| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-22页 |
| 1.1 抗癌肽 | 第11-12页 |
| 1.2 抗癌肽的研究进展 | 第12页 |
| 1.3 抗癌肽的结构 | 第12-15页 |
| 1.3.1 α-螺旋结构抗癌肽 | 第12-13页 |
| 1.3.2 β-折叠结构抗癌肽 | 第13-14页 |
| 1.3.3 线性结构抗癌肽 | 第14页 |
| 1.3.4 杂合抗癌肽 | 第14-15页 |
| 1.4 抗癌肽作用的分子机制 | 第15-19页 |
| 1.4.1 破坏细胞膜 | 第15-17页 |
| 1.4.2 诱导细胞凋亡 | 第17-18页 |
| 1.4.3 破坏染色体及DNA | 第18-19页 |
| 1.4.4 其他方式 | 第19页 |
| 1.5 抗癌肽的应用前景 | 第19-20页 |
| 1.6 本论文选题依据和研究内容 | 第20-22页 |
| 1.6.1 选题依据 | 第20-21页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 2 海南湍蛙抗癌肽Hainanenins的分离与基因克隆 | 第22-38页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.2.1 分离纯化实验材料 | 第22页 |
| 2.2.2 基因克隆实验材料 | 第22-24页 |
| 2.3 分离纯化实验方法 | 第24页 |
| 2.3.1 皮肤分泌物的制备 | 第24页 |
| 2.3.2 活性多肽的纯化 | 第24页 |
| 2.3.3 氨基酸序列分析 | 第24页 |
| 2.4 海南湍蛙抗癌肽的分子克隆 | 第24-31页 |
| 2.4.1 海南湍蛙cDNA文库的构建 | 第24-27页 |
| 2.4.2 海南湍蛙hainanensis基因克隆 | 第27-31页 |
| 2.4.3 测序结果分析 | 第31页 |
| 2.4.4 多肽合成 | 第31页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第31-37页 |
| 2.5.1 分离纯化结果 | 第31-32页 |
| 2.5.2 纯化样品的氨基酸测序结果及序列特征 | 第32-33页 |
| 2.5.3 Hainanenins基因克隆结果 | 第33-35页 |
| 2.5.4 Hainanenins理化性质分析 | 第35-37页 |
| 2.5.5 多肽合成 | 第37页 |
| 2.6 本章小结 | 第37-38页 |
| 3 Hainanenin-1和hainanenin-5的活性鉴定 | 第38-44页 |
| 3.1 引言 | 第38页 |
| 3.2 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第38页 |
| 3.2.2 测试菌株 | 第38-39页 |
| 3.2.3 实验器材 | 第39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-40页 |
| 3.3.1 抗菌活性分析 | 第39-40页 |
| 3.3.2 溶血性分析 | 第40页 |
| 3.3.3 抗氧化活性分析 | 第40页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第40-43页 |
| 3.4.1 抗菌活性分析 | 第40-42页 |
| 3.4.2 溶血活性分析 | 第42页 |
| 3.4.3 抗氧化性分析 | 第42-43页 |
| 3.5 本章小结 | 第43-44页 |
| 4 Hainanenin-1抗癌活性的初步探究 | 第44-55页 |
| 4.1 引言 | 第44页 |
| 4.2 实验材料 | 第44-45页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第44页 |
| 4.2.2 细胞株 | 第44-45页 |
| 4.2.3 实验器材 | 第45页 |
| 4.3 实验方法 | 第45-48页 |
| 4.3.1 细胞复苏与培养 | 第45-46页 |
| 4.3.2 MTT法检测hainanenin-1对细胞生长抑制的作用 | 第46页 |
| 4.3.3 倒置显微镜观察细胞形态的变化 | 第46-47页 |
| 4.3.4 Hoechst33258染色荧光显微镜观察细胞核形态变化 | 第47页 |
| 4.3.5 SEM观察细胞超显微结构 | 第47页 |
| 4.3.6 AnnexinV-FITC和PI双染检测细胞凋亡率 | 第47-48页 |
| 4.3.7 分光光度法检测caspases活性 | 第48页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第48-54页 |
| 4.4.1 Hainanenin-1对不细胞的生长抑制作用 | 第48-49页 |
| 4.4.2 倒置显微镜观察细胞形态变化 | 第49-50页 |
| 4.4.3 Hoechst33258染色观察细胞核形态变化 | 第50-51页 |
| 4.4.4 SEM观察MCF-7细胞膜的变化 | 第51-52页 |
| 4.4.5 细胞凋亡率 | 第52-53页 |
| 4.4.6 Caspase活性分析 | 第53-54页 |
| 4.5 本章小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
