| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-18页 |
| 1.1 水产养殖业的发展状况 | 第9-10页 |
| 1.2 模式动物斑马鱼 | 第10页 |
| 1.3 迟钝爱德华氏菌——重要的海洋鱼类细菌性病原 | 第10-12页 |
| 1.3.1 鱼类病害概况 | 第10-11页 |
| 1.3.2 迟钝爱德华氏菌 | 第11页 |
| 1.3.3 迟钝爱德华氏菌的致病性 | 第11-12页 |
| 1.4 疫苗学概况及最新研究进展 | 第12-14页 |
| 1.4.1 疫苗学发展简史 | 第12页 |
| 1.4.2 反向疫苗学的诞生 | 第12-13页 |
| 1.4.3 反向疫苗学的经典案例 | 第13-14页 |
| 1.5 无缝克隆技术 | 第14-15页 |
| 1.5.1 基因融合 | 第14页 |
| 1.5.2 无缝克隆基因融合 | 第14-15页 |
| 1.6 蛋白纯化工艺 | 第15-17页 |
| 1.6.1 蛋白纯化的方法 | 第15-16页 |
| 1.6.2 内毒素的去除 | 第16-17页 |
| 1.7 本课题研究的意义 | 第17-18页 |
| 第2章 迟钝爱德华氏菌候选抗原蛋白的筛选 | 第18-35页 |
| 2.1 引言 | 第18-20页 |
| 2.1.1 实验方法 | 第18页 |
| 2.1.2 生物信息学分析工具 | 第18页 |
| 2.1.3 实验结果与讨论 | 第18-20页 |
| 2.2 候选抗原蛋白质的重组表达与提纯 | 第20-28页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第20-24页 |
| 2.2.2 试验方法 | 第24-28页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第28-35页 |
| 2.3.1 候选抗原蛋白重组表达质粒的构建 | 第28-29页 |
| 2.3.2 阳性克隆的鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.3 重组蛋白的表达及纯化 | 第30-35页 |
| 第3章 以斑马鱼为实验动物的候选抗原蛋白免疫保护率分析 | 第35-42页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 实验器材 | 第35页 |
| 3.2.1 实验动物斑马鱼 | 第35页 |
| 3.2.2 佐剂以及麻醉品 | 第35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-36页 |
| 3.3.1 实验动物斑马鱼的免疫试验 | 第35-36页 |
| 3.3.2 实验动物斑马鱼攻毒实验 | 第36页 |
| 3.3.3 候选抗原蛋白相对免疫保护率（RPS)的测定 | 第36页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第36-41页 |
| 3.4.1 斑马鱼动物实验分析候选抗原蛋白的免疫保护率 | 第36-39页 |
| 3.4.2 免疫斑马鱼抗原蛋白的分类 | 第39-41页 |
| 3.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第4章 抗原蛋白GAPDH和FlgD联合免疫保护效果分析 | 第42-58页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 实验材料 | 第42页 |
| 4.2.1 实验场地与实验动物 | 第42页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第42页 |
| 4.3 实验方法 | 第42-48页 |
| 4.3.1 FlgD与GAPDH融合基因(G27)的克隆 | 第42-45页 |
| 4.3.2 重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第45-47页 |
| 4.3.3 大菱鲆的免疫与攻毒实验 | 第47页 |
| 4.3.4 大菱鲆免疫相关因子分析 | 第47-48页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第48-57页 |
| 4.4.1 融合抗原G27的克隆、表达与纯化 | 第48-52页 |
| 4.4.2 斑马鱼动物实验分析GAPDH-FlgD混合物与G27的免疫保护作用 | 第52-53页 |
| 4.4.3 大菱鲆动物实验分析GAPDH-FlgD混合物与G27免疫保护作用 | 第53-57页 |
| 4.5 小结 | 第57-58页 |
| 第5章 结论与展望 | 第58-59页 |
| 5.1 结论 | 第58页 |
| 5.2 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录 | 第65-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
