摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-11页 |
材料与方法 | 第11-30页 |
1 材料 | 第11-12页 |
1.1 主要实验仪器 | 第11页 |
1.2 病毒与细胞 | 第11页 |
1.3 实验动物 | 第11-12页 |
1.4 主要实验试剂 | 第12页 |
2 方法 | 第12-29页 |
2.1 技术路线 | 第12-15页 |
2.2 Jurkat细胞的培养 | 第15页 |
2.3 免疫荧光观察Jurkat细胞上CD59的表达量 | 第15-16页 |
2.4 RNAi慢病毒载体的构建和包装 | 第16-19页 |
2.5 慢病毒转染及转染效率的测定 | 第19-20页 |
2.6 RT-PCR检测CD59、Bcl-2、Bax的表达 | 第20-22页 |
2.7 Western-Blot检测CD59、Bcl-2、Bax、caspase-3、survivin的表达 | 第22-25页 |
2.8 激光共聚焦观察CD59分子的定位 | 第25页 |
2.9 ELISA检测IL-3、TNF-β的表达 | 第25-26页 |
2.10 CCK8检测细胞增殖活性 | 第26-27页 |
2.11 流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡 | 第27页 |
2.12 建立裸鼠动物实验模型 | 第27页 |
2.13 小鼠一般指标观察 | 第27-28页 |
2.14 流式细胞术检测小鼠外周血和骨髓中淋巴细胞凋亡水平 | 第28页 |
2.15 ELISA检测外周血清中CD59、IL-3、TNF-β的表达水平 | 第28-29页 |
3 统计学分析 | 第29-30页 |
结果 | 第30-47页 |
1 Jurkat细胞的培养 | 第30页 |
2 Jurkat细胞上CD59的表达水平 | 第30-31页 |
3 Jurkat细胞的慢病毒转染情况 | 第31-35页 |
4 RT-PCR检测相关mRNA的表达 | 第35-36页 |
5 Western-Blot检测相关蛋白的表达 | 第36-37页 |
6 CD59分子的定位 | 第37-38页 |
7 ELISA检测结果 | 第38-39页 |
8 细胞增殖活性情况 | 第39页 |
9 细胞凋亡水平 | 第39-41页 |
10 小鼠的一般情况 | 第41页 |
11 小鼠体质量的变化 | 第41-42页 |
12 外周血白细胞计数 | 第42-43页 |
13 小鼠外周血和骨髓中淋巴细胞凋亡情况 | 第43-46页 |
14 小鼠血清细胞因子的表达 | 第46-47页 |
讨论 | 第47-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
综述 | 第55-66页 |
综述参考文献 | 第62-66页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |