| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-20页 |
| 1 山茶刺盘孢和茶云纹叶枯病 | 第14-15页 |
| 1.1 茶云纹叶枯病和及其病原山茶刺盘孢菌 | 第14-15页 |
| 2 dsRNA病毒以及线形病毒的研究进展 | 第15-18页 |
| 2.1 dsRNA病毒的进化研究 | 第15页 |
| 2.2 dsRNA病毒的分类 | 第15-16页 |
| 2.3 线形病毒的研究进展 | 第16-17页 |
| 2.4 利用病毒控制真菌性病害 | 第17-18页 |
| 3 本研究目的与意义 | 第18-20页 |
| 第二章 茶云纹叶枯病菌株LT31 的生物学性状的研究 | 第20-25页 |
| 1 材料与方法 | 第20-22页 |
| 1.1 材料 | 第20页 |
| 1.1.1 菌株与培养条件 | 第20页 |
| 1.1.2 培养基 | 第20页 |
| 1.2 方法 | 第20-22页 |
| 1.2.1 菌株的分离和分子鉴定 | 第20-21页 |
| 1.2.2 菌落形态观察 | 第21-22页 |
| 1.2.3 生长速度的测定 | 第22页 |
| 1.2.4 致病力测定 | 第22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-23页 |
| 2.1 菌株的分子鉴定 | 第22页 |
| 2.2 菌株的菌落形态特征 | 第22-23页 |
| 2.3 菌株的生长速度与致病力特性 | 第23页 |
| 3 讨论 | 第23-25页 |
| 第三章 菌株LT31中dsRNA的克隆与序列分析 | 第25-43页 |
| 1 材料与方法 | 第25-33页 |
| 1.1 材料 | 第25-27页 |
| 1.1.1 菌株与培养基 | 第25页 |
| 1.1.2 载体与引物 | 第25-27页 |
| 1.1.3 试剂与药品 | 第27页 |
| 1.2 方法 | 第27-33页 |
| 1.2.1 菌丝的培养和收集 | 第27页 |
| 1.2.2 菌株dsRNA的提取 | 第27-28页 |
| 1.2.3 dsRNA样品的酶切验证 | 第28页 |
| 1.2.4 dsRNA片段的cDNA序列克隆 | 第28-30页 |
| 1.2.5 序列的拼接及系统发育分析 | 第30-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-42页 |
| 2.1 dsRNA的提取及酶处理验证 | 第33页 |
| 2.2 dsRNA全长cDNA序列的克隆与分析 | 第33-41页 |
| 2.3 系统发育树的构建与分析 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 菌株LT31中病毒粒子形态的研究 | 第43-69页 |
| 1 材料与方法 | 第43-51页 |
| 1.1 材料 | 第43-44页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第43页 |
| 1.1.2 培养基 | 第43页 |
| 1.1.3 试剂和药品 | 第43-44页 |
| 1.2 方法 | 第44-51页 |
| 1.2.1 病毒粒体透射电镜观察 | 第44-47页 |
| 1.2.1.1 样品的超速梯度离心 | 第44-45页 |
| 1.2.1.2 超速梯度离心介质中的核酸分析 | 第45页 |
| 1.2.1.3 病毒基因组dsRNA的酶切验证 | 第45-46页 |
| 1.2.1.4 超速梯度离心介质中的蛋白分析 | 第46-47页 |
| 1.2.1.5 病毒粒体的透射电镜观察和分析 | 第47页 |
| 1.2.2 病毒结构蛋白多克隆抗体的制备 | 第47-49页 |
| 1.2.2.1 病毒结构蛋白的定量分析 | 第47页 |
| 1.2.2.2 多克隆抗体的制备 | 第47-48页 |
| 1.2.2.3 抗血清的效价分析 | 第48页 |
| 1.2.2.4 Western blot分析 | 第48-49页 |
| 1.2.3 有毒、无毒菌株中病毒的电镜及免疫电镜观察 | 第49-51页 |
| 1.2.3.1 菌株LT31 孢子脱毒分析 | 第49-50页 |
| 1.2.3.2 病毒核酸和粒体转染原生质体 | 第50-51页 |
| 1.2.3.3 免疫电镜的观察和分析 | 第51页 |
| 2 结果 | 第51-67页 |
| 2.1 病毒粒体透射电镜观察 | 第51-59页 |
| 2.1.1 超速离心梯度层中核酸的分析 | 第51-53页 |
| 2.1.2 超速离心梯度层中蛋白的分析 | 第53-57页 |
| 2.1.3 病毒粒体的透射观察和测量 | 第57-59页 |
| 2.2 病毒结构蛋白多克隆抗体的制备以及检测效果分析 | 第59-61页 |
| 2.2.1 病毒结构蛋白的SDS-PAGE以及定量分析 | 第59页 |
| 2.2.2 多克隆抗体的效价分析 | 第59-61页 |
| 2.2.3 多克隆抗体的Western-blot分析 | 第61页 |
| 2.3 病毒的免疫电镜观察 | 第61-67页 |
| 2.3.1 脱毒菌株的检测结果 | 第61-62页 |
| 2.3.2 传毒菌株的检测结果 | 第62-64页 |
| 2.3.3 超速离心梯度层中核酸和蛋白分析 | 第64-65页 |
| 2.3.4 无毒有毒菌株中病毒免疫电镜的观察 | 第65-67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 第五章 CcFV1对寄主的影响 | 第69-75页 |
| 1 材料与方法 | 第69-70页 |
| 1.1 材料 | 第69页 |
| 1.1.1 供试菌株与植物 | 第69页 |
| 1.1.2 培养基 | 第69页 |
| 1.1.3 试剂及药品 | 第69页 |
| 1.2 方法 | 第69-70页 |
| 1.2.1 脱毒、转染后代菌株生物学性状的研究 | 第69页 |
| 1.2.2 真菌菌丝的超薄切片制备和观察 | 第69-70页 |
| 2 结果与分析 | 第70-74页 |
| 2.1 有毒无毒菌株的生物学性状 | 第70-73页 |
| 2.2 真菌菌丝的超薄切片的透射电镜观察结果 | 第73-74页 |
| 3 讨论 | 第74-75页 |
| 第六章 结论与展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-83页 |
| 附录A PCR扩增产物的回收及克隆测序 | 第83-85页 |
| 附录B 主要试剂及溶液的配制 | 第85-87页 |
| 附录C 菌株保守序列测序结果 | 第87-92页 |
| 附录D 硕士研究期间发表的文章 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
