨论 | 第48-52页 |
| ·D113、D34 启动子的序列分析 | 第48-49页 |
| ·D113、D34 启动子功能验证 | 第49-50页 |
| ·拟南芥的遗传转化 | 第50页 |
| ·表达载体的 PBI121 的改造 | 第50-52页 |
| 第五章 全文结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简历 | 第62页 |