| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语表(ABBREVIATION) | 第10-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-26页 |
| 1.1 天然免疫 | 第13-21页 |
| 1.1.1 天然免疫简介 | 第13页 |
| 1.1.2 PAMP和PRRs简介 | 第13页 |
| 1.1.3 TLR家族蛋白 | 第13-15页 |
| 1.1.4 RLR家族蛋白 | 第15-17页 |
| 1.1.5 NLR家族蛋白 | 第17-19页 |
| 1.1.6 DNA受体 | 第19页 |
| 1.1.7 NLRX1研究进展 | 第19-21页 |
| 1.2 NF-ΚB信号通路 | 第21-22页 |
| 1.3 LUBAC研究进展 | 第22-24页 |
| 1.4 泛素研究进展 | 第24-26页 |
| 第2章 研究目的和意义 | 第26-27页 |
| 第3章 材料与方法 | 第27-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第27-31页 |
| 3.1.1 细胞、菌株 | 第27页 |
| 3.1.2 载体与质粒 | 第27-28页 |
| 3.1.3 工具酶及主要试剂 | 第28-29页 |
| 3.1.4 Western Blot实验所需材料 | 第29页 |
| 3.1.5 培养基及其配制 | 第29-30页 |
| 3.1.6 主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第30-31页 |
| 3.1.7 主要实验仪器及设备 | 第31页 |
| 3.1.8 分子生物学分析软件 | 第31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-42页 |
| 3.2.1 野生型NLRX1及其截短突变体真核表达质粒的构建 | 第31-32页 |
| 3.2.2 细胞样品总RNA的提取、反转录及实时荧光定量PCR | 第32-34页 |
| 3.2.3 PCR产物或酶切产物的电泳检测 | 第34页 |
| 3.2.4 PCR产物或酶切产物的回收与纯化 | 第34-35页 |
| 3.2.5 限制性内切酶酶切反应 | 第35页 |
| 3.2.6 外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第35-36页 |
| 3.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第36页 |
| 3.2.8 连接产物的转化 | 第36页 |
| 3.2.9 重组质粒的制备与鉴定 | 第36-38页 |
| 3.2.10 质粒的转染（脂质体介导的瞬时转染法） | 第38页 |
| 3.2.11 双荧光素酶检测实验 | 第38-39页 |
| 3.2.12 Western Blot实验 | 第39-40页 |
| 3.2.13 免疫共沉淀 | 第40页 |
| 3.2.14 间接免疫荧光检测蛋白质的亚细胞定位 | 第40-41页 |
| 3.2.15 统计学方法 | 第41-42页 |
| 第4章 结果与分析 | 第42-53页 |
| 4.1 人源NLRS真核表达质粒的构建 | 第42页 |
| 4.2 超表达NLRX1抑制LUBAC介导的NF-ΚB信号 | 第42-43页 |
| 4.3 从互作角度探究NLRX1发挥负调控作用的机制 | 第43-47页 |
| 4.3.1 NLRX1与HOIP相互作用 | 第43-46页 |
| 4.3.2 NLRX1抑制LUBAC复合物的形成 | 第46页 |
| 4.3.3 NLRX1减少LUBAC对NEMO的招募 | 第46-47页 |
| 4.4 探究NLRX1对LUBAC定位及表达的影响 | 第47-51页 |
| 4.4.1 NLRX1对LUBAC定位的影响 | 第47-49页 |
| 4.4.2 NLRX1对LUBAC表达的影响 | 第49-51页 |
| 4.5 超表达NLRX1抑制NEMO的线性泛素化 | 第51-53页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第53-56页 |
| 5.1 讨论 | 第53-55页 |
| 5.1.1 负调控LUBAC介导的NF-κB信号通路的NLRs的筛选 | 第53-54页 |
| 5.1.2 NLRX1负调控作用的机制探讨 | 第54页 |
| 5.1.3 NLRX1功能域的探究 | 第54-55页 |
| 5.2 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附录 | 第65页 |
