摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
目录 | 第10-13页 |
1 绪论 | 第13-36页 |
1.1 葡聚糖 | 第13-18页 |
1.1.1 β-1,3-1,4-葡聚糖 | 第14-16页 |
1.1.2 β-1,3-葡聚糖 | 第16-17页 |
1.1.3 索拉胶 | 第17-18页 |
1.2 寡糖 | 第18-21页 |
1.2.1 寡糖的分类 | 第19页 |
1.2.2 功能性寡糖的应用 | 第19-20页 |
1.2.3 寡糖的制备 | 第20-21页 |
1.3 β-葡聚糖酶 | 第21-33页 |
1.3.1 β-1,3-1,4-葡聚糖酶 | 第22-25页 |
1.3.2 β-1,3-葡聚糖酶 | 第25-29页 |
1.3.3 β-葡聚糖酶基因的克隆 | 第29-31页 |
1.3.4 β-葡聚糖酶基因的重组表达 | 第31-33页 |
1.4 本课题的意义、研究内容和实施方案 | 第33-36页 |
2 索拉胶降解菌的筛选、鉴定和产酶优化 | 第36-61页 |
2.1 材料与方法 | 第36-46页 |
2.1.1 实验材料 | 第36-39页 |
2.1.2 实验仪器 | 第39页 |
2.1.3 实验方法 | 第39-46页 |
2.2 结果与讨论 | 第46-59页 |
2.2.1 索拉胶降解菌筛选方法的建立 | 第46-47页 |
2.2.2 菌种培养 | 第47-48页 |
2.2.3 菌种鉴定 | 第48-50页 |
2.2.4 胞外产酶情况的分析 | 第50-51页 |
2.2.5 类芽孢杆菌S09产索拉胶水解酶的培养优化 | 第51-58页 |
2.2.6 类芽孢杆菌S09细胞生长与产酶量的关系 | 第58页 |
2.2.7 S09菌发酵粗酶液对索拉胶的水解情况 | 第58-59页 |
2.3 本章小结 | 第59-61页 |
3 类芽孢杆菌S09 β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆与重组表达 | 第61-86页 |
3.1 材料与方法 | 第61-77页 |
3.1.1 实验材料 | 第61-65页 |
3.1.2 实验仪器 | 第65-66页 |
3.1.3 实验方法 | 第66-77页 |
3.2 结果与讨论 | 第77-85页 |
3.2.1 S09菌基因组文库的构建和筛选 | 第77-78页 |
3.2.2 β-1,3-1,4-葡聚糖酶的序列分析 | 第78-80页 |
3.2.3 PlicA基因的克隆与重组表达 | 第80-81页 |
3.2.4 重组PlicA酶的酶学性质 | 第81-85页 |
3.3 本章小结 | 第85-86页 |
4 类芽孢杆菌S09 β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与重组表达 | 第86-115页 |
4.1 材料与方法 | 第86-99页 |
4.1.1 实验材料 | 第86-88页 |
4.1.2 实验仪器 | 第88-89页 |
4.1.3 实验方法 | 第89-99页 |
4.2 结果与分析 | 第99-113页 |
4.2.1 β-1,3-葡聚糖酶基因部分序列的克隆 | 第99-100页 |
4.2.2 β-1,3-葡聚糖酶基因完整序列的克隆 | 第100-101页 |
4.2.3 β-1,3-葡聚糖酶基因与蛋白序列分析 | 第101-105页 |
4.2.4 β-1,3-葡聚糖酶PglA及其截短蛋白的重组表达 | 第105-108页 |
4.2.5 β-1,3-葡聚糖酶PglA及其截短蛋白的酶学性质 | 第108-112页 |
4.2.6 PglA酶及其截短衍生蛋白对不溶性多糖的结合活性 | 第112-113页 |
4.3 本章小结 | 第113-115页 |
5 索拉胶水解酶的分离纯化及酶学性质研究 | 第115-142页 |
5.1 材料与方法 | 第115-126页 |
5.1.1 实验材料 | 第115-118页 |
5.1.2 实验仪器 | 第118-119页 |
5.1.3 实验方法 | 第119-126页 |
5.2 结果与讨论 | 第126-140页 |
5.2.1 索拉胶水解酶的纯化和酶谱分析 | 第126-129页 |
5.2.2 索拉胶水解酶SalA的质谱鉴定 | 第129-132页 |
5.2.3 索拉胶水解酶SalA基因的克隆 | 第132-133页 |
5.2.4 索拉胶水解酶SalA的序列分析 | 第133-137页 |
5.2.5 索拉胶水解酶SalA的酶学性质分析 | 第137-140页 |
5.3 本章小结 | 第140-142页 |
6 索拉胶酶解产物的结构分析与活性探究 | 第142-156页 |
6.1 材料与方法 | 第142-147页 |
6.1.1 实验材料 | 第142-143页 |
6.1.2 实验仪器 | 第143-144页 |
6.1.3 试验动物 | 第144页 |
6.1.4 实验方法 | 第144-147页 |
6.2 结果与讨论 | 第147-155页 |
6.2.1 酶解终产物的纯化 | 第147-148页 |
6.2.2 GPC分析 | 第148-149页 |
6.2.3 质谱分析 | 第149页 |
6.2.4 核磁共振分析 | 第149-152页 |
6.2.5 索拉胶寡糖对DPPH自由基的清除作用 | 第152-153页 |
6.2.6 索拉胶寡糖对环磷酰胺致免疫低下小鼠的恢复作用 | 第153-155页 |
6.3 本章小结 | 第155-156页 |
7 结论 | 第156-159页 |
7.1 研究小结 | 第156-158页 |
7.2 本文创新点 | 第158页 |
7.3 对后续研究工作的建议 | 第158-159页 |
致谢 | 第159-160页 |
参考文献 | 第160-182页 |
附录 | 第182页 |