| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-15页 |
| 1.1 热带假丝酵母 | 第9-12页 |
| 1.1.1 热带假丝酵母的工业应用 | 第9-10页 |
| 1.1.2 热带假丝酵母代谢工程方法进展 | 第10-12页 |
| 1.2 丙酮酸脱羧酶 | 第12-14页 |
| 1.3 立题意义与研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-22页 |
| 2.1 材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第15页 |
| 2.1.2 引物 | 第15-16页 |
| 2.1.3 主要试剂和工具酶 | 第16页 |
| 2.1.4 培养基 | 第16页 |
| 2.1.5 仪器 | 第16-17页 |
| 2.2 方法 | 第17-22页 |
| 2.2.1 尿嘧啶缺陷型突变株的筛选 | 第17页 |
| 2.2.2 酵母染色体的提取 | 第17-18页 |
| 2.2.3 目的基因片段 PCR | 第18-19页 |
| 2.2.4 基因敲除突变盒的构建 | 第19页 |
| 2.2.5 酵母的转化 | 第19页 |
| 2.2.6 标记基因的剔除 | 第19页 |
| 2.2.7 细胞抽提物制备 | 第19-20页 |
| 2.2.8 细胞抽提物蛋白含量的测定 | 第20页 |
| 2.2.9 PDC 酶活测定 | 第20-22页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第22-38页 |
| 3.1 尿嘧啶缺陷型突变株的筛选 | 第22-23页 |
| 3.2 PDC 基因敲除突变盒的构建 | 第23-26页 |
| 3.3 热带假丝酵母 C. tropicalis (pdc/pdc)突变株的构建 | 第26-31页 |
| 3.4 PDC 酶活的测定 | 第31-32页 |
| 3.5 热带假丝酵母 PDC 基因敲除突变株的生长情况探究 | 第32-34页 |
| 3.6 热带假丝酵母 C. tropicalis (hsp/hsp)突变株的构建 | 第34-38页 |
| 主要结论与展望 | 第38-40页 |
| 主要结论 | 第38页 |
| 展望 | 第38-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-43页 |
| 附录 A | 第43-44页 |
| 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第43-44页 |
| 附录 B 尿嘧啶缺陷型突变株的 URA3 基因突变情况 | 第44-47页 |
| 1. 突变株 C. tropicalis XZW 的 URA3 基因突变情况比对 | 第44-45页 |
| 2. 突变株 C. tropicalis XZX 的 URA3 基因突变情况比对 | 第45-46页 |
| 3. 突变株 C. tropicalis XZB 的 URA3 基因突变情况比对 | 第46-47页 |
| 附录 C 菌株 C. tropicalis XZX04 的 PCR 验证条带测序结果比对 | 第47-54页 |
| 1. PDC-hisG-PDC 片段序列比对情况 | 第47-50页 |
| 2. PDC-PDCm-URA3-PDCm-PDC 片段序列比对情况 | 第50-54页 |
