| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-25页 |
| ·蓝舌病概述 | 第14-23页 |
| ·BTV 的分类地位、形态特征和理化特性 | 第14-15页 |
| ·BTV 的培养特性 | 第15页 |
| ·基因组结构与特征 | 第15-16页 |
| ·BTV 在感染细胞中的合成 | 第16页 |
| ·BTV 基因组编码蛋白的生物学功能与特性 | 第16-19页 |
| ·BTV 的生态学与流行病学 | 第19-20页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第20-21页 |
| ·BT 的预防 | 第21-22页 |
| ·BTV 检测方法的研究 | 第22-23页 |
| ·BTV VP2 抗原表位研究进展 | 第23-24页 |
| ·研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 蓝舌病病毒VP2 蛋白的真核表达与抗原性检测 | 第25-35页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·质粒、菌株、细胞、血清和病毒 | 第25页 |
| ·酶和主要试剂 | 第25页 |
| ·主要溶液及培养基的配制 | 第25-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·引物设计 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-31页 |
| ·A17 病毒RNA 的提取及反转录 | 第27-28页 |
| ·L2 基因的扩增、克隆及鉴定 | 第28页 |
| ·L2 基因重组杆状病毒供体质粒的构建 | 第28-29页 |
| ·重组杆粒的的构建与鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组杆状病毒的获得与扩增 | 第30页 |
| ·L2 基因在Sf9 细胞中的表达与SDS-PAGE 分析 | 第30页 |
| ·真核表达重组VP2 蛋白的纯化 | 第30-31页 |
| ·重组VP2 蛋白的抗原性分析 | 第31页 |
| ·结果 | 第31-34页 |
| ·L2 基因的PCR 扩增 | 第31-32页 |
| ·重组供体质粒pFast-VP2 的鉴定 | 第32页 |
| ·重组杆粒BAC-VP2 的鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组杆状病毒BACV-VP2 的扩增 | 第33页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 电泳分析及纯化 | 第33页 |
| ·重组VP2 蛋白的抗原性鉴定 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 蓝舌病病毒VP2 蛋白的原核表达与抗原性检测 | 第35-41页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·质粒、菌株和血清 | 第35页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第35页 |
| ·主要溶液及培养基的配制 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·引物设计 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·VP2 蛋白基因的扩增 | 第36页 |
| ·VP2 蛋白原核表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·L2 基因的原核截短表达与SDS-PAGE 分析 | 第37页 |
| ·原核表达重组VP2 蛋白的纯化 | 第37-38页 |
| ·原核表达重组VP2 蛋白的抗原性鉴定 | 第38页 |
| ·结果 | 第38-40页 |
| ·L2 基因的PCR 扩增 | 第38-39页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第39页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 电泳分析 | 第39页 |
| ·表达产物的Western blot 检测 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 第四章 蓝舌病病毒VP2 蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 | 第41-52页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·细胞、MAb 和病毒 | 第41页 |
| ·主要试剂和药品 | 第41页 |
| ·试验动物 | 第41页 |
| ·主要溶液和培养液的配制 | 第41-42页 |
| ·实验动物 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-48页 |
| ·间接ELISA 检测方法的确立 | 第42-43页 |
| ·动物免疫 | 第43页 |
| ·细胞融合 | 第43-45页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第45页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆化、冻存和复苏 | 第45-46页 |
| ·MAb 腹水的制备 | 第46页 |
| ·MAb 的鉴定 | 第46-48页 |
| ·结果 | 第48-50页 |
| ·间接ELISA 检测方法的确立 | 第48页 |
| ·杂交瘤细胞株的获得 | 第48页 |
| ·杂交瘤细胞的染色体计数 | 第48页 |
| ·MAb 亚类的鉴定 | 第48-49页 |
| ·MAb 的特异性鉴定 | 第49-50页 |
| ·腹水中MAb 效价及杂交瘤细胞的稳定性检测 | 第50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 BTV17 VP2 蛋白抗原表位的鉴定 | 第52-58页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-54页 |
| ·抗原表位的初步定位 | 第52页 |
| ·抗原表位的精确定位 | 第52-53页 |
| ·抗原表位的保守性分析 | 第53-54页 |
| ·结果 | 第54-56页 |
| ·抗原表位的初步筛选及精确定位 | 第54-55页 |
| ·抗原表位的保守性分析 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第六章 全文结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 作者简历 | 第66页 |
