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RNAi慢病毒载体的构建及对急性T系白血病细胞CD59因沉默效应的研究

摘要第2-4页
Abstract第4-5页
引言第8-11页
材料与方法第11-30页
    1 材料第11-12页
        1.1 主要实验仪器第11页
        1.2 病毒与细胞第11页
        1.3 实验动物第11-12页
        1.4 主要实验试剂第12页
    2 方法第12-29页
        2.1 技术路线第12-15页
        2.2 Jurkat细胞的培养第15页
        2.3 免疫荧光观察Jurkat细胞上CD59的表达量第15-16页
        2.4 RNAi慢病毒载体的构建和包装第16-19页
        2.5 慢病毒转染及转染效率的测定第19-20页
        2.6 RT-PCR检测CD59、Bcl-2、Bax的表达第20-22页
        2.7 Western-Blot检测CD59、Bcl-2、Bax、caspase-3、survivin的表达第22-25页
        2.8 激光共聚焦观察CD59分子的定位第25页
        2.9 ELISA检测IL-3、TNF-β的表达第25-26页
        2.10 CCK8检测细胞增殖活性第26-27页
        2.11 流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡第27页
        2.12 建立裸鼠动物实验模型第27页
        2.13 小鼠一般指标观察第27-28页
        2.14 流式细胞术检测小鼠外周血和骨髓中淋巴细胞凋亡水平第28页
        2.15 ELISA检测外周血清中CD59、IL-3、TNF-β的表达水平第28-29页
    3 统计学分析第29-30页
结果第30-47页
    1 Jurkat细胞的培养第30页
    2 Jurkat细胞上CD59的表达水平第30-31页
    3 Jurkat细胞的慢病毒转染情况第31-35页
    4 RT-PCR检测相关mRNA的表达第35-36页
    5 Western-Blot检测相关蛋白的表达第36-37页
    6 CD59分子的定位第37-38页
    7 ELISA检测结果第38-39页
    8 细胞增殖活性情况第39页
    9 细胞凋亡水平第39-41页
    10 小鼠的一般情况第41页
    11 小鼠体质量的变化第41-42页
    12 外周血白细胞计数第42-43页
    13 小鼠外周血和骨髓中淋巴细胞凋亡情况第43-46页
    14 小鼠血清细胞因子的表达第46-47页
讨论第47-50页
结论第50-51页
参考文献第51-55页
综述第55-66页
    综述参考文献第62-66页
攻读学位期间的研究成果第66-67页
致谢第67-68页

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