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索拉胶降解菌产葡聚糖酶的研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
目录第10-13页
1 绪论第13-36页
    1.1 葡聚糖第13-18页
        1.1.1 β-1,3-1,4-葡聚糖第14-16页
        1.1.2 β-1,3-葡聚糖第16-17页
        1.1.3 索拉胶第17-18页
    1.2 寡糖第18-21页
        1.2.1 寡糖的分类第19页
        1.2.2 功能性寡糖的应用第19-20页
        1.2.3 寡糖的制备第20-21页
    1.3 β-葡聚糖酶第21-33页
        1.3.1 β-1,3-1,4-葡聚糖酶第22-25页
        1.3.2 β-1,3-葡聚糖酶第25-29页
        1.3.3 β-葡聚糖酶基因的克隆第29-31页
        1.3.4 β-葡聚糖酶基因的重组表达第31-33页
    1.4 本课题的意义、研究内容和实施方案第33-36页
2 索拉胶降解菌的筛选、鉴定和产酶优化第36-61页
    2.1 材料与方法第36-46页
        2.1.1 实验材料第36-39页
        2.1.2 实验仪器第39页
        2.1.3 实验方法第39-46页
    2.2 结果与讨论第46-59页
        2.2.1 索拉胶降解菌筛选方法的建立第46-47页
        2.2.2 菌种培养第47-48页
        2.2.3 菌种鉴定第48-50页
        2.2.4 胞外产酶情况的分析第50-51页
        2.2.5 类芽孢杆菌S09产索拉胶水解酶的培养优化第51-58页
        2.2.6 类芽孢杆菌S09细胞生长与产酶量的关系第58页
        2.2.7 S09菌发酵粗酶液对索拉胶的水解情况第58-59页
    2.3 本章小结第59-61页
3 类芽孢杆菌S09 β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因的克隆与重组表达第61-86页
    3.1 材料与方法第61-77页
        3.1.1 实验材料第61-65页
        3.1.2 实验仪器第65-66页
        3.1.3 实验方法第66-77页
    3.2 结果与讨论第77-85页
        3.2.1 S09菌基因组文库的构建和筛选第77-78页
        3.2.2 β-1,3-1,4-葡聚糖酶的序列分析第78-80页
        3.2.3 PlicA基因的克隆与重组表达第80-81页
        3.2.4 重组PlicA酶的酶学性质第81-85页
    3.3 本章小结第85-86页
4 类芽孢杆菌S09 β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与重组表达第86-115页
    4.1 材料与方法第86-99页
        4.1.1 实验材料第86-88页
        4.1.2 实验仪器第88-89页
        4.1.3 实验方法第89-99页
    4.2 结果与分析第99-113页
        4.2.1 β-1,3-葡聚糖酶基因部分序列的克隆第99-100页
        4.2.2 β-1,3-葡聚糖酶基因完整序列的克隆第100-101页
        4.2.3 β-1,3-葡聚糖酶基因与蛋白序列分析第101-105页
        4.2.4 β-1,3-葡聚糖酶PglA及其截短蛋白的重组表达第105-108页
        4.2.5 β-1,3-葡聚糖酶PglA及其截短蛋白的酶学性质第108-112页
        4.2.6 PglA酶及其截短衍生蛋白对不溶性多糖的结合活性第112-113页
    4.3 本章小结第113-115页
5 索拉胶水解酶的分离纯化及酶学性质研究第115-142页
    5.1 材料与方法第115-126页
        5.1.1 实验材料第115-118页
        5.1.2 实验仪器第118-119页
        5.1.3 实验方法第119-126页
    5.2 结果与讨论第126-140页
        5.2.1 索拉胶水解酶的纯化和酶谱分析第126-129页
        5.2.2 索拉胶水解酶SalA的质谱鉴定第129-132页
        5.2.3 索拉胶水解酶SalA基因的克隆第132-133页
        5.2.4 索拉胶水解酶SalA的序列分析第133-137页
        5.2.5 索拉胶水解酶SalA的酶学性质分析第137-140页
    5.3 本章小结第140-142页
6 索拉胶酶解产物的结构分析与活性探究第142-156页
    6.1 材料与方法第142-147页
        6.1.1 实验材料第142-143页
        6.1.2 实验仪器第143-144页
        6.1.3 试验动物第144页
        6.1.4 实验方法第144-147页
    6.2 结果与讨论第147-155页
        6.2.1 酶解终产物的纯化第147-148页
        6.2.2 GPC分析第148-149页
        6.2.3 质谱分析第149页
        6.2.4 核磁共振分析第149-152页
        6.2.5 索拉胶寡糖对DPPH自由基的清除作用第152-153页
        6.2.6 索拉胶寡糖对环磷酰胺致免疫低下小鼠的恢复作用第153-155页
    6.3 本章小结第155-156页
7 结论第156-159页
    7.1 研究小结第156-158页
    7.2 本文创新点第158页
    7.3 对后续研究工作的建议第158-159页
致谢第159-160页
参考文献第160-182页
附录第182页

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